| 中文摘要 | 第4-6页 |
| Abstract | 第6-8页 |
| 第1章 绪论 | 第14-26页 |
| 1.1 辣椒和辣椒素 | 第14-17页 |
| 1.1.1 辣椒 | 第14-15页 |
| 1.1.2 辣椒素 | 第15-17页 |
| 1.2 辣椒素的生物合成及Pun1基因 | 第17-21页 |
| 1.2.1 辣椒素的生物合成及途径 | 第17-20页 |
| 1.2.2 Pun1基因表达及与辣椒素合成关系 | 第20-21页 |
| 1.3 AP2/ERF家族转录因子研究进展 | 第21-24页 |
| 1.3.1 转录因子概述 | 第21-22页 |
| 1.3.2 AP2/ERF转录因子的起源与分类 | 第22页 |
| 1.3.3 AP2/ERF转录因子的结构与功能 | 第22-24页 |
| 1.4 立题依据 | 第24-26页 |
| 第2章 ERF和JERF的克隆与生物信息学分析 | 第26-54页 |
| 2.1 实验材料 | 第26-27页 |
| 2.1.1 植物材料 | 第26页 |
| 2.1.2 载体与菌株信息 | 第26-27页 |
| 2.1.3 主要试剂 | 第27页 |
| 2.1.4 实验药品与培养基的配制 | 第27页 |
| 2.2 实验方法 | 第27-34页 |
| 2.2.1 辣椒的总RNA提取 | 第27-28页 |
| 2.2.2 cDNA第一链合成 | 第28-29页 |
| 2.2.3 聚合酶链式反应（PCR）扩增目的基因 | 第29-31页 |
| 2.2.4 PCR产物的回收 | 第31页 |
| 2.2.5 载体质粒的提取 | 第31页 |
| 2.2.6 载体的酶切与线性化载体的回收 | 第31-32页 |
| 2.2.7 目的片段与载体的连接反应 | 第32页 |
| 2.2.8 重组质粒的转化 | 第32-33页 |
| 2.2.9 菌液PCR鉴定 | 第33-34页 |
| 2.2.10 重组质粒提取 | 第34页 |
| 2.3 结果与分析 | 第34-54页 |
| 2.3.1 辣椒的总RNA提取与cDNA第一链的合成 | 第34-35页 |
| 2.3.2 目的基因的扩增与回收 | 第35-37页 |
| 2.3.3 载体的切割与回收 | 第37页 |
| 2.3.4 重组质粒的构建 | 第37-40页 |
| 2.3.5 生物信息学分析 | 第40-54页 |
| 2.3.5.1 ERF转录因子分析 | 第40-47页 |
| 2.3.5.1.1 蛋白分析 | 第40-42页 |
| 2.3.5.1.2 功能域分析 | 第42-43页 |
| 2.3.5.1.3 亚细胞定位预测 | 第43页 |
| 2.3.5.1.4 蛋白二级结构分析 | 第43-44页 |
| 2.3.5.1.5 磷酸化位点分析 | 第44-45页 |
| 2.3.5.1.6 同源性分析 | 第45-47页 |
| 2.3.5.2 JERF转录因子分析 | 第47-54页 |
| 2.3.5.2.1 蛋白分析 | 第47-49页 |
| 2.3.5.2.2 功能域分析 | 第49-50页 |
| 2.3.5.2.3 亚细胞定位分析 | 第50页 |
| 2.3.5.2.4 蛋白的二级结构分析 | 第50-51页 |
| 2.3.5.2.5 磷酸化位点分析 | 第51-52页 |
| 2.3.5.2.6 同源性分析 | 第52-54页 |
| 第3章 ERF和JERF的表达分析 | 第54-63页 |
| 3.1 实验材料 | 第54页 |
| 3.1.1 植物材料 | 第54页 |
| 3.1.2 主要药品与试剂 | 第54页 |
| 3.2 实验方法 | 第54-57页 |
| 3.2.1 总RNA的提取 | 第54-55页 |
| 3.2.2 cDNA第一链的合成 | 第55-56页 |
| 3.2.3 实时荧光定量PCR | 第56-57页 |
| 3.2.4 实时荧光定量PCR引物 | 第57页 |
| 3.3 结果与分析 | 第57-63页 |
| 3.3.1 辣椒果实的总RNA提取与质量检测 | 第57-58页 |
| 3.3.2 ERF和JERF基因与下游基因表达量分析 | 第58-63页 |
| 3.3.2.1 衡阳伏地尖品种(Capsicum annuum ) | 第58-60页 |
| 3.3.2.2 云南小米辣品种(Capsicum frutescens ) | 第60-61页 |
| 3.3.2.3 海南黄灯笼椒品种(Capsicum chinense ) | 第61-63页 |
| 第4章 Pun1基因启动子片段的克隆与生物信息学分析 | 第63-76页 |
| 4.1 实验材料 | 第63-64页 |
| 4.1.1 植物材料 | 第63页 |
| 4.1.2 实验菌株与载体 | 第63-64页 |
| 4.1.3 主要仪器 | 第64页 |
| 4.1.4 主要试剂与培养基配制 | 第64页 |
| 4.2 实验方法 | 第64-68页 |
| 4.2.1 辣椒基因组DNA的提取 | 第64-65页 |
| 4.2.2 聚合酶链式反应扩增启动子片段 | 第65-66页 |
| 4.2.3 PCR产物的回收 | 第66页 |
| 4.2.4 载体质粒的提取 | 第66-67页 |
| 4.2.5 载体的酶切与线性化载体的回收 | 第67页 |
| 4.2.6 启动子片段与报告载体的连接反应 | 第67-68页 |
| 4.2.7 重组质粒的转化 | 第68页 |
| 4.2.8 菌液PCR鉴定 | 第68页 |
| 4.2.9 重组质粒提取 | 第68页 |
| 4.3 结果与分析 | 第68-76页 |
| 4.3.1 辣椒的基因组DNA提取 | 第68-69页 |
| 4.3.2 启动子片段的扩增与回收 | 第69-70页 |
| 4.3.3 载体的酶切与回收 | 第70-71页 |
| 4.3.4 重组质粒的构建 | 第71-73页 |
| 4.3.5 生物信息学分析 | 第73-76页 |
| 第5章 ERF家族转录因子与Pun1相互作用的验证 | 第76-89页 |
| 5.1 实验材料 | 第76-79页 |
| 5.1.1 实验菌株与重组载体 | 第76-77页 |
| 5.1.2 主要试剂 | 第77页 |
| 5.1.3 实验药品与培养基的配制 | 第77-79页 |
| 5.2 实验方法 | 第79-85页 |
| 5.2.1 酵母菌株感受态细胞的制备 | 第79-80页 |
| 5.2.2 目标质粒的单酶切与回收 | 第80页 |
| 5.2.3 线性目标质粒的转化 | 第80-81页 |
| 5.2.4 PCR鉴定 | 第81-82页 |
| 5.2.5 报告质粒的转化 | 第82-83页 |
| 5.2.6 PCR鉴定 | 第83-84页 |
| 5.2.7 显色反应实验 | 第84-85页 |
| 5.3 结果与分析 | 第85-89页 |
| 5.3.1 目标质粒的单酶切与回收 | 第85-86页 |
| 5.3.2 菌液PCR验证 | 第86-87页 |
| 5.3.3 液体显色实验结果 | 第87-89页 |
| 第6章 讨论与结论 | 第89-93页 |
| 6.1 讨论 | 第89-91页 |
| 6.1.1 基因与启动子片段的克隆 | 第89-90页 |
| 6.1.2 表达量分析 | 第90页 |
| 6.1.3 酵母单杂实验 | 第90-91页 |
| 6.1.4 展望 | 第91页 |
| 6.2 结论 | 第91-93页 |
| 参考文献 | 第93-99页 |
| 作者简介 | 第99-100页 |
| 致谢 | 第100-101页 |
