| 摘要 | 第6-7页 |
| 英文摘要 | 第7页 |
| 第一章 绪论 | 第12-21页 |
| 1.1 果胶物质 | 第12-14页 |
| 1.1.1 果胶的分布 | 第12页 |
| 1.1.2 果胶的结构 | 第12-13页 |
| 1.1.3 果胶的分类 | 第13页 |
| 1.1.4 果胶的功能 | 第13-14页 |
| 1.2 果胶酶 | 第14-20页 |
| 1.2.1 果胶酶的分类 | 第14-19页 |
| 1.2.2 果胶酶的应用 | 第19-20页 |
| 1.3 研究的目的与意义 | 第20-21页 |
| 第二章 材料与方法 | 第21-40页 |
| 2.1 实验材料 | 第21-25页 |
| 2.1.1 菌株与质粒 | 第21页 |
| 2.1.2 引物合成与DNA测序 | 第21页 |
| 2.1.3 试剂盒、工具酶和生化试剂 | 第21-22页 |
| 2.1.4 实验仪器 | 第22-23页 |
| 2.1.5 培养基组分 | 第23-24页 |
| 2.1.6 常用溶液 | 第24-25页 |
| 2.1.7 生物学软件及网站 | 第25页 |
| 2.2 实验方法 | 第25-40页 |
| 2.2.1 菌株发酵液酶活的评估 | 第25-26页 |
| 2.2.2 菌株基因组的提取 | 第26页 |
| 2.2.3 菌株RNA的提取 | 第26-27页 |
| 2.2.4 菌株cDNA的获得 | 第27-28页 |
| 2.2.5 基因全长的获得 | 第28-31页 |
| 2.2.6 表达载体的构建 | 第31-34页 |
| 2.2.7 重组载体在毕赤酵母中的表达 | 第34-36页 |
| 2.2.8 酶液的浓缩及纯化 | 第36-37页 |
| 2.2.9 重组酶液蛋白浓度的测定 | 第37页 |
| 2.2.10 NfPG4、NfPG5和NfPG6的脱糖基化处理 | 第37页 |
| 2.2.11 NfPG4、NfPG5和NfPG6酶学性质的测定 | 第37-38页 |
| 2.2.12 NfPG4、NfPG5和NfPG6底物特异性实验 | 第38页 |
| 2.2.13 NfPG4、NfPG5和NfPG6产物分析 | 第38-40页 |
| 第三章 结果与讨论 | 第40-60页 |
| 3.1 聚半乳糖醛酸酶基因NfPG4、NfPG5和NfPG6的克隆 | 第40-47页 |
| 3.1.1 N.fischeri P1菌株果胶酶活性的评估与基因组的提取 | 第40页 |
| 3.1.2 总RNA的提取及cDNA的获得 | 第40-41页 |
| 3.1.3 目的基因的获得 | 第41-46页 |
| 3.1.4 表达载体的构建 | 第46-47页 |
| 3.2 聚半乳糖醛酸酶NfPG4、NfPG5和NfPG6在毕赤酵母中的异源表达和纯化 | 第47-48页 |
| 3.2.1 异源表达 | 第47页 |
| 3.2.2 蛋白纯化 | 第47-48页 |
| 3.3 聚半乳糖醛酸酶NfPG4、NfPG5和NfPG6的基本酶学性质 | 第48-58页 |
| 3.3.1 温度对NfPG4、NfPG5和NfPG6活力的影响 | 第48-50页 |
| 3.3.2 pH对NfPG4、NfPG5和NfPG6活力的影响 | 第50-52页 |
| 3.3.3 NfPG4、NfPG5和NfPG6的动力学参数 | 第52页 |
| 3.3.4 脱糖基化对NfPG4、NfPG5和NfPG6酶学性质的影响 | 第52-55页 |
| 3.3.5 金属离子及化学试剂对NfPG4、NfPG5和NfPG6活力的影响 | 第55-57页 |
| 3.3.6 NfPG4、NfPG5和NfPG6的底物特异性 | 第57页 |
| 3.3.7 NfPG4、NfPG5和NfPG6的水解产物分析 | 第57-58页 |
| 3.4 讨论 | 第58-60页 |
| 第四章 全文结论 | 第60-61页 |
| 参考文献 | 第61-67页 |
| 致谢 | 第67-68页 |
| 作者简历 | 第68页 |
