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中囊病病毒免疫胶体金检测试纸条研制

摘要第6-7页
Abstract第7页
第一章 文献综述第8-14页
    1.1 蜜蜂囊状幼虫病病毒的研究概况第8-10页
        1.1.1 中囊病流行现状第8-9页
        1.1.2 蜜蜂囊状幼虫病病毒的生物学特征第9页
        1.1.3 蜜蜂囊状幼虫病病毒的检测方法第9-10页
            1.1.3.1 临床诊断方法第9页
            1.1.3.2 电子显微镜检测方法第9页
            1.1.3.3 免疫学诊断方法第9页
            1.1.3.4 RT-PCR检测方法第9-10页
    1.2 免疫胶体金技术的概况第10-12页
        1.2.1 胶体金技术概况第10-11页
        1.2.2 胶体金免疫快速诊断技术研究概况第11-12页
            1.2.2.1 斑点免疫胶体金渗滤法(DIGFA)第11页
            1.2.2.2 胶体金免疫层析法(CGEIA)第11-12页
    1.3 研究意义第12-14页
第二章 CSBV江西株结构蛋白基因vp1、vp3的克隆及遗传进化分析第14-31页
    2.1 材料与方法第14-18页
        2.1.1 实验材料第14页
        2.1.2 实验试剂及仪器第14-15页
        2.1.3 引物设计及合成第15页
        2.1.4 实验方法第15-18页
            2.1.4.1 蜜蜂总RNA的提取及质量检测第15-16页
            2.1.4.2 反转录反应第16页
            2.1.4.3 目的基因的PCR扩增及电泳检测第16页
            2.1.4.4 目的基因的克隆第16-17页
            2.1.4.5 序列分析第17页
            2.1.4.6 遗传进化分析第17-18页
    2.2 结果第18-29页
        2.2.1 vp1及vp3基因的克隆第18-21页
        2.2.2 CSBV江西株vp1及vp3基因核酸和氨基酸序列分析第21-23页
        2.2.3 系统进化树分析第23-27页
        2.2.4 基因组重组分析第27-29页
    2.3 讨论第29-30页
    2.4 结论第30-31页
第三章 囊状幼虫病病毒单克隆及多克隆抗体的制备第31-39页
    3.1 实验材料第31页
    3.2 主要试剂及相关溶液的配制第31-32页
    3.3 实验方法第32-35页
        3.3.1 CSBV江西株vp3基因单克隆抗体的制备第32-34页
            3.3.1.1 结构蛋白vp3基因的原核表达第32-33页
            3.3.1.2 vp3基因单克隆抗体制备第33-34页
        3.3.2 CSBV江西株vp1基因多克隆抗体的制备第34页
            3.3.2.1 vp1多肽抗原的制备第34页
            3.3.2.2 多克隆抗体的制备第34页
        3.3.3 单克隆与多克隆抗体的SDS-PAGE电泳检测第34-35页
        3.3.4 单克隆与多克隆抗体的Western blot鉴定第35页
    3.4 结果第35-37页
        3.4.1 vp3重组蛋白的表达及纯化第35-36页
        3.4.2 单克隆与多克隆抗体的SDS-PAGE电泳检测第36-37页
        3.4.3 单克隆与多克隆抗体的Western blot鉴定第37页
    3.5 讨论第37-39页
第四章 中囊病胶体金试纸的组装及检测第39-45页
    4.1 材料与方法第39-42页
        4.1.1 实验材料第39页
            4.1.1.1 抗原与抗体第39页
            4.1.1.2 试剂及材料第39页
        4.1.2 实验方法第39-42页
            4.1.2.1 胶体金的制备第39-40页
            4.1.2.2 胶体金稳定性观察第40页
            4.1.2.3 vp3单抗与胶体金结合的最佳标记量的确定第40页
            4.1.2.4 vp3单抗与胶体金结合最适PH值的确定第40页
            4.1.2.5 vp3单抗的胶体金标记第40页
            4.1.2.6 胶体金免疫层析试纸条的制备第40-41页
            4.1.2.7 试纸条的检测方法及结果判定第41-42页
    4.2 结果第42-43页
        4.2.1 vp3单抗与胶体金结合的最佳标记量的确定第42页
        4.2.2 vp3单抗与胶体金结合最适PH值的确定第42页
        4.2.3 胶体金免疫层析试纸条检测结果第42-43页
    4.3 讨论第43-45页
第五章 结论与展望第45-46页
    5.1 主要结论第45页
    5.2 展望第45-46页
参考文献第46-51页
硕士期间已发表和已投稿论文情况第51-52页
致谢第52页

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