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马铃薯StBAG3基因的克隆及其在抗晚疫病过程中的功能研究

摘要第3-4页
Abstract第4-5页
缩略词表第11-12页
1 前言第12-22页
    1.1 马铃薯晚疫病的危害第12页
    1.2 马铃薯晚疫病的发病症状第12页
    1.3 马铃薯晚疫病的侵染循环第12-13页
    1.4 马铃薯晚疫病的发生条件第13页
    1.5 马铃薯抗病机制的研究第13-15页
        1.5.1 植物激素在植物抗病信号路径中的作用第14-15页
        1.5.2 病原菌对寄主植物的诱骗策略第15页
    1.6 BAG蛋白的研究第15-18页
        1.6.1 动物中的BAG蛋白第16-17页
        1.6.2 植物中的BAG蛋白第17-18页
    1.7 病毒诱导的基因沉默(VIGS)第18-21页
        1.7.1 VIGS的机制第18-19页
        1.7.2 VIGS载体的种类第19-21页
        1.7.3 影响VIGS沉默效率的因素第21页
    1.8 本研究的内容及意义第21-22页
2 StBAG3的克隆及序列分析第22-34页
    2.1 材料与方法第22-25页
        2.1.1 供试的马铃薯材料第22页
        2.1.2 供试载体与菌株第22页
        2.1.3 酶及试剂第22页
        2.1.4 引物设计第22页
        2.1.5 马铃薯叶片总RNA的提取第22-23页
        2.1.6 cDNA合成第23页
        2.1.7 PCR扩增获取目的基因片段第23-24页
        2.1.8 PCR产物纯化回收第24页
        2.1.9 大肠杆菌感受态细胞的制备第24-25页
        2.1.10 PCR产物的测序第25页
        2.1.11 基因生物信息学分析第25页
    2.2 结果分析第25-33页
        2.2.1 StBAG3基因全序列的获得第26页
        2.2.2 StBAG3基因的克隆第26-29页
        2.2.3 StBAG3生物信息学分析第29-33页
    2.3 讨论第33-34页
3 马铃薯StBAG3的表达谱分析和晚疫菌诱导表达研究第34-40页
    3.1 材料与方法第34-35页
        3.1.1 植物材料第34页
        3.1.2 试剂与酶第34页
        3.1.3 引物第34页
        3.1.4 植物组织总RNA的提取和cDNA的合成第34页
        3.1.5 PCR反应体系及程序第34页
        3.1.6 马铃薯晚疫菌接种实验第34-35页
        3.1.7 数据处理第35页
    3.2 结果分析第35-38页
        3.2.1 不同品种马铃薯StBAG3基因相对表达量测定第35-36页
        3.2.2 马铃薯不同组织中StBAG3基因相对表达量的测定第36-37页
        3.2.3 接种晚疫菌后马铃薯叶片中StBAG3的相对表达量第37-38页
    3.3 讨论第38-40页
4 StBAG3沉默载体和超表达载体的构建第40-53页
    4.1 材料第40-41页
        4.1.1 供试载体和菌株第40页
        4.1.2 酶和试剂第40页
        4.1.3 培养基第40页
        4.1.4 引物设计第40-41页
    4.2 方法第41-43页
        4.2.1 克隆目片段并连接到平末端载体第41页
        4.2.2 质粒提取方法第41页
        4.2.3 酶切方法第41页
        4.2.4 PCR片段的胶回收第41页
        4.2.5 农杆菌感受态制备及转化方法第41-42页
        4.2.6 目的片段与载体连接第42页
        4.2.7 阳性克隆的鉴定第42页
        4.2.8 农杆菌的转化第42-43页
    4.3 结果分析第43-52页
        4.3.1 载体构建的策略第43-44页
        4.3.2 超表达载体的构建第44-48页
        4.3.3 沉默(VIGS)载体的构建第48-52页
    4.4 讨论第52-53页
5 利用瞬时表达系统初步研究StBAG3汾在马铃薯抗性建立过程中的作用第53-57页
    5.1 材料与方法第53-54页
        5.1.1 马铃薯晚疫菌第53页
        5.1.2 供试的马铃薯材料第53页
        5.1.3 试剂第53页
        5.1.4 马铃薯晚疫菌培养基第53页
        5.1.5 农杆菌瞬时表达侵染试剂第53页
        5.1.6 农杆菌介导的瞬时表达第53-54页
        5.1.7 马铃薯晚疫菌接种方法第54页
    5.2 结果分析第54-55页
    5.3 讨论第55-57页
6 结论第57-58页
致谢第58-59页
参考文献第59-68页
作者简介第68页

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