| 摘要 | 第4-6页 |
| ABSTRACT | 第6-7页 |
| 符号说明 | 第10-11页 |
| 第一章 miRNAs在肝癌发病中的作用(文献综述) | 第11-16页 |
| 1.1 miRNAs的概述 | 第11-12页 |
| 1.2 miRNAs在肝癌发病中的作用 | 第12-15页 |
| 1.2.1 miRNAs在肝癌发病中的基础研究 | 第12-14页 |
| 1.2.2 miRNAs在肝癌发病中的临床研究 | 第14-15页 |
| 1.3 结论与展望 | 第15-16页 |
| 第二章 HepG2细胞系Small RNAs高通量测序及全局分析 | 第16-38页 |
| 2.1 实验材料 | 第16-17页 |
| 2.1.1 细胞材料 | 第16页 |
| 2.1.2 主要试剂与药品 | 第16-17页 |
| 2.1.3 主要仪器设备 | 第17页 |
| 2.2 实验方法 | 第17-23页 |
| 2.2.1 细胞培养基配制 | 第17页 |
| 2.2.2 HepG2和UC-MSCs培养 | 第17-19页 |
| 2.2.2.1 细胞复苏 | 第17-18页 |
| 2.2.2.2 细胞传代并铺板 | 第18页 |
| 2.2.2.3 UC-MSCs条件培养基处理HepG2细胞 | 第18页 |
| 2.2.2.4 总RNA提取 | 第18-19页 |
| 2.2.2.5 RNA纯化 | 第19页 |
| 2.2.3 HepG2细胞系RNA样本的质量检测 | 第19页 |
| 2.2.4 HepG2细胞系cDNA文库制备及高通量测序 | 第19-20页 |
| 2.2.5 HepG2细胞系Small RNAs测序数据输出及全局分析 | 第20-23页 |
| 2.2.5.1 Small RNAs测序数据的输出 | 第20页 |
| 2.2.5.2 已知miRNAs鉴定 | 第20-21页 |
| 2.2.5.3 miRNAs差异表达分析 | 第21页 |
| 2.2.5.4 qRT-PCR验证 | 第21-22页 |
| 2.2.5.5 miRNAs候选靶基因GO功能注释分析 | 第22页 |
| 2.2.5.6 miRNAs候选靶基因KEGG信号通路注释分析 | 第22-23页 |
| 2.2.5.7 肝癌HepG2细胞系miRNAs与mRNAs数据关联分析 | 第23页 |
| 2.3 结果与分析 | 第23-35页 |
| 2.3.1 HepG2细胞系RNA样本质量检测结果 | 第23-24页 |
| 2.3.2 HepG2细胞系Small RNAs高通量测序及全局分析 | 第24-35页 |
| 2.3.2.1 Small RNAs测序数据的输出统计 | 第24页 |
| 2.3.2.2 已知miRNAs鉴定结果 | 第24-25页 |
| 2.3.2.3 miRNAs差异表达分析结果 | 第25-27页 |
| 2.3.2.4 qRT-PCR验证结果 | 第27-28页 |
| 2.3.2.5 miRNAs候选靶基因GO功能注释分析结果 | 第28-30页 |
| 2.3.2.6 miRNAs候选靶基因KEGG信号通路注释分析结果 | 第30-34页 |
| 2.3.2.7 差异表达miRNAs与mRNAs关联分析结果 | 第34-35页 |
| 2.4 讨论 | 第35-37页 |
| 2.5 结论 | 第37-38页 |
| 第三章 miR-3065-5p对HepG2的生物学行为的影响 | 第38-47页 |
| 3.1 实验材料 | 第38页 |
| 3.1.1 主要试剂与耗材 | 第38页 |
| 3.1.2 主要仪器设备 | 第38页 |
| 3.2 实验方法 | 第38-40页 |
| 3.2.1 细胞培养与转染 | 第39页 |
| 3.2.2 细胞增殖能力检测 | 第39页 |
| 3.2.3 细胞侵袭能力检测 | 第39-40页 |
| 3.2.4 细胞周期检测 | 第40页 |
| 3.2.5 细胞凋亡检测 | 第40页 |
| 3.2.6 靶基因表达水平检测 | 第40页 |
| 3.3 实验结果 | 第40-45页 |
| 3.3.1 miRNA agomir转染效果验证 | 第40-41页 |
| 3.3.2 细胞增殖能力检测结果 | 第41-42页 |
| 3.3.3 细胞侵袭能力检测结果 | 第42-43页 |
| 3.3.4 细胞周期检测结果 | 第43页 |
| 3.3.5 细胞凋亡检测结果 | 第43-44页 |
| 3.3.6 靶基因表达水平检测结果 | 第44-45页 |
| 3.4 讨论 | 第45-46页 |
| 3.5 结论 | 第46-47页 |
| 参考文献 | 第47-56页 |
| 附录 | 第56-63页 |
| 攻读学位期间取得的研究成果 | 第63-64页 |
| 致谢 | 第64页 |
