| 摘要 | 第6-7页 |
| Abstract | 第7-8页 |
| 中英文缩略表 | 第9-14页 |
| 第一章 文献综述 | 第14-21页 |
| 1.1 Marc-145细胞系特征及应用研究 | 第14-15页 |
| 1.2 细胞培养技术的发展 | 第15-16页 |
| 1.3 猪繁殖与呼吸综合征发展 | 第16-17页 |
| 1.3.1 PRRS在国外的研究发展及现状 | 第16页 |
| 1.3.2 PRRS在国内的研究发展及现状 | 第16-17页 |
| 1.4 猪繁殖与呼吸综合征疫苗研究进展 | 第17-20页 |
| 1.5 论文的研究目的及意义 | 第20-21页 |
| 第二章 Marc-145细胞系的引进与鉴定 | 第21-31页 |
| 2.1 材料及仪器设备 | 第21-23页 |
| 2.1.1 主要材料 | 第21页 |
| 2.1.2 主要试剂 | 第21-22页 |
| 2.1.3 实验动物 | 第22页 |
| 2.1.4 主要仪器设备 | 第22页 |
| 2.1.5 主要溶液及培养基配制 | 第22-23页 |
| 2.2 试验方法 | 第23页 |
| 2.2.1 Marc-145细胞系的引进与建库 | 第23页 |
| 2.2.1.1 细胞引进 | 第23页 |
| 2.2.1.2 细胞建库 | 第23页 |
| 2.3 细胞系鉴定 | 第23-24页 |
| 2.3.1 细胞活力及形态的测定与鉴定 | 第23页 |
| 2.3.2 细胞的生长曲线 | 第23-24页 |
| 2.3.3 无菌检查 | 第24页 |
| 2.3.4 支原体检查 | 第24页 |
| 2.3.5 外源病毒污染检查 | 第24页 |
| 2.3.6 染色体检查 | 第24页 |
| 2.4 结果与分析 | 第24-29页 |
| 2.4.1 Marc-145细胞系形态学观察结果 | 第24-25页 |
| 2.4.2 细胞活力检测结果 | 第25页 |
| 2.4.3 细胞生长曲线结果 | 第25页 |
| 2.4.4 无菌检查结果 | 第25-26页 |
| 2.4.5 支原体检查结果 | 第26-27页 |
| 2.4.6 外源病毒污染检查 | 第27页 |
| 2.4.7 外源病毒污染检查 | 第27-29页 |
| 2.4.8 染色体检查结果 | 第29页 |
| 2.5 本章小结 | 第29-31页 |
| 第三章 Marc-145悬浮细胞系的建立 | 第31-40页 |
| 3.1 材料及仪器设备 | 第31页 |
| 3.1.1 主要材料 | 第31页 |
| 3.1.2 主要试剂 | 第31页 |
| 3.1.3 主要仪器设备 | 第31页 |
| 3.1.4 主要溶液及培养基配制 | 第31页 |
| 3.2 试验方法 | 第31-32页 |
| 3.2.1 Marc-145低血清贴壁细胞系的驯化 | 第32页 |
| 3.2.2 骤减血清驯化法 | 第32页 |
| 3.2.3 适应低血清驯化法 | 第32页 |
| 3.2.4 Marc-145低血清细胞的生长曲线 | 第32页 |
| 3.3 Marc-145低血清细胞系悬浮驯化 | 第32-34页 |
| 3.3.1 Marc-145细胞的悬浮驯化培养基 | 第32-33页 |
| 3.3.2 摇瓶-摇床体系驯化法 | 第33页 |
| 3.3.3 硅化摇瓶-摇床体系驯化法 | 第33-34页 |
| 3.3.4 Marc-145悬浮细胞系的形态观察 | 第34页 |
| 3.4 结果与分析 | 第34-39页 |
| 3.4.1 Marc-145低血清贴壁细胞系建立 | 第34-36页 |
| 3.4.1.1 Marc-145降血清驯化结果 | 第34-35页 |
| 3.4.1.2 Marc-145低血清细胞系生长曲线绘制 | 第35-36页 |
| 3.4.2 Marc-145细胞悬浮驯化结果 | 第36-39页 |
| 3.4.2.1 摇瓶-摇床体系驯化结果 | 第36-37页 |
| 3.4.2.2 硅化摇瓶-摇床体系驯化结果 | 第37-39页 |
| 3.5 本章小结 | 第39-40页 |
| 第四章 Marc-145悬浮细胞库的建立与鉴定 | 第40-57页 |
| 4.1 材料及仪器设备 | 第40-42页 |
| 4.1.1 主要材料 | 第40页 |
| 4.1.2 主要试剂 | 第40-41页 |
| 4.1.3 实验动物 | 第41页 |
| 4.1.4 主要仪器设备 | 第41页 |
| 4.1.5 主要溶液及培养基配制 | 第41-42页 |
| 4.2 试验方法 | 第42-45页 |
| 4.2.1 Marc-145-XF细胞库的建立 | 第42页 |
| 4.2.2 Marc-145-XF细胞系的鉴定 | 第42页 |
| 4.2.2.1 复苏细胞活力测定 | 第42页 |
| 4.2.2.2 无菌检查 | 第42页 |
| 4.2.2.3 支原体检查 | 第42页 |
| 4.2.2.4 外源病毒污染检查 | 第42页 |
| 4.2.2.5 染色体分析 | 第42页 |
| 4.2.3 细胞毒价测定试验 | 第42-43页 |
| 4.2.4 细胞传代培养试验 | 第43页 |
| 4.2.5 细胞最佳培养方式 | 第43-44页 |
| 4.2.5.1 培养基的筛选 | 第43页 |
| 4.2.5.2 血清浓度的筛选 | 第43-44页 |
| 4.2.5.3 传代时间的筛选 | 第44页 |
| 4.2.5.4 细胞最佳接种密度试验 | 第44页 |
| 4.2.6 细胞生长曲线及代谢试验 | 第44-45页 |
| 4.3 结果与分析 | 第45-56页 |
| 4.3.1 Marc-145-XF细胞库的建立 | 第45页 |
| 4.3.2 细胞活力测定结果 | 第45页 |
| 4.3.3 细胞形态学观察 | 第45页 |
| 4.3.4 无菌检查结果 | 第45-46页 |
| 4.3.5 支原体检查结果 | 第46页 |
| 4.3.6 外源病毒污染检查结果 | 第46-48页 |
| 4.3.6.1 细胞培养检查结果 | 第46-47页 |
| 4.3.6.2 直接荧光抗体检查结果 | 第47-48页 |
| 4.3.7 染色体分析结果 | 第48-49页 |
| 4.3.8 细胞毒价测定试验 | 第49-51页 |
| 4.3.8.1 细胞病变效应(120h)测定结果 | 第49-50页 |
| 4.3.8.2 TCID_(50)测定结果 | 第50-51页 |
| 4.3.9 细胞传代稳定性试验 | 第51页 |
| 4.3.10 细胞最佳培养方式 | 第51-55页 |
| 4.3.10.1 培养基筛选结果 | 第51-53页 |
| 4.3.10.2 血清浓度的筛选结果 | 第53-54页 |
| 4.3.10.3 传代时间的筛选结果 | 第54-55页 |
| 4.3.10.4 细胞最佳接种密度筛选结果 | 第55页 |
| 4.3.11 Marc-145-XF细胞生长曲线测定结果 | 第55-56页 |
| 4.4 本章小结 | 第56-57页 |
| 第五章 Marc-145悬浮细胞的生物反应器培养 | 第57-60页 |
| 5.1 材料及仪器设备 | 第57页 |
| 5.1.1 主要材料 | 第57页 |
| 5.1.2 主要仪器设备 | 第57页 |
| 5.1.3 主要溶液配制 | 第57页 |
| 5.2 试验方法 | 第57-58页 |
| 5.2.1 5L生物反应器准备 | 第57-58页 |
| 5.2.2 批培养 | 第58页 |
| 5.3 结果 | 第58-59页 |
| 5.3.1 批培养Marc-145-XF细胞的过程控制 | 第58页 |
| 5.3.2 批培养Marc-145-XF细胞的结果 | 第58-59页 |
| 5.4 本章结论 | 第59-60页 |
| 第六章 全文结论 | 第60-61页 |
| 6.1 Marc-145贴壁细胞系的引进建库与鉴定结论 | 第60页 |
| 6.2 Marc-145悬浮细胞系的驯化与鉴定结论 | 第60页 |
| 6.3 5L生物反应器培养结论 | 第60-61页 |
| 参考文献 | 第61-66页 |
| 附录 | 第66-67页 |
| 致谢 | 第67页 |
