| 摘要 | 第7-8页 |
| Abstract | 第8-9页 |
| 第一章 文献综述 | 第12-20页 |
| 1.1 大丽轮枝菌的危害 | 第12-15页 |
| 1.1.1 对棉花的危害 | 第12页 |
| 1.1.2 对马铃薯的危害 | 第12-13页 |
| 1.1.3 对茄子的危害 | 第13页 |
| 1.1.4 对向日葵的危害 | 第13页 |
| 1.1.5 对生菜的危害 | 第13-14页 |
| 1.1.6 对草莓的危害 | 第14页 |
| 1.1.7 对橄榄的危害 | 第14-15页 |
| 1.2 微菌核的研究概况 | 第15-18页 |
| 1.2.1 微菌核的结构 | 第15页 |
| 1.2.2 影响微菌核萌发的外界条件 | 第15页 |
| 1.2.3 微菌核与寄主发病的关系 | 第15-16页 |
| 1.2.4 微菌核的分子生物学研究 | 第16-18页 |
| 1.3 CPMO的研究进展 | 第18-19页 |
| 1.4 选题目的与意义 | 第19-20页 |
| 第二章 材料与方法 | 第20-33页 |
| 2.1 实验材料 | 第20页 |
| 2.1.1 菌株和质粒 | 第20页 |
| 2.1.2 培养基、抗生素和实验器材 | 第20页 |
| 2.2 实验方法 | 第20-33页 |
| 2.2.1 VDAG_03943 的生物信息学分析 | 第20-21页 |
| 2.2.2 敲除质粒的构建 | 第21-24页 |
| 2.2.3 敲除突变体菌株的获得 | 第24-27页 |
| 2.2.4 互补质粒pFL2-CPMO的构建 | 第27-30页 |
| 2.2.5 互补突变体菌株的获得 | 第30-31页 |
| 2.2.6 VdCPMO的基因功能分析 | 第31-33页 |
| 第三章 结果与分析 | 第33-47页 |
| 3.1 VDAG_03943 的生物信息学分析 | 第33页 |
| 3.2 敲除质粒的构建 | 第33-35页 |
| 3.2.1 VdCPMO上游和下游片段的获得 | 第33页 |
| 3.2.2 阳性克隆的获得 | 第33-34页 |
| 3.2.3 重组质粒的提取及验证 | 第34-35页 |
| 3.3 敲除突变体菌株的获得 | 第35-38页 |
| 3.3.1 敲除质粒pOSCAR-CPMO的验证 | 第35-36页 |
| 3.3.2 VdCPMO敲除突变体菌株的获得 | 第36-38页 |
| 3.4 互补质粒pFL2-CPMO的构建 | 第38-40页 |
| 3.4.1 互补目的基因的扩增 | 第38页 |
| 3.4.2 互补质粒的PCR验证 | 第38页 |
| 3.4.3 互补质粒pFL2-CPMO的大肠杆菌转化及筛选 | 第38-39页 |
| 3.4.4 互补质粒pFL2-CPMO的提取和验证 | 第39-40页 |
| 3.5 互补突变体菌株的获得 | 第40页 |
| 3.5.1 PEG介导的原生质体转化 | 第40页 |
| 3.5.2 互补转化子菌株的PCR检测 | 第40页 |
| 3.6 VdCPMO的基因功能分析 | 第40-47页 |
| 3.6.1 菌落直径的测定 | 第40-41页 |
| 3.6.2 压力筛选的测定 | 第41-42页 |
| 3.6.3 微菌核萌发率的测定 | 第42-43页 |
| 3.6.4 芽管长度的测定 | 第43-44页 |
| 3.6.5 致病力的测定 | 第44-47页 |
| 第四章 结论与讨论 | 第47-50页 |
| 4.1 VdCPMO的生物信息学分析和敲除质粒的构建 | 第47页 |
| 4.2 敲除突变体菌株与互补突变体菌株的获得 | 第47-48页 |
| 4.3 VdCPMO功能分析 | 第48-50页 |
| 参考文献 | 第50-56页 |
| 附录 | 第56-58页 |
| 致谢 | 第58-59页 |
| 个人简介 | 第59页 |
