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脂多糖对反刍动物肝脏天然免疫反应的影响及表观遗传机理研究

摘要第9-12页
ABSTRACT第12-15页
引言第17-18页
第一篇 文献综述第18-70页
    第一章 LPS对肝脏天然免疫机能的影响第18-40页
        1 LPS的结构与生物学特性第18-23页
            1.1 LPS的结构第18-19页
            1.2 LPS的生物学特性第19-20页
            1.3 LPS的灭活与清除第20-23页
        2 LPS相关的天然免疫信号通路第23-25页
            2.1 LPS的识别受体第23-24页
            2.2 髓样分化因子88 (myeloid differentiation 88,MyD88)依赖和非依赖性信号途径第24-25页
        3 天然免疫反应在肝脏炎症中的作用第25-28页
            3.1 肝脏中天然免疫细胞第26-27页
            3.2 肝脏炎症时TLRs的信号通路第27-28页
        4 与炎症反应相关的表观遗传学机制第28-34页
            4.1 组蛋白甲基化与炎症第29-32页
            4.2 组蛋白乙酰化与炎症第32页
            4.3 DNA甲基化与炎症第32页
            4.4 MicroRNA与炎症第32-34页
        参考文献第34-40页
    第二章 SARA产生机制及其对天然免疫的影响第40-56页
        1 SARA产生的机制第40-42页
            1.1 有机酸引起SARA的产生机制第40-41页
            1.2 SARA状态下内毒素中毒机制第41-42页
        2 SARA的继发症及其诊断和预防第42-46页
            2.1 SARA的继发症第42-44页
            2.2 SARA的诊断第44-45页
            2.3 SARA的预防第45-46页
        3 SARA状态下LPS引起的天然免疫反应第46-50页
            3.1 SARA状态下LPS产生和转移第47-48页
            3.2 SARA状态下LPS对免疫反应的影响第48-50页
        参考文献第50-56页
    第三章 E.coli性乳腺炎及其对肝脏免疫功能的影响第56-70页
        1 E.coli乳腺发病原因及其机理第56-58页
        2 E.coli性乳腺炎的诊断及其流行病学第58-59页
        3 E.coli性乳腺炎对肝脏天然免疫的影响第59-62页
        参考文献第62-70页
第二篇 试验研究第70-168页
    第四章 消化道来源的LPS在山羊肝脏中的清除效率及其对肝脏免疫功能的影响第70-98页
        1 材料与方法第71-83页
            1.1 主要仪器与试剂第71-72页
            1.2 实验动物与实验设计第72-73页
            1.3 样品采集第73-74页
            1.4 血浆样品检测第74页
            1.5 RNA提取与定量第74-81页
            1.6 蛋白提取与定量第81-82页
            1.7 相关计算公式及数据统计第82-83页
        2 结果与分析第83-90页
            2.1 瘤胃pH值变化规律第83页
            2.2 肝静脉、门静脉和动脉血流量变化第83-84页
            2.3 肝静脉、门静脉和动脉中LPS的浓度以及LPS在肝脏中的清除第84-86页
            2.4 外周血液中促炎症细胞因子和急性期蛋白浓度变化第86-88页
            2.5 血液中肝功能生化参数的变化第88-89页
            2.6 免疫相关基因在肝脏中的表达第89页
            2.7 TLR4蛋白在肝脏中的表达第89-90页
        3 讨论第90-92页
        4 小结第92-94页
        参考文献第94-98页
    第五章 消化道来源的LPS对奶山羊肝脏中TLR4信号通路及其下游免疫基因表达的影响第98-118页
        1 材料与方法第99-105页
            1.1 主要仪器与试剂第99-100页
            1.2 实验动物与实验设计第100页
            1.3 样品采集第100-101页
            1.4 样品检测第101-102页
            1.5 RNA的提取、反转与定量第102页
            1.6 总蛋白的提取与定量第102页
            1.7 染色质提取和CHART-PCR第102-103页
            1.8 基因组DNA的提取以及甲基化状态的检测第103-105页
            1.9 数据统计第105页
        2 结果与分析第105-110页
            2.1 高精料日粮对瘤胃pH的影响第105-106页
            2.2 饲喂高精料日粮对乳产量和乳成分的影响第106-107页
            2.3 饲喂高精料日粮对瘤胃和门静脉中LPS浓度的影响第107页
            2.4 饲喂高精料日粮对肝脏中天然免疫基因表达的影响第107-108页
            2.5 饲喂高精料日粮对肝脏中TLR4和NF-κB p65蛋白表达的影响第108-109页
            2.6 饲喂高精料日粮对肝脏中TLR4启动子区域染色质结构和DNA甲基化的影响第109-110页
        3 讨论第110-112页
        4 小结第112-114页
        参考文献第114-118页
    第六章 消化道来源的LPS对奶牛肝脏中免疫基因表达的影响及其表观机理的研究第118-142页
        1 材料与方法第119-125页
            1.1 主要仪器设备与试剂第119-120页
            1.2 试验动物与试验设计第120-121页
            1.3 样品采集第121页
            1.4 样品检测第121页
            1.5 RNA提取、反转与RT-qPCR定量第121-122页
            1.6 蛋白提取与定量第122页
            1.7 染色质提取与CHART-PCR第122-123页
            1.8 基因组DNA提取与甲基化状态检测第123页
            1.9 肝脏慢性血管插管术第123-125页
            1.10 数据统计分析第125页
        2 结果与分析第125-133页
            2.1 长期饲喂高精料日粮对奶牛瘤胃pH值及乳产量的影响第125-126页
            2.2 长期饲喂高精料日粮对奶牛瘤胃和肝静脉、门静脉中LPS浓度的影响第126-127页
            2.3 长期饲喂高精料日粮对肝脏中免疫相关基因表达的影响第127-128页
            2.4 候选基因启动子区域相关转录因子结合位点分布图第128-129页
            2.5 长期饲喂高精料日粮对免疫基因启动子区域染色质结构的影响第129-131页
            2.6 长期饲喂高精料日粮对奶牛免疫基因启动子区域DNA甲基化的影响第131-132页
            2.7 长期饲喂高精料日粮对奶牛肝脏中TLR4蛋白表达的影响第132-133页
        3 讨论第133-136页
        4 小结第136-138页
        参考文献第138-142页
    第七章 乳腺接种E.coli对奶牛肝脏免疫基因表达的影响及表观机理研究第142-168页
        1 材料与方法第144-153页
            1.1 主要仪器设备与试剂第144页
            1.2 试验动物与试验设计第144页
            1.3 E.coli_(1303)菌株分离与动物接种第144页
            1.4 样品采集第144页
            1.5 RNA提取与定量第144-145页
            1.6 5'-RACE技术第145-149页
            1.7 GC-RICH PCR扩增方法第149-152页
            1.8 Chromatin Accessibility PCR (CHART-PCR)第152-153页
            1.9 DNA甲基化分析第153页
            1.10 数据统计与分析第153页
        2 结果与分析第153-158页
            2.1 乳腺接种E.coli对奶牛肝脏免疫基因表达影响第153-154页
            2.2 TLR4和TLR2的5'Race的结果及所有候选基因启动子区域结构图第154-156页
            2.3 乳腺接种E.coli对奶牛肝脏中免疫基因启动子区域染色质结构的影响第156-157页
            2.4 乳腺接种E.coli对肝脏中TLR4基因启动子区域甲基化程度的影响第157-158页
        3 讨论第158-160页
        4 小结第160-162页
        参考文献第162-168页
全文总结第168-170页
本论文创新点第170-172页
攻读学位期间发表的学术论文第172-174页
致谢第174页

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