摘要 | 第9-12页 |
ABSTRACT | 第12-15页 |
引言 | 第17-18页 |
第一篇 文献综述 | 第18-70页 |
第一章 LPS对肝脏天然免疫机能的影响 | 第18-40页 |
1 LPS的结构与生物学特性 | 第18-23页 |
1.1 LPS的结构 | 第18-19页 |
1.2 LPS的生物学特性 | 第19-20页 |
1.3 LPS的灭活与清除 | 第20-23页 |
2 LPS相关的天然免疫信号通路 | 第23-25页 |
2.1 LPS的识别受体 | 第23-24页 |
2.2 髓样分化因子88 (myeloid differentiation 88,MyD88)依赖和非依赖性信号途径 | 第24-25页 |
3 天然免疫反应在肝脏炎症中的作用 | 第25-28页 |
3.1 肝脏中天然免疫细胞 | 第26-27页 |
3.2 肝脏炎症时TLRs的信号通路 | 第27-28页 |
4 与炎症反应相关的表观遗传学机制 | 第28-34页 |
4.1 组蛋白甲基化与炎症 | 第29-32页 |
4.2 组蛋白乙酰化与炎症 | 第32页 |
4.3 DNA甲基化与炎症 | 第32页 |
4.4 MicroRNA与炎症 | 第32-34页 |
参考文献 | 第34-40页 |
第二章 SARA产生机制及其对天然免疫的影响 | 第40-56页 |
1 SARA产生的机制 | 第40-42页 |
1.1 有机酸引起SARA的产生机制 | 第40-41页 |
1.2 SARA状态下内毒素中毒机制 | 第41-42页 |
2 SARA的继发症及其诊断和预防 | 第42-46页 |
2.1 SARA的继发症 | 第42-44页 |
2.2 SARA的诊断 | 第44-45页 |
2.3 SARA的预防 | 第45-46页 |
3 SARA状态下LPS引起的天然免疫反应 | 第46-50页 |
3.1 SARA状态下LPS产生和转移 | 第47-48页 |
3.2 SARA状态下LPS对免疫反应的影响 | 第48-50页 |
参考文献 | 第50-56页 |
第三章 E.coli性乳腺炎及其对肝脏免疫功能的影响 | 第56-70页 |
1 E.coli乳腺发病原因及其机理 | 第56-58页 |
2 E.coli性乳腺炎的诊断及其流行病学 | 第58-59页 |
3 E.coli性乳腺炎对肝脏天然免疫的影响 | 第59-62页 |
参考文献 | 第62-70页 |
第二篇 试验研究 | 第70-168页 |
第四章 消化道来源的LPS在山羊肝脏中的清除效率及其对肝脏免疫功能的影响 | 第70-98页 |
1 材料与方法 | 第71-83页 |
1.1 主要仪器与试剂 | 第71-72页 |
1.2 实验动物与实验设计 | 第72-73页 |
1.3 样品采集 | 第73-74页 |
1.4 血浆样品检测 | 第74页 |
1.5 RNA提取与定量 | 第74-81页 |
1.6 蛋白提取与定量 | 第81-82页 |
1.7 相关计算公式及数据统计 | 第82-83页 |
2 结果与分析 | 第83-90页 |
2.1 瘤胃pH值变化规律 | 第83页 |
2.2 肝静脉、门静脉和动脉血流量变化 | 第83-84页 |
2.3 肝静脉、门静脉和动脉中LPS的浓度以及LPS在肝脏中的清除 | 第84-86页 |
2.4 外周血液中促炎症细胞因子和急性期蛋白浓度变化 | 第86-88页 |
2.5 血液中肝功能生化参数的变化 | 第88-89页 |
2.6 免疫相关基因在肝脏中的表达 | 第89页 |
2.7 TLR4蛋白在肝脏中的表达 | 第89-90页 |
3 讨论 | 第90-92页 |
4 小结 | 第92-94页 |
参考文献 | 第94-98页 |
第五章 消化道来源的LPS对奶山羊肝脏中TLR4信号通路及其下游免疫基因表达的影响 | 第98-118页 |
1 材料与方法 | 第99-105页 |
1.1 主要仪器与试剂 | 第99-100页 |
1.2 实验动物与实验设计 | 第100页 |
1.3 样品采集 | 第100-101页 |
1.4 样品检测 | 第101-102页 |
1.5 RNA的提取、反转与定量 | 第102页 |
1.6 总蛋白的提取与定量 | 第102页 |
1.7 染色质提取和CHART-PCR | 第102-103页 |
1.8 基因组DNA的提取以及甲基化状态的检测 | 第103-105页 |
1.9 数据统计 | 第105页 |
2 结果与分析 | 第105-110页 |
2.1 高精料日粮对瘤胃pH的影响 | 第105-106页 |
2.2 饲喂高精料日粮对乳产量和乳成分的影响 | 第106-107页 |
2.3 饲喂高精料日粮对瘤胃和门静脉中LPS浓度的影响 | 第107页 |
2.4 饲喂高精料日粮对肝脏中天然免疫基因表达的影响 | 第107-108页 |
2.5 饲喂高精料日粮对肝脏中TLR4和NF-κB p65蛋白表达的影响 | 第108-109页 |
2.6 饲喂高精料日粮对肝脏中TLR4启动子区域染色质结构和DNA甲基化的影响 | 第109-110页 |
3 讨论 | 第110-112页 |
4 小结 | 第112-114页 |
参考文献 | 第114-118页 |
第六章 消化道来源的LPS对奶牛肝脏中免疫基因表达的影响及其表观机理的研究 | 第118-142页 |
1 材料与方法 | 第119-125页 |
1.1 主要仪器设备与试剂 | 第119-120页 |
1.2 试验动物与试验设计 | 第120-121页 |
1.3 样品采集 | 第121页 |
1.4 样品检测 | 第121页 |
1.5 RNA提取、反转与RT-qPCR定量 | 第121-122页 |
1.6 蛋白提取与定量 | 第122页 |
1.7 染色质提取与CHART-PCR | 第122-123页 |
1.8 基因组DNA提取与甲基化状态检测 | 第123页 |
1.9 肝脏慢性血管插管术 | 第123-125页 |
1.10 数据统计分析 | 第125页 |
2 结果与分析 | 第125-133页 |
2.1 长期饲喂高精料日粮对奶牛瘤胃pH值及乳产量的影响 | 第125-126页 |
2.2 长期饲喂高精料日粮对奶牛瘤胃和肝静脉、门静脉中LPS浓度的影响 | 第126-127页 |
2.3 长期饲喂高精料日粮对肝脏中免疫相关基因表达的影响 | 第127-128页 |
2.4 候选基因启动子区域相关转录因子结合位点分布图 | 第128-129页 |
2.5 长期饲喂高精料日粮对免疫基因启动子区域染色质结构的影响 | 第129-131页 |
2.6 长期饲喂高精料日粮对奶牛免疫基因启动子区域DNA甲基化的影响 | 第131-132页 |
2.7 长期饲喂高精料日粮对奶牛肝脏中TLR4蛋白表达的影响 | 第132-133页 |
3 讨论 | 第133-136页 |
4 小结 | 第136-138页 |
参考文献 | 第138-142页 |
第七章 乳腺接种E.coli对奶牛肝脏免疫基因表达的影响及表观机理研究 | 第142-168页 |
1 材料与方法 | 第144-153页 |
1.1 主要仪器设备与试剂 | 第144页 |
1.2 试验动物与试验设计 | 第144页 |
1.3 E.coli_(1303)菌株分离与动物接种 | 第144页 |
1.4 样品采集 | 第144页 |
1.5 RNA提取与定量 | 第144-145页 |
1.6 5'-RACE技术 | 第145-149页 |
1.7 GC-RICH PCR扩增方法 | 第149-152页 |
1.8 Chromatin Accessibility PCR (CHART-PCR) | 第152-153页 |
1.9 DNA甲基化分析 | 第153页 |
1.10 数据统计与分析 | 第153页 |
2 结果与分析 | 第153-158页 |
2.1 乳腺接种E.coli对奶牛肝脏免疫基因表达影响 | 第153-154页 |
2.2 TLR4和TLR2的5'Race的结果及所有候选基因启动子区域结构图 | 第154-156页 |
2.3 乳腺接种E.coli对奶牛肝脏中免疫基因启动子区域染色质结构的影响 | 第156-157页 |
2.4 乳腺接种E.coli对肝脏中TLR4基因启动子区域甲基化程度的影响 | 第157-158页 |
3 讨论 | 第158-160页 |
4 小结 | 第160-162页 |
参考文献 | 第162-168页 |
全文总结 | 第168-170页 |
本论文创新点 | 第170-172页 |
攻读学位期间发表的学术论文 | 第172-174页 |
致谢 | 第174页 |