猪流行性腹泻病毒的分离、鉴定及全基因序列分析
| 摘要 | 第4-6页 |
| ABSTRACT | 第6-7页 |
| 缩略词 | 第8-11页 |
| 第一章 文献综述 | 第11-18页 |
| 1 PEDV病原学特性 | 第11页 |
| 2 PEDV基因组结构特征 | 第11-13页 |
| 2.1 5'-UTR与3'-UTR | 第11-12页 |
| 2.2 结构基因 | 第12页 |
| 2.3 非结构基因 | 第12-13页 |
| 2.4 基因分型和流行特点 | 第13页 |
| 3 PEDV细胞培养特性 | 第13-15页 |
| 4 PEDV致病性 | 第15-17页 |
| 4.1 流行病学 | 第15-16页 |
| 4.2 临床症状 | 第16页 |
| 4.3 解剖症状 | 第16页 |
| 4.4 发病机理 | 第16-17页 |
| 5 PEDV检测方法 | 第17页 |
| 6 研究目的和意义 | 第17-18页 |
| 第二章 PEDV EM-P株的分离与鉴定 | 第18-37页 |
| 1 实验材料 | 第18-20页 |
| 1.1 病料收集 | 第18页 |
| 1.2 主要试剂及配制 | 第18-19页 |
| 1.3 仪器设备 | 第19页 |
| 1.4 引物合成 | 第19页 |
| 1.5 细胞及实验动物 | 第19-20页 |
| 2 实验方法 | 第20-23页 |
| 2.1 病料处理及RT-PCR检测 | 第20页 |
| 2.2 PEDV的分离与培养 | 第20-21页 |
| 2.3 RT-PCR检测及S基因测序 | 第21页 |
| 2.4 病毒TCID_(50)的测定 | 第21页 |
| 2.5 分离株人工感染哺乳仔猪试验 | 第21-23页 |
| 3 结果 | 第23-32页 |
| 3.1 RT-PCR检测结果 | 第23-24页 |
| 3.2 PEDV的分离与培养 | 第24-25页 |
| 3.3 RT-PCR检测及S基因测序 | 第25-26页 |
| 3.4 病毒TCID_(50)测定 | 第26页 |
| 3.5 分离株人工感染哺乳仔猪试验 | 第26-32页 |
| 4 讨论 | 第32-36页 |
| 4.1 分离株的Vero细胞培养特性 | 第33页 |
| 4.2 分离株的病理学特性 | 第33-36页 |
| 5 小结 | 第36-37页 |
| 第三章 PEDV EM-P株全基因测序 | 第37-57页 |
| 1 试验材料 | 第37-39页 |
| 1.1 毒株、细胞及主要试剂 | 第37页 |
| 1.2 主要仪器设备 | 第37页 |
| 1.3 分子生物学分析软件 | 第37页 |
| 1.4 引物设计与合成 | 第37-39页 |
| 2 试验方法 | 第39-43页 |
| 2.1 PEDV的增殖 | 第39页 |
| 2.2 RNA提取 | 第39页 |
| 2.3 cDNA合成 | 第39-40页 |
| 2.4 扩增与克隆 | 第40-41页 |
| 2.5 目的片段纯化 | 第41页 |
| 2.6 重组质粒构建 | 第41-42页 |
| 2.7 全基因组序列分析 | 第42-43页 |
| 3 结果 | 第43-52页 |
| 3.1 全基因分段扩增及克隆 | 第43-44页 |
| 3.2 全基因组序列拼接 | 第44-45页 |
| 3.3 全基因组分析 | 第45-46页 |
| 3.4 各序列片段遗传与变异情况 | 第46-51页 |
| 3.5 针对S基因的进化树构建 | 第51-52页 |
| 4 讨论 | 第52-55页 |
| 4.1 全基因序列分析 | 第52页 |
| 4.2 各序列片段遗传与变异情况 | 第52-55页 |
| 4.3 系统发育关系分析 | 第55页 |
| 5 小结 | 第55-57页 |
| 全文总结 | 第57-58页 |
| 参考文献 | 第58-64页 |
| 致谢 | 第64-65页 |
| 攻读硕士学位期间发表的学术论文 | 第65页 |
