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噬菌体与对虾急性肝胰腺坏死病(AHPND)相关性研究

摘要第1-9页
Abstract第9-16页
引言第16-17页
第一章 文献综述第17-29页
 1.副溶血弧菌第17页
 2 对虾常见疾病第17-20页
   ·白斑综合征第17-18页
   ·黄头病第18页
   ·桃拉病第18-19页
   ·肌肉白浊病第19页
   ·急性肝胰腺坏死病第19-20页
 3. 噬菌体第20-22页
 4. 卤虫第22-24页
   ·卤虫的应用第22-23页
   ·卤虫的养殖概况第23-24页
 5.实时荧光定量PCR第24-25页
   ·实时荧光定量PCR优势第24-25页
   ·荧光定量PCR方法第25页
     ·相对荧光定量PCR第25页
     ·绝对荧光定量PCR第25页
 6 蛋白诱导第25-26页
 7.基因转化方法第26-28页
   ·转化第26页
   ·共转化第26-27页
   ·脂质体导入法第27页
   ·粒子轰击细胞法第27页
   ·直接显微注射第27页
   ·电转化法第27-28页
 8. 感受态细胞第28-29页
第二章溶源副溶血弧菌的筛选第29-38页
 1 材料与方法第29-33页
   ·实验材料第29-31页
     ·培养基第29-30页
     ·仪器和试剂第30页
     ·实验菌株第30-31页
   ·实验方法第31-33页
     ·实验菌株的培养和细菌基因组DNA的提取第31-32页
     ·AHPND相关副溶血弧菌质粒的PCR检测第32-33页
     ·丝裂霉素C有效浓度的确定第33页
     ·噬菌体溶源性感染菌株的筛选第33页
 2. 结果第33-37页
   ·五株副溶血弧菌的AHPND相关质粒的PCR检测第33-34页
   ·溶源性噬菌体释放的丝裂霉素C最佳浓度的确定第34-35页
   ·溶源性副溶血弧菌的筛选第35-37页
 3.讨论第37-38页
第三章 溶源噬菌体的分离与电镜观察第38-50页
 1 材料与方法第38-41页
   ·实验材料第38页
   ·实验方法第38-41页
     ·副溶血弧菌溶源噬菌体的分离第38-39页
     ·噬菌体电镜观察第39页
     ·两株副溶血弧菌抗生素敏感性测试第39-40页
     ·两株副溶血弧菌的碳源利用情况第40页
     ·人工感染实验第40-41页
 2.实验结果第41-48页
   ·溶源噬菌体的电镜观察第41-42页
   ·两株溶源性副溶血弧菌的抗生素敏感性第42-43页
   ·碳源利用情况数据分析第43-47页
   ·人工感染实验结果第47-48页
 3.讨论第48-50页
第四章 副溶血弧菌对卤虫无节幼体的感染实验第50-55页
 1.材料和方法第50-51页
   ·实验材料第50页
   ·实验方法第50-51页
     ·菌液的制备第50页
     ·卤虫卵的孵化第50-51页
     ·卤虫无节幼体的感染实验第51页
     ·数据分析与处理第51页
 2 实验结果第51-53页
   ·卤虫无节幼体感染实验结果第51-52页
   ·副溶血弧菌对卤虫无节幼体的致病力第52-53页
 3.讨论第53-55页
第五章 副溶血弧菌溶源噬菌体宿主范围检测第55-60页
 1.材料与方法第55-58页
   ·实验材料第55-56页
     ·实验试剂与器材第55页
     ·实验菌株第55-56页
   ·实验方法第56-58页
     ·菌株的活化第56-57页
     ·溶源噬菌体的提取第57页
     ·噬菌体vp1 宿主范围的测定第57页
     ·噬菌体vp2 宿主范围的测定第57-58页
 2.实验结果第58-59页
   ·噬菌体vp1 宿主范围第58页
   ·噬菌体vp2 宿主范围第58-59页
 3.讨论第59-60页
第六章VPP19 质粒的转化第60-71页
 1.材料和方法第60-67页
   ·实验材料第60-61页
   ·实验方法第61-67页
     ·pBAD-VPP19 质粒的提取第61-62页
     ·提取质粒质量的验证第62-63页
     ·SM10 和TSA-VII-2 两株菌感受态细胞的制备第63-64页
     ·电击转化第64页
     ·筛选阳性克隆第64-66页
     ·阳性单克隆的诱导第66页
     ·阳性克隆表达产物的SDS-PAGE第66-67页
 2.实验结果第67-70页
   ·质粒质量检测结果第67页
   ·质粒pBAD-VPP19 的电转化第67-69页
   ·阳性转化菌株的蛋白诱导表达第69-70页
 3.讨论第70-71页
参考文献第71-79页
致谢第79页

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