摘要 | 第1-9页 |
Abstract | 第9-16页 |
引言 | 第16-17页 |
第一章 文献综述 | 第17-29页 |
1.副溶血弧菌 | 第17页 |
2 对虾常见疾病 | 第17-20页 |
·白斑综合征 | 第17-18页 |
·黄头病 | 第18页 |
·桃拉病 | 第18-19页 |
·肌肉白浊病 | 第19页 |
·急性肝胰腺坏死病 | 第19-20页 |
3. 噬菌体 | 第20-22页 |
4. 卤虫 | 第22-24页 |
·卤虫的应用 | 第22-23页 |
·卤虫的养殖概况 | 第23-24页 |
5.实时荧光定量PCR | 第24-25页 |
·实时荧光定量PCR优势 | 第24-25页 |
·荧光定量PCR方法 | 第25页 |
·相对荧光定量PCR | 第25页 |
·绝对荧光定量PCR | 第25页 |
6 蛋白诱导 | 第25-26页 |
7.基因转化方法 | 第26-28页 |
·转化 | 第26页 |
·共转化 | 第26-27页 |
·脂质体导入法 | 第27页 |
·粒子轰击细胞法 | 第27页 |
·直接显微注射 | 第27页 |
·电转化法 | 第27-28页 |
8. 感受态细胞 | 第28-29页 |
第二章溶源副溶血弧菌的筛选 | 第29-38页 |
1 材料与方法 | 第29-33页 |
·实验材料 | 第29-31页 |
·培养基 | 第29-30页 |
·仪器和试剂 | 第30页 |
·实验菌株 | 第30-31页 |
·实验方法 | 第31-33页 |
·实验菌株的培养和细菌基因组DNA的提取 | 第31-32页 |
·AHPND相关副溶血弧菌质粒的PCR检测 | 第32-33页 |
·丝裂霉素C有效浓度的确定 | 第33页 |
·噬菌体溶源性感染菌株的筛选 | 第33页 |
2. 结果 | 第33-37页 |
·五株副溶血弧菌的AHPND相关质粒的PCR检测 | 第33-34页 |
·溶源性噬菌体释放的丝裂霉素C最佳浓度的确定 | 第34-35页 |
·溶源性副溶血弧菌的筛选 | 第35-37页 |
3.讨论 | 第37-38页 |
第三章 溶源噬菌体的分离与电镜观察 | 第38-50页 |
1 材料与方法 | 第38-41页 |
·实验材料 | 第38页 |
·实验方法 | 第38-41页 |
·副溶血弧菌溶源噬菌体的分离 | 第38-39页 |
·噬菌体电镜观察 | 第39页 |
·两株副溶血弧菌抗生素敏感性测试 | 第39-40页 |
·两株副溶血弧菌的碳源利用情况 | 第40页 |
·人工感染实验 | 第40-41页 |
2.实验结果 | 第41-48页 |
·溶源噬菌体的电镜观察 | 第41-42页 |
·两株溶源性副溶血弧菌的抗生素敏感性 | 第42-43页 |
·碳源利用情况数据分析 | 第43-47页 |
·人工感染实验结果 | 第47-48页 |
3.讨论 | 第48-50页 |
第四章 副溶血弧菌对卤虫无节幼体的感染实验 | 第50-55页 |
1.材料和方法 | 第50-51页 |
·实验材料 | 第50页 |
·实验方法 | 第50-51页 |
·菌液的制备 | 第50页 |
·卤虫卵的孵化 | 第50-51页 |
·卤虫无节幼体的感染实验 | 第51页 |
·数据分析与处理 | 第51页 |
2 实验结果 | 第51-53页 |
·卤虫无节幼体感染实验结果 | 第51-52页 |
·副溶血弧菌对卤虫无节幼体的致病力 | 第52-53页 |
3.讨论 | 第53-55页 |
第五章 副溶血弧菌溶源噬菌体宿主范围检测 | 第55-60页 |
1.材料与方法 | 第55-58页 |
·实验材料 | 第55-56页 |
·实验试剂与器材 | 第55页 |
·实验菌株 | 第55-56页 |
·实验方法 | 第56-58页 |
·菌株的活化 | 第56-57页 |
·溶源噬菌体的提取 | 第57页 |
·噬菌体vp1 宿主范围的测定 | 第57页 |
·噬菌体vp2 宿主范围的测定 | 第57-58页 |
2.实验结果 | 第58-59页 |
·噬菌体vp1 宿主范围 | 第58页 |
·噬菌体vp2 宿主范围 | 第58-59页 |
3.讨论 | 第59-60页 |
第六章VPP19 质粒的转化 | 第60-71页 |
1.材料和方法 | 第60-67页 |
·实验材料 | 第60-61页 |
·实验方法 | 第61-67页 |
·pBAD-VPP19 质粒的提取 | 第61-62页 |
·提取质粒质量的验证 | 第62-63页 |
·SM10 和TSA-VII-2 两株菌感受态细胞的制备 | 第63-64页 |
·电击转化 | 第64页 |
·筛选阳性克隆 | 第64-66页 |
·阳性单克隆的诱导 | 第66页 |
·阳性克隆表达产物的SDS-PAGE | 第66-67页 |
2.实验结果 | 第67-70页 |
·质粒质量检测结果 | 第67页 |
·质粒pBAD-VPP19 的电转化 | 第67-69页 |
·阳性转化菌株的蛋白诱导表达 | 第69-70页 |
3.讨论 | 第70-71页 |
参考文献 | 第71-79页 |
致谢 | 第79页 |