| 摘要 | 第1-5页 |
| Abstract | 第5-9页 |
| 1 绪论 | 第9-19页 |
| ·高血压与降血压活性肽理论 | 第9-11页 |
| ·高血压与人类健康的关系 | 第9页 |
| ·降血压活性肽理论 | 第9-11页 |
| ·降血压活性肽制备方法概述 | 第11-14页 |
| ·蛋白酶水解法制备降血压活性肽 | 第11-12页 |
| ·微生物发酵法制备降血压活性肽 | 第12-13页 |
| ·基因工程法制备降血压活性肽 | 第13-14页 |
| ·降血压活性肽多聚体的表达策略 | 第14-16页 |
| ·降血压活性肽的表达方式 | 第14-15页 |
| ·降血压活性肽的表达系统 | 第15-16页 |
| ·降血压活性肽多聚体的纯化 | 第16-17页 |
| ·降血压活性肽的传统纯化方法 | 第16页 |
| ·降血压活性肽的新型纯化方法 | 第16-17页 |
| ·立题背景及意义 | 第17-18页 |
| ·主要研究内容 | 第18-19页 |
| 2 材料和方法 | 第19-26页 |
| ·实验材料 | 第19-20页 |
| ·菌株和培养基 | 第19页 |
| ·主要试剂 | 第19页 |
| ·主要仪器和设备 | 第19-20页 |
| ·实验方法 | 第20-26页 |
| ·降血压活性肽单体的筛选 | 第20-21页 |
| ·降血压活性肽多聚体的设计思路与基因合成 | 第21页 |
| ·分子克隆实验 | 第21页 |
| ·重组表达载体pET28a-L2(252-273)-SUMO-AHPM的构建 | 第21-22页 |
| ·重组蛋白L2(252-273)-SUMO-AHPM的诱导表达 | 第22页 |
| ·重组蛋白L2(252-273)-SUMO-AHPM诱导表达条件的优化 | 第22页 |
| ·重组蛋白L2(252-273)-SUMO-AHPM在硅藻土上的吸附特性研究 | 第22-23页 |
| ·重组SUMO蛋白酶在阳离子交换树脂上的吸附特性研究 | 第23-24页 |
| ·AHPM的纯化 | 第24页 |
| ·体外胃肠消化模拟实验 | 第24页 |
| ·SDS-PAGE | 第24-25页 |
| ·蛋白浓度的测定 | 第25页 |
| ·多肽浓度的测定 | 第25页 |
| ·ACE抑制率测定 | 第25-26页 |
| 3 结果与讨论 | 第26-40页 |
| ·降血压活性肽多聚体基因的设计、优化与合成 | 第26-29页 |
| ·降血压活性肽多聚体基因的设计 | 第26-27页 |
| ·降血压活性肽多聚体基因的优化分析 | 第27-28页 |
| ·降血压活性肽多聚体基因的合成 | 第28-29页 |
| ·重组表达载体pET28a-L2(252-273)-SUMO-AHPM的构建 | 第29-31页 |
| ·携带目的基因质粒的酶切验证 | 第29页 |
| ·目的基因的PCR扩增 | 第29-30页 |
| ·重组表达载体的双酶切鉴定 | 第30页 |
| ·重组表达载体pET28a-L2(252-273)-SUMO-AHPM构建完成 | 第30-31页 |
| ·重组蛋白L2(252-273)-SUMO-AHPM的表达鉴定 | 第31-32页 |
| ·重组蛋白L2(252-273)-SUMO-AHPM诱导表达条件的优化 | 第32-34页 |
| ·IPTG浓度单因素实验 | 第32页 |
| ·诱导时机单因素实验 | 第32页 |
| ·诱导温度单因素实验 | 第32页 |
| ·诱导时间单因素实验 | 第32-34页 |
| ·重组蛋白L2(252-273)-SUMO-AHPM在硅藻土上的吸附研究 | 第34-35页 |
| ·pH对重组蛋白L2(252-273)-SUMO-AHPM在硅藻土上吸附的影响 | 第34页 |
| ·吸附容量对重组蛋白L2(252-273)-SUMO-AHPM在硅藻土上吸附的影响 | 第34页 |
| ·吸附时间对重组蛋白L2(252-273)-SUMO-AHPM在硅藻土上吸附的影响 | 第34-35页 |
| ·重组SUMO蛋白酶的纯化 | 第35-37页 |
| ·重组SUMO蛋白酶吸附时间的研究 | 第35-36页 |
| ·重组SUMO蛋白酶的梯度洗脱 | 第36-37页 |
| ·降血压活性肽多聚体的纯化 | 第37-39页 |
| ·降血压活性肽多聚体的活性鉴定 | 第39-40页 |
| 主要结论与展望 | 第40-42页 |
| 致谢 | 第42-43页 |
| 参考文献 | 第43-49页 |
| 附录: 作者在攻读硕士学位期间发表的论文 | 第49页 |
