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橡胶林土壤中真菌PCR-RFLP多样性分析及橡胶树白粉病菌检测

摘要第1-6页
ABSTRACT第6-11页
上篇文献综述第11-23页
 1 橡胶的基本概况第11-12页
 2 橡胶树白粉病研究概况第12-16页
   ·橡胶树白粉病的发生第12页
   ·橡胶树白粉病的危害第12-13页
   ·病害循环第13-15页
     ·病原菌的侵染过程第13-14页
     ·发生流行规律第14页
     ·白粉菌的越冬和越夏第14-15页
   ·橡胶树白粉病的防治措施第15-16页
 3 土壤和病原菌第16-18页
   ·传统的分离培养和鉴定的方法第16-17页
   ·分子生物学的方法第17页
   ·土壤中白粉病菌研究概况第17-18页
 4 土壤微生物多样性研究概况第18-21页
   ·土壤微生物概况第18-19页
   ·橡胶林土壤微生物多样性研究进展第19页
   ·土壤微生物分子生态学的研究方法第19-21页
     ·限制性酶切片段长度多态性分析第20-21页
 5 本研究目的意义第21-22页
 6 主要研究内容和技术路线第22-23页
下篇研究内容第23-68页
 1 材料与方法第23-36页
   ·土壤样品的采集第23-24页
   ·供试材料第24-25页
     ·供试植株第24页
     ·实验仪器第24页
     ·主要试剂的配置第24-25页
   ·特异性引物设计与选择第25-30页
     ·土壤DNA提取第27-28页
     ·真菌DNA的提取第28页
     ·PCR扩增第28-29页
     ·PCR产物回收第29页
     ·克隆转化和测序第29-30页
   ·特异性引物的验证第30-33页
     ·土壤真菌的分离第30页
     ·土壤真菌的形态鉴定第30页
     ·土壤真菌DNA的提取第30-31页
     ·土壤真菌的ITS序列分析第31页
     ·PCR-Southern杂交检测第31-33页
   ·土壤中橡胶树白粉病菌的检测第33-35页
     ·土壤DNA提取第33页
     ·特异性引物扩增第33页
     ·PCR-Southern杂交检测第33-34页
     ·土壤稀释液接种橡胶叶片实验第34-35页
     ·再侵染测定第35页
   ·橡胶林土壤真菌种群动态变化分析第35-36页
     ·18S rDNA的扩增第35-36页
     ·PCR-RFLP分析第36页
 2 结果与分析第36-61页
   ·特异性引物的设计与选择第36-37页
   ·特异性引物的验证第37-42页
     ·土壤真菌的分离培养第37-39页
     ·真菌DNA的提取第39-40页
     ·土壤真菌的ITS序列分析第40-41页
     ·土壤真菌的特异性引物扩增验证第41页
     ·PCR-Southern杂交检测第41-42页
   ·土壤中橡胶树白粉病菌的检测第42-51页
     ·土壤DNA提取第42-43页
     ·特异性引物扩增第43-45页
     ·PCR-Southern杂交检测第45-46页
     ·土壤稀释液接种橡胶叶片第46-48页
     ·病斑部位显微观察第48页
     ·病斑部位病原菌PCR扩增第48-51页
     ·再侵染检测第51页
   ·PCR-RFLP技术分析橡胶林土壤真菌种群动态变化第51-61页
     ·橡胶林土壤中可培养真菌组成第51页
     ·18S rDNA的扩增第51-52页
     ·Csp6I和HinfI酶切图谱PCR-RFLP分析第52-61页
 3 讨论第61-66页
   ·特异性引物的验证第61-62页
   ·土壤中橡胶树白粉病菌的检测第62-63页
   ·橡胶林土壤真菌种群动态变化分析第63-66页
 4 结论第66-68页
创新点第68-69页
参考文献第69-75页
附录一:土壤真菌ITS序列测序结果第75-77页
附录二:攻读硕士期间发表或者待发表的文章第77-78页
致谢第78页

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