致谢 | 第1-6页 |
摘要 | 第6-7页 |
ABSTRACT | 第7-8页 |
专业词汇中英文对照表 | 第8-11页 |
1 引言 | 第11-27页 |
·RecQL4蛋白 | 第11-15页 |
·人RecQ解旋酶 | 第11页 |
·RecQL4蛋白的结构 | 第11-12页 |
·RecQL4参与DNA复制与修复 | 第12-13页 |
·RecQL4与端粒 | 第13页 |
·RecQL4与线粒体 | 第13-14页 |
·RecQL4的核/质调控机制 | 第14-15页 |
·肿瘤与多药耐药性 | 第15-19页 |
·肿瘤细胞多药耐药机制概述 | 第15-16页 |
·以MDR1为代表的ABC转运蛋白介导的药物外排机制 | 第16-17页 |
·YB-1调控MDR1参与肿瘤多药耐药性 | 第17-19页 |
·肿瘤与线粒体 | 第19-27页 |
·线粒体概述 | 第19-20页 |
·线粒体DNA的复制 | 第20-21页 |
·线粒体DNA的修复 | 第21-24页 |
·肿瘤与活性氧 | 第24-27页 |
2 材料与方法 | 第27-45页 |
·实验材料 | 第27-31页 |
·细胞株 | 第27页 |
·质粒 | 第27页 |
·抗体 | 第27-28页 |
·引物序列 | 第28-30页 |
·主要试剂 | 第30-31页 |
·仪器设备 | 第31页 |
·实验方法 | 第31-45页 |
·质粒构建 | 第31-33页 |
·全基因组DNA提取 | 第33页 |
·RNA提取 | 第33-34页 |
·逆转录 | 第34页 |
·实时定量PCR | 第34-35页 |
·细胞培养 | 第35页 |
·细胞转染 | 第35页 |
·病毒包装与感染 | 第35-37页 |
·稳定细胞系的建立 | 第37页 |
·SDS-PAGE凝胶电泳 | 第37-40页 |
·蛋白免疫印迹 | 第40页 |
·蛋白免疫共沉淀 | 第40-41页 |
·细胞核/质分离 | 第41页 |
·线粒体纯化 | 第41-42页 |
·ROS产量检测 | 第42页 |
·免疫荧光实验 | 第42-45页 |
3 实验结果 | 第45-65页 |
·RecQL4维持线粒体基因组的稳定性 | 第45-58页 |
·RecQL4出核信号的鉴定 | 第45-50页 |
·RecQL4蛋白线粒体定位 | 第50-52页 |
·RecQL4调控线粒体DNA拷贝数 | 第52-54页 |
·RecQL4表达沉默导致ROS产量升高及线粒体形态改变 | 第54-55页 |
·RecQL4的缺陷影响线粒体的修复效率 | 第55-58页 |
·RecQL4调控肿瘤细胞多药耐药的分子机制 | 第58-65页 |
·RecQL4与YB-1相互作用 | 第58-60页 |
·RecQL4高表达促进YB-1在细胞核内的积累 | 第60-62页 |
·RecQL4通过YB-1调控MDR1的表达 | 第62-63页 |
·抑制RecQL4的表达可增强细胞对顺铂的敏感性 | 第63-65页 |
4 结论 | 第65-69页 |
参考文献 | 第69-79页 |
作者简历及攻读学位期间发表的学术论文与研究成果 | 第79页 |