| 摘要 | 第1-8页 |
| Abstract | 第8-9页 |
| 第一部分 绪论 | 第9-17页 |
| ·核盘菌 | 第9-10页 |
| ·菌核 | 第9-10页 |
| ·菌核病循环过程 | 第10页 |
| ·核盘菌的研究策略 | 第10页 |
| ·草酸功能 | 第10-12页 |
| ·草酸在致病方面功能 | 第10-11页 |
| ·草酸降解途径 | 第11-12页 |
| ·拟南芥作为模式植物研究腐生病原菌 | 第12页 |
| ·WRKY转录因子 | 第12-16页 |
| ·WRKY蛋白结构与分类 | 第12-13页 |
| ·WRKY与非生物胁迫 | 第13-14页 |
| ·WRKY与生物胁迫 | 第14页 |
| ·WRKY网络 | 第14-16页 |
| ·本研究目的与意义 | 第16-17页 |
| 第二部分 材料与方法 | 第17-25页 |
| ·实验材料 | 第17-18页 |
| ·植物材料与生长 | 第17页 |
| ·植物病原真菌 | 第17页 |
| ·载体与生化试剂 | 第17-18页 |
| ·载体构建与突变体验证 | 第18-22页 |
| ·目的基因扩增 | 第18页 |
| ·中间载体构建 | 第18页 |
| ·大肠杆菌DH5α超感的制备 | 第18-19页 |
| ·大肠杆菌转化 | 第19页 |
| ·阳性克隆鉴定 | 第19页 |
| ·质粒提取与酶切 | 第19页 |
| ·重组载体构建 | 第19-20页 |
| ·农杆菌感受态的制备 | 第20页 |
| ·重组载体转化农杆菌 | 第20页 |
| ·拟南芥转化 | 第20-21页 |
| ·突变体的筛选与验证 | 第21页 |
| ·植物DNA提取 | 第21页 |
| ·拟南芥RNA提取及反转录 | 第21-22页 |
| ·半定量PCR及荧光定量PCR | 第22页 |
| ·草酸敏感实验 | 第22页 |
| ·草酸点滴实验 | 第22页 |
| ·草酸浓度梯度实验 | 第22页 |
| ·病原菌接种 | 第22-23页 |
| ·核盘菌接种 | 第22-23页 |
| ·灰霉病菌接种 | 第23页 |
| ·叶片组织染色 | 第23页 |
| ·台盼蓝染色 | 第23页 |
| ·DAB染色 | 第23页 |
| ·植物酶活测定 | 第23-24页 |
| ·POD酶活测定 | 第24页 |
| ·PPO酶活测定 | 第24页 |
| ·PAL酶活测定 | 第24页 |
| ·数据分析与处理 | 第24-25页 |
| 第三部分 结果与分析 | 第25-46页 |
| ·草酸诱导拟南芥WRKY28、WRKY63和WRKY75基因转录水平 | 第25-27页 |
| ·拟南芥WRKY28、WRKY63和WRKY75生物信息学分析 | 第27-30页 |
| ·WRKY28、WRKY63和WRKY75过表达突变体的构建与验证 | 第30-35页 |
| ·拟南芥WRKY28过表达载体的构建 | 第31-32页 |
| ·拟南芥WRKY63过表达载体的构建 | 第32-33页 |
| ·拟南芥WRKY75过表达载体的构建 | 第33-34页 |
| ·WRKY28、WRKY63和WRKY75过表达突变体的构建及鉴定 | 第34-35页 |
| ·WRKY28、WRKY63和WRKY75突变体对草酸的抗性增强 | 第35-37页 |
| ·WRKY28、WRKY63和WRKY75突变体对核盘菌的抗性增强 | 第37-42页 |
| ·拟南芥WRKY28过表达突变体对腐生病菌的抗性增强 | 第37-38页 |
| ·拟南芥WRKY75过表达突变体对核盘菌的抗性增强 | 第38-41页 |
| ·拟南芥WRKY63过表达突变体对核盘菌的抗性增强 | 第41-42页 |
| ·突变体体内植物保护酶POD、PAL、PPO的变化 | 第42-43页 |
| ·WRKY28、WRKY75参与信号途径初探 | 第43-46页 |
| 第四部分 小结与讨论 | 第46-50页 |
| ·小结 | 第46-47页 |
| ·讨论 | 第47-50页 |
| ·WRKY28、WRKY63和WRKY75降低草酸抑制拟南芥氧爆发能力 | 第47-48页 |
| ·WRKY28、WRKY75参与生物、非生物胁迫信号途径 | 第48页 |
| ·WRKY63、WRKY75与植物酶PAL、POD、PPO的关系 | 第48-49页 |
| ·草酸为核盘菌与灰霉病菌共同的致病因子 | 第49页 |
| ·WRKY在不同植物之间功能的保守性 | 第49-50页 |
| 下一步工作 | 第50-51页 |
| 参考文献 | 第51-59页 |
| 附录 | 第59-63页 |
| 致谢 | 第63页 |
