| 摘要 | 第1-9页 |
| Abstract | 第9-11页 |
| 缩略词表 | 第11-12页 |
| 第一章 前言 | 第12-27页 |
| ·课题的提出 | 第12-13页 |
| ·相关研究进展 | 第13-25页 |
| ·马铃薯晚疫病及抗病育种概述 | 第13-15页 |
| ·植物抗病分子机理研究进展 | 第15-20页 |
| ·马铃薯晚疫病抗病机制研究进展 | 第20-24页 |
| ·植物基因功能研究策略 | 第24-25页 |
| ·本研究的基础、目的和研究内容 | 第25-27页 |
| 第二章 农杆菌介导的pCB302-3载体在本氏烟草中瞬时表达体系优化 | 第27-34页 |
| ·材料和方法 | 第27-30页 |
| ·植物材料及菌种 | 第27-28页 |
| ·载体构建 | 第28-29页 |
| ·pCB302-3-GFP农杆菌瞬时表达与绿色荧光检测 | 第29页 |
| ·绿色荧光检测定量分析 | 第29-30页 |
| ·结果与分析 | 第30-33页 |
| ·pCB302-3-GFP载体的构建 | 第30页 |
| ·瞬时表达体系表达条件优化 | 第30-33页 |
| ·小结 | 第33-34页 |
| 第三章 本氏烟草中鉴定StLRPK1基因的晚疫病抗性功能 | 第34-47页 |
| ·材料与方法 | 第34-39页 |
| ·植物材料、菌株、载体及试剂 | 第34页 |
| ·农杆菌介导的烟草转化 | 第34-35页 |
| ·转基因株系小量法抽提DNA及PCR检测 | 第35-36页 |
| ·转基因株系小量法抽提RNA | 第36页 |
| ·RNA的纯化及反转录 | 第36页 |
| ·Real time-PCR检测转基因株系中目的基因的表达量 | 第36-37页 |
| ·转基因株系的种植 | 第37页 |
| ·晚疫病原菌的扩繁 | 第37页 |
| ·转基因株系晚疫病原菌的接种 | 第37-38页 |
| ·植物组织化学染色分析 | 第38页 |
| ·信号途径Marker基因表达量分析 | 第38-39页 |
| ·结果与分析 | 第39-45页 |
| ·本氏烟草遗传转化及转基因株系PCR鉴定 | 第39-40页 |
| ·荧光实时定量PCR检测转基因株系目标基因表达量 | 第40-41页 |
| ·超量表达StLRPK1本氏烟草转基因株系晚疫病抗性增强 | 第41-43页 |
| ·StLRPK1超量表达后H_2O_2和胼胝质的积累增强 | 第43-44页 |
| ·超量表达StLRPK1转基因株系抗病相关Marker基因表达量分析 | 第44-45页 |
| ·小结 | 第45-47页 |
| 第四章 StLRPK1激酶域的原核表达及StLRPK1与BAK1互作初步验证 | 第47-57页 |
| ·材料与方法 | 第47-51页 |
| ·植物材料、载体及试剂 | 第47页 |
| ·StLRPK1激酶域原核表达载体构建 | 第47-48页 |
| ·蛋白诱导表达、检测与纯化 | 第48-49页 |
| ·SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳检测目的蛋白表达量 | 第49页 |
| ·含有GST标签的蛋白柱式纯化 | 第49-50页 |
| ·蛋白激酶自激活性分析 | 第50页 |
| ·BiFC载体构建 | 第50-51页 |
| ·农杆菌共注射及黄色荧光显微镜观察 | 第51页 |
| ·结果分析 | 第51-56页 |
| ·StLRPK1激酶域原核表达载体构建 | 第51-52页 |
| ·GST融合蛋白的表达与纯化 | 第52-53页 |
| ·StLRPK1激酶域蛋白磷酸化活性测定 | 第53-54页 |
| ·BiFC证明StLRPK1与BAK1互作 | 第54-56页 |
| ·小结 | 第56-57页 |
| 第五章 StLRPK1介导的PTI与MAPK信号传导途径的可能关系分析 | 第57-70页 |
| ·材料和方法 | 第57-61页 |
| ·植物材料、菌株、载体及试剂 | 第57-58页 |
| ·效应子载体构建 | 第58-59页 |
| ·效应子的瞬时表达及接种 | 第59-60页 |
| ·MAPK信号途径中WRKY8及其下游基因表达量检测 | 第60页 |
| ·在转基因本氏烟草中VIGS沉默MAPK信号途径关键基因 | 第60-61页 |
| ·荧光实时定量PCR检测VIGS沉默后相关基因的表达量 | 第61页 |
| ·结果与分析 | 第61-68页 |
| ·效应子的筛选 | 第61-64页 |
| ·MAPK信号途径分析 | 第64-68页 |
| ·小结 | 第68-70页 |
| 第六章 讨论 | 第70-75页 |
| ·StLRPK1在晚疫病抗性中起着重要作用 | 第70页 |
| ·StLRPK1介导抗性与MAPK信号途径的相互关系 | 第70-71页 |
| ·晚疫病原菌效应子抑制StLRPK1介导的抗性 | 第71-72页 |
| ·StLRPK1很可能与BAK1互作通过MAPK传递信号 | 第72-73页 |
| ·研究展望 | 第73-75页 |
| 参考文献 | 第75-86页 |
| 附录 | 第86-87页 |
| 致谢 | 第87页 |
