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桃microRNAs鉴定及内参基因的筛选

摘要第1-9页
ABSTRACT第9-11页
缩略词第11-12页
第一章 文献综述第12-26页
 1 miRNA简介第12-13页
   ·miRNA的发现和发展第12页
   ·植物miRNA的生物合成和特点第12-13页
 2 植物miRNA的作用机制第13页
 3 植物miRNA的鉴定和检测方法第13-15页
   ·遗传学的筛选法第13-14页
   ·小分子RNA的克隆第14页
   ·生物信息学的预测第14-15页
   ·高通量的测序第15页
   ·Northern杂交第15页
   ·实时定量反转录聚合酶链式反应(RT-qPCR)第15页
 4 miRNA靶基因的鉴定第15-16页
   ·生物信息学的预测第16页
   ·靶基因的验证方法第16页
   ·降解组测序第16页
 5 miRNA在植物体生长发育中的作用第16-17页
 6 果树miRNA的研究进展第17-19页
   ·葡萄miRNA的研究第17-18页
   ·柑橘miRNA的研究第18-19页
   ·苹果miRNA的研究第19页
   ·桃miRNA的研究第19页
 7 研究的目的及意义第19-20页
 参考文献第20-26页
第二章 桃保守miRNA及其靶基因的生物信息学预测和验证第26-48页
 摘要第26页
 1 材料与方法第26-29页
   ·植物材料的准备第26-27页
   ·相关数据库的获得第27页
   ·应用的软件第27页
   ·用生物信息学的方法预测桃的miRNA及其靶基因第27页
   ·小分子(Low molecular weight,LMW)RNA的提取与检测第27-28页
   ·用RT-qPCR的方法验证和分析miRNA第28-29页
   ·用RLM-RACE的方法验证miRNA的靶基因第29页
   ·miRNA革E基因的表达分析第29页
 2 结果与分析第29-43页
   ·桃基因组中潜在的miRNA的分析第29-39页
   ·预测的miRNA的靶基因第39-41页
   ·miRNA在桃幼叶、幼茎和花中的差异表达第41页
   ·miRNA靶基因的验证和靶基因在桃不同组织中的表达第41-43页
 3 讨论第43-45页
 参考文献第45-48页
第三章 用高通量测序和降解组测序的方法发掘桃中的miRNA和靶基因第48-62页
 摘要第48页
 1 材料与方法第48-52页
   ·植物材料的准备第48-49页
   ·小分子RNA与降解组文库的构建第49页
   ·用生物信息学的方法分析高通量测得的数据第49-50页
   ·用荧光定量PCR的方法检测桃的miRNA第50-52页
 2 实验结果与分析第52-59页
   ·小分子RNA测序后的分析第52-53页
   ·鉴定桃中保守的miRNA和进化保守性分析第53-56页
   ·桃中潜在的新的miRNA的鉴定第56页
   ·miRNA的验证与表达分析第56-58页
   ·桃降解组测序数据分析第58页
   ·桃保守miRNA和新miRNA靶基因的鉴定第58-59页
 3 讨论第59-60页
 参考文献第60-62页
第四章 桃在非生物逆境下miRNA最适内参基因的筛选第62-74页
 摘要第62页
 1 材料和方法第62-65页
   ·材料的准备第62-63页
   ·选择合适的内参基因与内参引物的设计第63-64页
   ·小分子RNA的提取和cDNA的合成第64页
   ·荧光定量PCR第64页
   ·数据分析第64-65页
 2 结果与分析第65-70页
   ·PCR扩增效率及扩增特异性第65页
   ·内参基因的表达分析第65-66页
   ·GeNorm分析第66-68页
   ·GeNorm软件分析最佳的内参基因的数目第68页
   ·NormFinder软件分析第68-70页
 3 讨论第70-72页
 参考文献第72-74页
全文结论第74-76页
主要创新点第76-78页
发表论文情况第78-80页
致谢第80页

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