| 摘要 | 第1-10页 |
| ABSTRACT | 第10-12页 |
| 缩略语 | 第12-13页 |
| 引言 | 第13-14页 |
| 第一章 文献综述 | 第14-34页 |
| 1 蛋白激酶 | 第14-19页 |
| ·蛋白激酶的分类 | 第14页 |
| ·植物蛋白激酶研究进展 | 第14-19页 |
| ·受体蛋白激酶(RLK) | 第15-16页 |
| ·分裂原激活蛋白激酶(MAPK) | 第16-17页 |
| ·钙依赖而钙调素不依赖蛋白激酶(CDPK) | 第17页 |
| ·蔗糖非发酵1型相关蛋白激酶(SnRK) | 第17-19页 |
| 2 S RK2蛋白激酶家族结构 | 第19-20页 |
| 3 S RK2蛋白激酶的活性及表达 | 第20-21页 |
| 4 SnRK2蛋白激酶家族的调控网络 | 第21-23页 |
| 5 本研究的目的和意义 | 第23-25页 |
| 参考文献 | 第25-34页 |
| 第二章 葡萄SnRK2基因家族的全基因组鉴定和生物信息学分析 | 第34-48页 |
| 摘要 | 第34-35页 |
| 1 材料和方法 | 第35-37页 |
| ·数据库的搜索 | 第35-36页 |
| ·序列分析和系统进化树的构建 | 第36页 |
| ·S RK2蛋白质结构分析 | 第36页 |
| ·SnRK2基因结构分析 | 第36页 |
| ·SnRK2 C-末端motif分析 | 第36页 |
| ·SnRK2 C-末端序列比对分析 | 第36-37页 |
| ·SnRK2的EST分析 | 第37页 |
| 2 结果与分析 | 第37-44页 |
| ·葡萄SnRK2候选基因的确定和染色体的定位 | 第37-38页 |
| ·葡萄SnRK2蛋白质理化性质分析 | 第38页 |
| ·葡萄SnRK2蛋白二级结构分析 | 第38页 |
| ·葡萄SnRK2的系谱发生 | 第38-41页 |
| ·葡萄SnRK2的基因结构分析 | 第41-42页 |
| ·葡萄SnRK2的C末端motif分析 | 第42-43页 |
| ·葡萄SnRK2 C-末端序列比对分析 | 第43页 |
| ·葡萄SnRK2的EST表达分析 | 第43-44页 |
| 3 讨论 | 第44-46页 |
| 参考文献 | 第46-48页 |
| 第三章 葡萄SnRK2家族基因的表达分析 | 第48-72页 |
| 摘要 | 第48-49页 |
| 1 材料和方法 | 第49-53页 |
| ·芯片数据 | 第49页 |
| ·材料和处理 | 第49-50页 |
| ·引物 | 第50-51页 |
| ·试剂和仪器 | 第51页 |
| ·方法 | 第51-53页 |
| ·总RNA的提取 | 第51页 |
| ·总RNA中DNA的消化及cDNA第一链的合成 | 第51-52页 |
| ·荧光定量PCR分析 | 第52-53页 |
| 2 结果与分析 | 第53-61页 |
| ·葡萄SnRK2基于芯片数据的表达分析 | 第53-56页 |
| ·葡萄SnRK2基因在不同组织、器官及其不同发育阶段的表达情况 | 第53-55页 |
| ·葡萄SnRK2响应生物和非生物胁迫的表达情况 | 第55-56页 |
| ·葡萄SnRK2响应外源ABA的表达情况 | 第56页 |
| ·葡萄SnRK2基于荧光定量PCR(qRT-PCR)的表达分析 | 第56-61页 |
| ·处理材料RNA的提取 | 第56-57页 |
| ·葡萄SnRK2基因荧光引物筛选 | 第57-58页 |
| ·干旱处理条件下葡萄中6个SnRK2基因的表达情况 | 第58页 |
| ·NaCl处理条件下葡萄中6个SnRK2基因的表达情况 | 第58页 |
| ·高温处理条件下葡萄6个SnRK2基因的表达情况 | 第58-59页 |
| ·低温处理条件下葡萄中6个VvSnRK2基因的表达情况 | 第59页 |
| ·ABA处理条件下葡萄中6个SnRK2基因的表达情况 | 第59-61页 |
| 3 讨论 | 第61-62页 |
| 参考文献 | 第62-72页 |
| 第四章 葡萄VvSnRK2.2的克隆、序列分析及拟南芥遗传转化 | 第72-88页 |
| 摘要 | 第72-73页 |
| 1 材料和方法 | 第73-79页 |
| ·材料 | 第73-74页 |
| ·植物材料 | 第73页 |
| ·仪器、试剂和耗材 | 第73页 |
| ·载体质粒和农杆菌菌株 | 第73-74页 |
| ·方法 | 第74-79页 |
| ·基因克隆 | 第74-77页 |
| ·载体构建 | 第77-78页 |
| ·拟南芥遗传转化(花粉管通道法) | 第78-79页 |
| 2 结果与分析 | 第79-86页 |
| ·基因的克隆与序列分析 | 第79-83页 |
| ·总RNA的提取 | 第79-80页 |
| ·VvSnRK2.2基因的克隆 | 第80页 |
| ·VvSnRK2.2基因的序列分析 | 第80-83页 |
| ·植物表达载体的构建 | 第83-84页 |
| ·带酶切位点的VvSnRK2.2基因的克隆 | 第83页 |
| ·载体构建成功农杆菌菌液检测 | 第83-84页 |
| ·拟南芥转基因株系的检测 | 第84-86页 |
| ·TO代转基因种子的初步筛选 | 第84页 |
| ·转基因拟南芥GUS染色结果 | 第84-85页 |
| ·转基因株系T3代GUS染色 | 第85页 |
| ·RT-PCR检测 | 第85-86页 |
| 3 讨论 | 第86-87页 |
| 参考文献 | 第87-88页 |
| 第五章 VvSnRK2.2基因的功能验证 | 第88-98页 |
| 摘要 | 第88-89页 |
| 1 材料和方法 | 第89-90页 |
| ·材料 | 第89页 |
| ·植物材料 | 第89页 |
| ·仪器和试剂 | 第89页 |
| ·方法 | 第89-90页 |
| ·转基因株系在正常生长条件下的表型观察 | 第89页 |
| ·转基因株系在各种胁迫处理条件下的表型观察 | 第89-90页 |
| 2 结果与分析 | 第90-96页 |
| ·野生型拟南芥和转基因株系的发芽状态 | 第90页 |
| ·野生型拟南芥和转基因株系的初生根长度 | 第90-91页 |
| ·野生型拟南芥和转基因株系非生物胁迫抗性分析 | 第91-96页 |
| ·野生型拟南芥和转基因拟南芥在对照培养基上的生长情况 | 第91页 |
| ·NaCl(100mM)处理条件下的表型观察 | 第91-92页 |
| ·ABA(1OμM和50μM)处理条件下的表型观察 | 第92-94页 |
| ·转基因株系抗旱性分析 | 第94-96页 |
| 3 讨论 | 第96-97页 |
| 参考文献 | 第97-98页 |
| 全文结论 | 第98-100页 |
| 主要创新点 | 第100-102页 |
| 附录 | 第102-106页 |
| 攻读硕士学位期间所发表论文 | 第106-108页 |
| 致谢 | 第108页 |
