| 摘要 | 第1-5页 |
| Abstract | 第5-11页 |
| 第一章 前言综述 | 第11-34页 |
| ·链霉菌概述 | 第11-14页 |
| ·链霉菌的一般特征 | 第11页 |
| ·链霉菌的发育分化 | 第11-12页 |
| ·链霉菌的次级代谢产物 | 第12-13页 |
| ·天蓝色链霉菌代谢物组学测定方法1 | 第13-14页 |
| ·聚酮化合物的生物合成 | 第14-18页 |
| ·链霉菌的次级代谢调控 | 第18-27页 |
| ·途径特异性调控 | 第18-20页 |
| ·SARP家族 | 第18-19页 |
| ·应答调控蛋白家族 | 第19-20页 |
| ·多效调控 | 第20-23页 |
| ·链霉菌的全局调控 | 第23-24页 |
| ·组氨酸蛋白激酶介导的双组份信号系统 | 第23-24页 |
| ·丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶介导的双组分信号系统 | 第24页 |
| ·TetR家族调控蛋白对链霉菌次级代谢的影响 | 第24-27页 |
| ·土霉素合成基因簇及合成方式 | 第27-28页 |
| ·链霉菌与合成生物学 | 第28-34页 |
| ·合成生物学概述 | 第28页 |
| ·合成生物学的基础研究 | 第28-31页 |
| ·链霉菌合成生物学的层次化结构 | 第31-32页 |
| ·链霉菌调控网络研究方法 | 第32页 |
| ·调控网络和代谢网络的整合 | 第32-34页 |
| 第二章 实验材料 | 第34-43页 |
| ·质粒,菌株和引物 | 第34-35页 |
| ·质粒 | 第34页 |
| ·菌株 | 第34页 |
| ·引物 | 第34-35页 |
| ·培养基,缓冲液及抗生素 | 第35-38页 |
| ·培养基 | 第35-36页 |
| ·缓冲液 | 第36-38页 |
| ·抗生素 | 第38页 |
| ·实验方法 | 第38-43页 |
| ·大肠杆菌感受态细胞的制备和转化 | 第38-39页 |
| ·大肠杆菌质粒DNA的小量抽提 | 第39页 |
| ·带有His_6标签重组蛋白的表达与纯化 | 第39-40页 |
| ·凝胶阻滞(EMSA)实验 | 第40-41页 |
| ·SPR(表面等离子共振)实验 | 第41-43页 |
| 第三章 天蓝色链霉菌代谢物组测定方法的优化及代谢特征分析 | 第43-53页 |
| ·引言 | 第43页 |
| ·代谢物组学分析流程 | 第43页 |
| ·不同样品处理条件对代谢物提取的影响 | 第43-46页 |
| ·细胞淬灭时间优化 | 第43-44页 |
| ·细胞分离条件优化 | 第44-45页 |
| ·代谢物提取条件的优化 | 第45-46页 |
| ·代谢物衍生化条件的优化 | 第46页 |
| ·GC-MS可检测代谢物在天蓝色链霉菌代谢网络中的覆盖度 | 第46-48页 |
| ·天蓝色链霉菌细胞代谢的时序分析 | 第48-50页 |
| ·讨论 | 第50-53页 |
| 第四章 OtrR调控龟裂链霉菌次级代谢的机制 | 第53-61页 |
| ·引言 | 第53页 |
| ·pET-23b-OtrR载体的构建 | 第53-54页 |
| ·His6-OtrR的表达纯化 | 第54页 |
| ·EMSA分析OtrR结合的靶点 | 第54-55页 |
| ·SPR实验研究OtrR与靶启动子的结合作用 | 第55-57页 |
| ·四种小分子抑制OtrR与靶启动子的结合 | 第57-59页 |
| ·讨论 | 第59-61页 |
| 第五章 总结 | 第61-63页 |
| ·获得的主要成果 | 第61页 |
| ·创新之处 | 第61-62页 |
| ·下一步研究内容 | 第62-63页 |
| 参考文献 | 第63-70页 |
| 致谢 | 第70-71页 |
| 硕士期间发表论文 | 第71页 |