| 摘要 | 第1-8页 |
| Abstract | 第8-11页 |
| 前言 | 第11-15页 |
| ·基因合成技术研究现状 | 第11-12页 |
| ·微生物活体染色方法的研究现状 | 第12-15页 |
| 第1章 高保真DNA单向合成方法基因合成新方法探究 | 第15-59页 |
| 1 实验材料 | 第15-16页 |
| ·寡核苷酸原料 | 第15页 |
| ·酶与试剂 | 第15页 |
| ·主要的缓冲液 | 第15-16页 |
| ·主要仪器 | 第16页 |
| 2 方法 | 第16-23页 |
| ·酶的选择 | 第16-17页 |
| ·合成DNA序列的来源 | 第17页 |
| ·HFUS法设计原理 | 第17-18页 |
| ·寡核苷酸片段的序列设计过程 | 第18-19页 |
| ·缓冲液的制备方法 | 第19-20页 |
| ·基因合成的反应体系和合成过程 | 第20页 |
| ·基因合成的产物鉴定 | 第20页 |
| ·HFUS法阴性对照实验 | 第20-21页 |
| ·基因片段的基因操作和T载体克隆 | 第21-23页 |
| ·DNA片段合成错误率评价指标 | 第23页 |
| 3 结果 | 第23-56页 |
| ·不同寡核苷酸片段浓度梯度对DNA合成结果的影响分析 | 第23-25页 |
| ·不同寡核苷酸单链之间的比例对DNA合成结果的影响分析 | 第25-27页 |
| ·不同的反应体系的体积对DNA合成结果的影响分析 | 第27-28页 |
| ·不同的buffer溶液对DNA合成结果的影响分析 | 第28-29页 |
| ·不同的PhusionDNA聚合酶用量对DNA合成结果的影响分析 | 第29-31页 |
| ·不同的BsrDI限制性内切酶用量对DNA合成结果的影响分析 | 第31-32页 |
| ·不同的Lamda外切酶用量对DNA合成结果的影响分析 | 第32-33页 |
| ·不同的PhusionDNA聚合酶反应时间对DNA合成结果的影响 | 第33-34页 |
| ·不同的BsrDI限制性内切酶反应时间对DNA合成结果的影响 | 第34-35页 |
| ·不同的Lamda外切酶反应时间对DNA合成结果的影响 | 第35-36页 |
| ·不同的循环反应次数对DNA合成结果的影响分析 | 第36-38页 |
| ·不同的PCR鉴定模板用量对DNA合成结果的影响分析 | 第38页 |
| ·171bp DNA片段合成的最佳反应条件和合成结果 | 第38-42页 |
| ·340bp DNA片段合成的最佳反应条件和合成结果 | 第42-50页 |
| ·480bp DNA片段合成的最佳反应条件和合成结果 | 第50-52页 |
| ·680bp DNA片段合成的最佳反应条件和合成结果 | 第52-55页 |
| ·DNA合成结果的序列测定与出错率分析结果 | 第55-56页 |
| 本章小结 | 第56-57页 |
| 5 讨论与展望 | 第57-59页 |
| 第2章 微生物的温和染色方法的初步探索 | 第59-73页 |
| 1 材料 | 第59-60页 |
| ·非病原微生物和病原微生物 | 第59页 |
| ·培养基 | 第59页 |
| ·试剂 | 第59页 |
| ·主要溶液 | 第59-60页 |
| ·主要仪器 | 第60页 |
| 2 方法 | 第60-64页 |
| ·色素培养基的制备 | 第60页 |
| ·菌体的活化处理与细菌的培养 | 第60-61页 |
| ·SDS-PAGE检测ADH的表达 | 第61页 |
| ·病原微生物的培养 | 第61-62页 |
| ·固体色素培养基平板划线 | 第62页 |
| ·细菌菌落计数 | 第62-63页 |
| ·细菌OD值检测方法 | 第63页 |
| ·质粒转化及重组子的筛选、鉴定 | 第63页 |
| ·油镜观察微生物的操作方法 | 第63-64页 |
| 3. 结果 | 第64-70页 |
| ·使用日落黄色素等5种色素培养基培养大肠杆菌DH5α结果 | 第64-65页 |
| ·使用油镜镜检日落黄色素等5种色素培养基培养大肠杆菌DH5α | 第65-66页 |
| ·采用菌落计数法评估日落黄色素对大肠杆菌DH5α生长的影响 | 第66页 |
| ·日落黄色素培养基培养的菌体检测大肠杆菌的菌体生长曲线 | 第66-67页 |
| ·日落黄色素培养的微生物颜色对比结果 | 第67-68页 |
| ·SDS-PAGE检测日落黄色素培养大肠杆菌Rosetta菌株基因表达量 | 第68-69页 |
| ·采用日落黄色素培养基培养金黄色葡萄球菌等病原菌检测菌体的生长状况 | 第69-70页 |
| 4 本章小结 | 第70-71页 |
| 5 讨论 | 第71-73页 |
| 结论 | 第73-74页 |
| 参考文献 | 第74-78页 |
| 附录 | 第78-81页 |
| 攻读硕士学位期间发表的学术论文、专利及参加的会议 | 第81-82页 |
| 致谢 | 第82页 |
