符号说明 | 第1-8页 |
中文摘要 | 第8-10页 |
Abstract | 第10-12页 |
1 前言 | 第12-34页 |
·小分泌蛋白 | 第12页 |
·小分泌蛋白的分类 | 第12-18页 |
·根据结构域分类 | 第12-14页 |
·根据翻译后修饰分类 | 第14-17页 |
·翻译后修饰的小分泌蛋白 | 第14-16页 |
·酪氨酸硫化 | 第14-15页 |
·脯氨酸羟化 | 第15页 |
·羟脯氨酸阿拉伯糖糖基化 | 第15-16页 |
·富含半胱氨酸的小分泌蛋白 | 第16-17页 |
·根据半胱氨酸的模式分类 | 第17-18页 |
·小分泌蛋白的功能 | 第18-31页 |
·翻译后修饰的小分泌蛋白对生长发育的调节 | 第18-19页 |
·CRPs 的功能 | 第19-26页 |
·研究的比较深入的超家族的功能 | 第26-31页 |
·小分泌蛋白的进化 | 第31-33页 |
·本研究意义 | 第33-34页 |
2 材料与方法 | 第34-51页 |
·实验材料 | 第34-35页 |
·植物材料及其生长条件 | 第34页 |
·菌株与载体 | 第34页 |
·酶及其它生化试剂 | 第34页 |
·主要仪器 | 第34页 |
·PCR 引物 | 第34页 |
·测序 | 第34-35页 |
·分析软件和网站 | 第35页 |
·引物 | 第35页 |
·实验方法 | 第35-44页 |
·CTAB 法玉米 DNA 提取 | 第35-36页 |
·试剂盒法提取玉米胚囊的 RNA | 第36-37页 |
·用试剂盒对胚囊 RNA 进行反转录,同时线性扩增 | 第37-38页 |
·扩增目的片段 | 第38-39页 |
·克隆载体的构建和测序 | 第39-41页 |
·表达载体的构建 | 第41-42页 |
·用试剂盒提取克隆质粒 | 第41页 |
·表达载体的构建 | 第41-42页 |
·转基因酵母的获得 | 第42-44页 |
·线性化转化 DNA 的制备 | 第42-43页 |
·毕赤酵母 GS115 感受态细胞的制备 | 第43页 |
·毕赤酵母 GS115 感受态细胞的电转化 | 第43页 |
·毕赤酵母 GS115 阳性克隆的 PCR 筛选 | 第43-44页 |
·转基因酵母的培养和蛋白表达 | 第44页 |
·SDS-PAGE 电泳 | 第44-48页 |
·转膜 | 第46-47页 |
·wesetern 检测 | 第47-48页 |
·蛋白的纯化 | 第48-51页 |
·对于 western 检测为阳性的蛋白表达产物 | 第48-49页 |
·对咪唑洗脱液进行 SDS-PAGE 电泳和 western 检测 | 第49页 |
·对于有蛋白的咪唑洗脱液,用蛋白超滤柱浓缩纯化 | 第49页 |
·蛋白与花粉管体外互作 | 第49-51页 |
3 结果与分析 | 第51-87页 |
·玉米的小分泌蛋白 | 第51-80页 |
·玉米小分泌蛋白的预测 | 第51-52页 |
·玉米和拟南芥小分泌蛋白的基本规律 | 第52-53页 |
·玉米小分泌蛋白在染色体上的分布 | 第53-55页 |
·GO 分析小分泌蛋白参与的生物学过程 | 第55-58页 |
·玉米小分泌蛋白的功能注释 | 第58-74页 |
·按保守结构域分类 | 第58-62页 |
·按翻译后修饰分类 | 第62-63页 |
·富含半胱氨酸的小分泌蛋白 | 第63-72页 |
·未能分类的小分泌蛋白 | 第72-74页 |
·小分泌蛋白在生殖器官中的表达模式 | 第74-80页 |
·玉米胚囊优势表达小分泌蛋白的体外表达 | 第80-85页 |
·构建载体和酵母转化 | 第83-84页 |
·蛋白表达 | 第84-85页 |
·目的蛋白纯化和检测 | 第85页 |
·玉米胚囊优势表达蛋白与花粉管互作 | 第85-87页 |
4 讨论 | 第87-91页 |
5 结论 | 第91-92页 |
参考文献 | 第92-103页 |
致谢 | 第103页 |