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玉米生殖组织中小分泌蛋白的分析

符号说明第1-8页
中文摘要第8-10页
Abstract第10-12页
1 前言第12-34页
   ·小分泌蛋白第12页
   ·小分泌蛋白的分类第12-18页
     ·根据结构域分类第12-14页
     ·根据翻译后修饰分类第14-17页
       ·翻译后修饰的小分泌蛋白第14-16页
         ·酪氨酸硫化第14-15页
         ·脯氨酸羟化第15页
         ·羟脯氨酸阿拉伯糖糖基化第15-16页
       ·富含半胱氨酸的小分泌蛋白第16-17页
     ·根据半胱氨酸的模式分类第17-18页
   ·小分泌蛋白的功能第18-31页
     ·翻译后修饰的小分泌蛋白对生长发育的调节第18-19页
     ·CRPs 的功能第19-26页
     ·研究的比较深入的超家族的功能第26-31页
   ·小分泌蛋白的进化第31-33页
   ·本研究意义第33-34页
2 材料与方法第34-51页
   ·实验材料第34-35页
     ·植物材料及其生长条件第34页
     ·菌株与载体第34页
     ·酶及其它生化试剂第34页
     ·主要仪器第34页
     ·PCR 引物第34页
     ·测序第34-35页
     ·分析软件和网站第35页
     ·引物第35页
   ·实验方法第35-44页
     ·CTAB 法玉米 DNA 提取第35-36页
     ·试剂盒法提取玉米胚囊的 RNA第36-37页
     ·用试剂盒对胚囊 RNA 进行反转录,同时线性扩增第37-38页
     ·扩增目的片段第38-39页
     ·克隆载体的构建和测序第39-41页
     ·表达载体的构建第41-42页
       ·用试剂盒提取克隆质粒第41页
       ·表达载体的构建第41-42页
     ·转基因酵母的获得第42-44页
       ·线性化转化 DNA 的制备第42-43页
       ·毕赤酵母 GS115 感受态细胞的制备第43页
       ·毕赤酵母 GS115 感受态细胞的电转化第43页
       ·毕赤酵母 GS115 阳性克隆的 PCR 筛选第43-44页
   ·转基因酵母的培养和蛋白表达第44页
   ·SDS-PAGE 电泳第44-48页
     ·转膜第46-47页
     ·wesetern 检测第47-48页
   ·蛋白的纯化第48-51页
     ·对于 western 检测为阳性的蛋白表达产物第48-49页
     ·对咪唑洗脱液进行 SDS-PAGE 电泳和 western 检测第49页
     ·对于有蛋白的咪唑洗脱液,用蛋白超滤柱浓缩纯化第49页
     ·蛋白与花粉管体外互作第49-51页
3 结果与分析第51-87页
   ·玉米的小分泌蛋白第51-80页
     ·玉米小分泌蛋白的预测第51-52页
     ·玉米和拟南芥小分泌蛋白的基本规律第52-53页
     ·玉米小分泌蛋白在染色体上的分布第53-55页
     ·GO 分析小分泌蛋白参与的生物学过程第55-58页
     ·玉米小分泌蛋白的功能注释第58-74页
       ·按保守结构域分类第58-62页
       ·按翻译后修饰分类第62-63页
       ·富含半胱氨酸的小分泌蛋白第63-72页
       ·未能分类的小分泌蛋白第72-74页
     ·小分泌蛋白在生殖器官中的表达模式第74-80页
   ·玉米胚囊优势表达小分泌蛋白的体外表达第80-85页
     ·构建载体和酵母转化第83-84页
     ·蛋白表达第84-85页
     ·目的蛋白纯化和检测第85页
   ·玉米胚囊优势表达蛋白与花粉管互作第85-87页
4 讨论第87-91页
5 结论第91-92页
参考文献第92-103页
致谢第103页

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