| 摘要 | 第1-9页 |
| Abstract | 第9-11页 |
| 縮略词表 | 第11-14页 |
| 第1章 文献综述 | 第14-29页 |
| ·猪链球菌和猪链球菌病 | 第14-15页 |
| ·猪链球菌致病机制以及毒力因子研究 | 第15-23页 |
| ·猪链球菌致病机制研究进展 | 第15-21页 |
| ·猪链球菌的假设毒力因子和毒力标记 | 第21-23页 |
| ·结构生物学简介 | 第23-25页 |
| ·X射线晶体衍射法 | 第23-24页 |
| ·核磁共振法 | 第24-25页 |
| ·电子显微学法 | 第25页 |
| ·猪链球菌喹诺酮耐药研究进展 | 第25-28页 |
| ·喹诺酮类药物简介 | 第25页 |
| ·喹诺酮类药物杀菌机制 | 第25-26页 |
| ·猪链球菌耐喹诺酮类药物机制 | 第26-28页 |
| ·本研究内容 | 第28-29页 |
| 第2章 猪链球菌2型细胞壁蛋白HP0197的结构与功能研究 | 第29-87页 |
| ·前言 | 第29页 |
| ·材料与方法 | 第29-49页 |
| ·主要试剂 | 第29-31页 |
| ·主要缓冲液以及凝胶的配制 | 第31-34页 |
| ·菌株培养以及细胞株的传代 | 第34页 |
| ·主要仪器设备 | 第34-35页 |
| ·基因克隆以及质粒构建 | 第35-41页 |
| ·蛋白表达与纯化 | 第41-43页 |
| ·晶体生长实验 | 第43-44页 |
| ·数据收集和结构解析 | 第44-46页 |
| ·间接免疫荧光分析 | 第46页 |
| ·流式细胞术分析 | 第46-47页 |
| ·蛋白与生物素化修饰肝素的互作试验 | 第47页 |
| ·SS2细胞粘附与粘附抑制试验 | 第47-48页 |
| ·统计学分析 | 第48-49页 |
| ·结果与分析 | 第49-83页 |
| ·HP0197是一个功能未知的SS2毒力相关的细胞壁蛋白 | 第49-51页 |
| ·HP0197蛋白的纯化 | 第51-52页 |
| ·HP0197蛋白晶体生长条件的初步筛选 | 第52-53页 |
| ·18-kDa结构域的发现 | 第53-54页 |
| ·18-kDa与G5结构域的蛋白表达纯化 | 第54-58页 |
| ·蛋白晶体生长条件的筛选和优化 | 第58-60页 |
| ·数据收集与结构解析 | 第60-71页 |
| ·18-kDa结构域和G5结构域的结构特征 | 第71-73页 |
| ·HP0197蛋白可以通过肝素与HEp-2细胞互作 | 第73-75页 |
| ·其他糖胺聚糖与HP0197蛋白的相互作用 | 第75-77页 |
| ·18-kDa结构域是HP0197蛋白的肝素结合结构域 | 第77-78页 |
| ·18-kDa结构域中肝素结合位点的分析和鉴定 | 第78-82页 |
| ·HP0197与细胞表面糖胺聚糖的互作对SS2与HEp-2细胞粘附的贡献 | 第82-83页 |
| ·讨论 | 第83-85页 |
| ·HP0197蛋白的结构研究 | 第83-84页 |
| ·HP0197与宿主细胞表面的糖胺聚糖互作对猪链球菌的重要意义 | 第84-85页 |
| ·HP0197通过参与猪链球菌的糖代谢影响其毒力 | 第85页 |
| ·展望 | 第85-87页 |
| 第3章 猪链球菌喹诺酮耐药相关基因突变研究 | 第87-106页 |
| ·前言 | 第87-90页 |
| ·材料与方法 | 第90-98页 |
| ·菌株 | 第90页 |
| ·主要试剂 | 第90页 |
| ·主要缓冲液以及培养基的配制 | 第90-91页 |
| ·主要仪器设备 | 第91页 |
| ·基因克隆以及质粒构建 | 第91-98页 |
| ·MIC值的测定 | 第98页 |
| ·结果与分析 | 第98-104页 |
| ·成功获得了5个DNA促旋酶和拓扑异构酶Ⅳ突变体质粒 | 第98-101页 |
| ·各突变体对细菌喹诺酮耐药性的贡献 | 第101-104页 |
| ·讨论 | 第104-106页 |
| 第4章 结论 | 第106-107页 |
| 参考文献 | 第107-119页 |
| 致谢 | 第119-120页 |
| 附录 | 第120页 |
