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羊草逆境抗性基因LcPIP和LcLHP的克隆与表达分析

摘要第1-5页
Abstract第5-9页
1 绪论第9-14页
   ·引言第9页
   ·植物盐碱抗性基因工程的研究第9-11页
     ·盐碱相关基因及转基因植物的研究第9-10页
     ·植物盐碱逆境胁迫中的信号转导和表达调控第10-11页
   ·植物抗性基因与逆境胁迫的研究第11-13页
     ·植物水孔蛋白PIP基因的耐盐性研究第11-12页
     ·植物脂氧合酶基因LOX在逆境胁迫中的研究第12-13页
   ·本项研究的目的和意义第13-14页
2 盐碱胁迫下羊草抗性基因LcPIP和LcLHP的克隆与序列分析第14-37页
   ·试验材料第14页
   ·试验试剂第14-15页
     ·羊草RNA提取试剂第14页
     ·基因克隆试剂第14-15页
   ·试验方法第15-22页
     ·羊草地上部总RNA的提取第15页
     ·RACE反应的引物设计第15页
     ·羊草基因5’RACE片段的扩增第15-17页
     ·羊草基因3’RACE片段的扩增第17-19页
     ·PCR目的片段的回收纯化与连接第19页
     ·阳性克隆的筛选第19-20页
     ·阳性克隆的质粒PCR鉴定第20-21页
     ·羊草基因cDNA全长扩增第21页
     ·羊草抗性基因的生物信息学分析第21-22页
   ·结果与分析第22-35页
     ·羊草地上部总RNA提取结果第22-23页
     ·LcPIP基因全长cDNA的克隆和序列分析第23-30页
     ·LcLHP基因全长cDNA的克隆和序列分析第30-35页
   ·讨论第35-36页
     ·羊草LcPIP基因的克隆及生物信息学分析第35页
     ·羊草LcLHP基因的克隆与生物学功能预测分析第35-36页
   ·本章小结第36-37页
3 羊草基因表达特性分析第37-51页
   ·试验材料第37-38页
   ·试验试剂第38-39页
     ·原核表达试剂第38页
     ·免疫印迹试剂第38-39页
   ·试验方法第39-43页
     ·半定量RT-PCR分析基因的表达特性第39-40页
     ·原核表达载体的构建第40-42页
     ·重组蛋白的诱导表达与检测第42-43页
   ·试验结果第43-47页
     ·LcLHP基因在羊草叶片中表达的半定量分析第43-44页
     ·LcPIP基因在羊草叶片中表达的半定量分析第44页
     ·LcLHP原核表达载体构建第44-46页
     ·LcPIP原核表达载体构建第46-47页
   ·讨论第47-50页
     ·羊草LcLHP和LcPIP基因RT-PCR表达谱分析第47-49页
     ·羊草LcLHP和LcPIP目的蛋白原核表达载体构建和诱导表达分析第49-50页
   ·本章小结第50-51页
结论第51-52页
参考文献第52-56页
攻读学位期间发表的学术论文第56-57页
致谢第57-58页

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