| 摘要 | 第1-5页 |
| Abstract | 第5-9页 |
| 1 绪论 | 第9-17页 |
| ·Oct4基因的概述 | 第9-11页 |
| ·转录因子Oct4的结构 | 第9页 |
| ·Oct4的表达及生物学功能 | 第9-10页 |
| ·Oct4的表达调控 | 第10-11页 |
| ·体细胞诱导重编程 | 第11-14页 |
| ·体细胞重编程 | 第11页 |
| ·诱导体细胞重编程的方法 | 第11-12页 |
| ·诱导因子 | 第12-14页 |
| ·启动子与报告基因 | 第14-15页 |
| ·启动子的结构和功能 | 第14-15页 |
| ·报告基因 | 第15页 |
| ·成纤维细胞 | 第15-16页 |
| ·成纤维细胞的来源及特点 | 第15-16页 |
| ·成纤维细胞的应用 | 第16页 |
| ·研究目的及意义 | 第16-17页 |
| 2 绵羊Oct4启动子真核表达载体的构建 | 第17-31页 |
| ·实验材料 | 第17-21页 |
| ·实验动物、组织和细胞 | 第17页 |
| ·实验菌种 | 第17页 |
| ·载体信息 | 第17页 |
| ·实验试剂配制 | 第17-20页 |
| ·实验仪器设备 | 第20-21页 |
| ·实验方法 | 第21-26页 |
| ·绵羊Oct4启动子的克隆与序列分析 | 第21-23页 |
| ·绵羊Oct4启动子真核表达载体的构建 | 第23-24页 |
| ·绵羊Oct4启动子真核表达载体的鉴定 | 第24-25页 |
| ·真核表达载体绵羊Oct4启动子的活性检测 | 第25-26页 |
| ·实验结果 | 第26-29页 |
| ·绵羊Oct4启动子的扩增 | 第26页 |
| ·绵羊Oct4启动子克隆载体S-Oct4-pMD18-simple的鉴定 | 第26-27页 |
| ·绵羊Oct4启动子的序列分析 | 第27页 |
| ·绵羊Oct4启动子真核表达载体的鉴定 | 第27-28页 |
| ·绵羊Oct4启动子在三种细胞中表达活性的检测 | 第28-29页 |
| ·绵羊Oct4启动子在胚胎中的荧光检测 | 第29页 |
| ·讨论 | 第29-30页 |
| ·本章小结 | 第30-31页 |
| 3 绵羊皮肤成纤维细胞的转染、筛选与鉴定 | 第31-40页 |
| ·实验材料 | 第31-32页 |
| ·实验动物 | 第31页 |
| ·实验试剂配制 | 第31-32页 |
| ·实验方法 | 第32-35页 |
| ·绵羊皮肤成纤维细胞的原代培养 | 第32页 |
| ·G418筛选浓度的确定 | 第32页 |
| ·绵羊皮肤成纤维细胞的转染 | 第32-33页 |
| ·转基因绵羊皮肤成纤维细胞的筛选 | 第33页 |
| ·转基因细胞系的鉴定 | 第33-35页 |
| ·转基因细胞的冷冻保存及复苏与检测 | 第35页 |
| ·实验结果 | 第35-38页 |
| ·原代绵羊皮肤成纤维细胞的生长形态 | 第35页 |
| ·最适G418筛选 | 第35-36页 |
| ·转基因细胞的生物学特征 | 第36-37页 |
| ·转基因细胞冷冻复苏后的生物学性状检测 | 第37-38页 |
| ·讨论 | 第38页 |
| ·本章小结 | 第38-40页 |
| 结论 | 第40-41页 |
| 参考文献 | 第41-44页 |
| 附录 | 第44-46页 |
| 攻读学位期间发表的学术论文 | 第46-47页 |
| 致谢 | 第47-48页 |