| 摘要 | 第1-10页 |
| Abstract | 第10-12页 |
| 1 前言 | 第12-20页 |
| ·粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子的研究进展 | 第12-16页 |
| ·粒细胞-巨噬细胞刺激因子的来源及产生 | 第12-13页 |
| ·粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子基因特征及其生物学活性 | 第13-14页 |
| ·粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子的作用机制 | 第14页 |
| ·粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子的免疫佐剂效应 | 第14-16页 |
| ·乳酸菌及其系统研究进展 | 第16-19页 |
| ·乳酸菌的益生作用 | 第16-17页 |
| ·乳酸菌的免疫原性和佐剂性 | 第17页 |
| ·乳酸菌分泌表达载体的应用 | 第17-18页 |
| ·乳酸杆菌表达系统的发展前景 | 第18-19页 |
| ·研究目的与意义 | 第19-20页 |
| 2 材料与方法 | 第20-33页 |
| ·材料 | 第20-22页 |
| ·病毒与细胞 | 第20页 |
| ·质粒、菌种与疫苗 | 第20页 |
| ·抗体制剂 | 第20页 |
| ·实验动物 | 第20页 |
| ·引物 | 第20页 |
| ·主要分子生物学试剂 | 第20-21页 |
| ·培养基 | 第21页 |
| ·主要溶液配制 | 第21页 |
| ·主要实验仪器与设备 | 第21-22页 |
| ·实验方法 | 第22-33页 |
| ·猪粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子基因的获得 | 第22-24页 |
| ·pGM-CSF 基因在大肠杆菌中的构建 | 第24-25页 |
| ·pGM-CSF 基因在大肠杆菌中的可溶性表达 | 第25-26页 |
| ·pGM-CSF 重组干酪乳杆菌表达系统构建 | 第26-28页 |
| ·pGM-CSF 基因在重组干酪乳杆菌中的表达 | 第28-29页 |
| ·猪粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子的生物学活性检测 | 第29-30页 |
| ·干酪乳杆菌表达 pGM-CSF 作为免疫佐剂的效果分析 | 第30-33页 |
| 3 结果 | 第33-46页 |
| ·目的基因 pGM-CSF 的克隆 | 第33-34页 |
| ·PCR 扩增 pGM-CSF 基因结果 | 第33页 |
| ·重组质粒 pMD18-T-pGM-CSF 的鉴定结果 | 第33-34页 |
| ·表达 pGM-CSF 重组大肠杆菌的鉴定结果 | 第34-35页 |
| ·pGM-CSF 在大肠杆菌中的表达及活性分析 | 第35-37页 |
| ·SDS-PAGE 分析 | 第35页 |
| ·可溶性表达产物的分析结果 | 第35-36页 |
| ·可溶性表达产物的纯化结果 | 第36-37页 |
| ·重组干酪乳杆菌表达系统的鉴定结果 | 第37-38页 |
| ·重组干酪乳杆菌的诱导及表达 | 第38-39页 |
| ·表达产物的 Western blot 鉴定 | 第38页 |
| ·重组干酪乳杆菌的分泌表达鉴定结果 | 第38-39页 |
| ·pGM-CSF 生物学活性检测的结果 | 第39-42页 |
| ·MTT 法检测 pGM-CSF 对 PBMC 的增殖效果 | 第39-41页 |
| ·pGM-CSF 对单核细胞增殖效果的检测 | 第41页 |
| ·集落形成试验结果 | 第41-42页 |
| ·pGM-CSF 对疫苗免疫应答的影响 | 第42-46页 |
| ·血清中特异性抗体 IgG 的测定 | 第42-43页 |
| ·脾淋巴细胞增殖试验结果 | 第43-44页 |
| ·细胞中和试验结果 | 第44页 |
| ·攻毒保护性试验 | 第44-46页 |
| 4 讨论 | 第46-50页 |
| ·不同质粒系统对猪粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子的表达 | 第46-47页 |
| ·体外表达的猪粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子生物活性分析 | 第47-48页 |
| ·猪粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子对疫苗的免疫增强效应 | 第48-50页 |
| 5 结论 | 第50-51页 |
| 致谢 | 第51-52页 |
| 参考文献 | 第52-57页 |
| 附录 | 第57-60页 |
| 攻读硕士学位期间发表的学术论文 | 第60页 |
