| 摘要 | 第1-10页 |
| Abstract | 第10-12页 |
| 1 前言 | 第12-19页 |
| ·乳酸菌及其相关特性 | 第12-14页 |
| ·乳酸菌的分类及主要特性 | 第12-13页 |
| ·乳酸菌是外源蛋白表达的理想宿主 | 第13页 |
| ·乳酸菌是良好的抗原表达及传递系统 | 第13-14页 |
| ·乳酸菌表达载体 | 第14-16页 |
| ·乳酸菌表达载体的元件 | 第15页 |
| ·乳酸菌表达载体的类型 | 第15-16页 |
| ·短乳杆菌 S 层蛋白的研究进展 | 第16-18页 |
| ·S-层蛋白的结构 | 第16-17页 |
| ·乳酸菌的 S 层蛋白 | 第17页 |
| ·短乳杆菌 S-层蛋白启动子 | 第17-18页 |
| ·本研究的意义及目的 | 第18-19页 |
| 2 材料与方法 | 第19-36页 |
| ·材料 | 第19-21页 |
| ·质粒和菌种 | 第19页 |
| ·主要试剂 | 第19页 |
| ·引物 | 第19-20页 |
| ·主要试验仪器与设备 | 第20-21页 |
| ·试验方法 | 第21-36页 |
| ·目的基因片段的获得 | 第21-27页 |
| ·重组乳酸菌表达载体的构建 | 第27-31页 |
| ·重组乳酸菌表达蛋白的鉴定 | 第31-32页 |
| ·组成型启动子的表达效果 | 第32-34页 |
| ·发酵罐的条件摸索 | 第34-36页 |
| 3 结果与分析 | 第36-54页 |
| ·目的基因 SlpA 启动子的 PCR 扩增结果 | 第36页 |
| ·目的基因 N 的 PCR 扩增结果 | 第36-37页 |
| ·目的基因 SLSF 的 PCR 扩增结果 | 第37-38页 |
| ·重组质粒 pPG612-SlpA 的鉴定 | 第38页 |
| ·重组乳酸菌的鉴定结果 | 第38-42页 |
| ·重组干酪乳杆菌的鉴定结果 | 第38-39页 |
| ·重组植物乳杆菌的鉴定结果 | 第39-40页 |
| ·重组副干酪乳杆菌的鉴定结果 | 第40-41页 |
| ·重组乳酸乳球菌的鉴定结果 | 第41-42页 |
| ·重组乳酸菌蛋白表达的鉴定 | 第42-45页 |
| ·短乳杆菌 S 层启动子启动表达效果的评价 | 第45-49页 |
| ·不同培养时间对启动子表达效果的影响 | 第45-46页 |
| ·不同宿主对启动子表达效果的影响 | 第46-48页 |
| ·S 层启动子在乳酸菌中表达量的相对定量评价 | 第48-49页 |
| ·发酵罐培养条件下启动子的活性评价 | 第49-54页 |
| ·发酵罐培养条件下的启动子活性与静止培养下的比较 | 第49-51页 |
| ·发酵罐培养条件下不同 pH 值对启动子活性的影响 | 第51-54页 |
| 4 讨论 | 第54-57页 |
| ·利用 S 层蛋白组成型启动子改造乳酸菌表达载体的设计思路 | 第54-55页 |
| ·外源蛋白的表达产物的运输与定位 | 第55页 |
| ·不同培养时间及不同种属的宿主菌对表达量的影响 | 第55页 |
| ·不同培养方式、培养条件对 S 层启动子活性的影响 | 第55-56页 |
| ·短乳杆菌 S 层启动子的应用与展望 | 第56-57页 |
| 5 结论 | 第57-58页 |
| 致谢 | 第58-59页 |
| 参考文献 | 第59-66页 |
| 附录 | 第66-71页 |
| 攻读硕士学位期间发表的学术论文 | 第71页 |
