基因组改组技术选育木聚糖酶高产菌株
| 摘要 | 第1-3页 |
| Abstract | 第3-5页 |
| 中文文摘 | 第5-7页 |
| 目录 | 第7-13页 |
| 绪论 | 第13-31页 |
| 1 木聚糖酶概述 | 第13-21页 |
| ·木聚糖 | 第13页 |
| ·木聚糖酶 | 第13页 |
| ·木聚糖酶的特性 | 第13-14页 |
| ·木聚糖酶的诱导性 | 第13-14页 |
| ·木聚糖酶的酶学性质 | 第14页 |
| ·木聚糖酶的测定方法 | 第14-16页 |
| ·定性测定 | 第14页 |
| ·定量测定 | 第14-16页 |
| ·木聚糖酶的应用 | 第16-17页 |
| ·木聚糖酶在纸浆造纸工业中的应用 | 第16页 |
| ·木聚糖酶在食品工业中的应用 | 第16-17页 |
| ·木聚糖酶在动物饲料中的应用 | 第17页 |
| ·木聚糖酶在其他方面的应用 | 第17页 |
| ·微生物木聚糖酶主要产生菌 | 第17-19页 |
| ·曲霉产木聚糖酶 | 第18-19页 |
| ·木霉产木聚糖酶 | 第19页 |
| ·细菌产木聚糖酶 | 第19页 |
| ·微生物木聚糖酶的菌种选育 | 第19-21页 |
| ·传统诱变育种 | 第20页 |
| ·基因工程育种 | 第20-21页 |
| 2 基因组改组育种技术 | 第21-26页 |
| ·基因组改组技术的产生和原理 | 第21-22页 |
| ·基因组改组技术的特点和优势 | 第22-23页 |
| ·基因组改组技术的应用 | 第23-24页 |
| ·基因组改组技术的技术路线 | 第24-26页 |
| ·原生质体制备 | 第24页 |
| ·原生质体再生 | 第24-25页 |
| ·原生质体融合 | 第25页 |
| ·融合子的检出 | 第25-26页 |
| ·基因组改组技术的展望 | 第26页 |
| 3 木聚糖酶发酵工艺优化 | 第26-28页 |
| ·木聚糖酶的发酵方法 | 第26-27页 |
| ·数学统计学方法在微生物发酵优化中的运用 | 第27-28页 |
| ·Plackett-Burman试验设计 | 第27页 |
| ·响应面试验设计 | 第27-28页 |
| 4 本论文研究内容和目的意义 | 第28-31页 |
| ·本课题的研究内容 | 第28页 |
| ·论文选题的依据意义 | 第28-31页 |
| 第一章 传统诱变选育构建米曲霉木聚糖酶正突变库 | 第31-43页 |
| 1 材料与方法 | 第32-36页 |
| ·材料 | 第32-33页 |
| ·菌种 | 第32页 |
| ·主要试剂 | 第32页 |
| ·仪器 | 第32-33页 |
| ·培养基 | 第33页 |
| ·玉米芯木聚糖 | 第33页 |
| ·方法 | 第33-36页 |
| ·酶活测定方法 | 第33-35页 |
| ·诱变方法 | 第35-36页 |
| ·高产木聚糖菌株的筛选 | 第36页 |
| 2 结果与分析 | 第36-41页 |
| ·出发菌株的产酶能力 | 第36-37页 |
| ·紫外-氯化锂复合诱变 | 第37-39页 |
| ·紫外诱变剂量的选择 | 第37页 |
| ·氯化锂浓度的选择 | 第37-38页 |
| ·紫外-氯化锂复合诱变筛选结果 | 第38-39页 |
| ·微波诱变 | 第39-40页 |
| ·微波诱变剂量的选择 | 第39页 |
| ·微波诱变筛选结果 | 第39-40页 |
| ·不同诱变方法的比较 | 第40-41页 |
| 3 小结与讨论 | 第41-43页 |
| 第二章 米曲霉原生质体制备和再生条件研究 | 第43-53页 |
| 1 材料与方法 | 第43-44页 |
| ·材料 | 第43-44页 |
| ·菌株 | 第43页 |
| ·主要药品及酶液配制 | 第43页 |
| ·主要仪器 | 第43页 |
| ·培养基 | 第43-44页 |
| ·实验方法 | 第44页 |
| ·孢子悬液的制备 | 第44页 |
| ·原生质体的制备与再生 | 第44页 |
| 2 结果与分析 | 第44-50页 |
| ·孢子萌发时间的确定 | 第44-45页 |
| ·酶液组成的选择 | 第45-46页 |
| ·酶解时间的选择 | 第46-47页 |
| ·酶解温度的选择 | 第47-48页 |
| ·渗透压稳定剂的选择 | 第48-49页 |
| ·再生培养基的选择 | 第49-50页 |
| ·米曲霉原生质体的形态观察 | 第50页 |
| 3 小结与讨论 | 第50-53页 |
| 第三章 基因组改组选育木聚糖酶高产菌株 | 第53-65页 |
| 1 材料与方法 | 第53-55页 |
| ·实验材料 | 第53-54页 |
| ·菌株 | 第53页 |
| ·主要药品与试剂 | 第53页 |
| ·主要仪器 | 第53页 |
| ·培养基 | 第53-54页 |
| ·实验方法 | 第54-55页 |
| ·米曲霉孢子原生质体灭活标记 | 第54页 |
| ·米曲霉原生质体融合 | 第54-55页 |
| ·基因组改组技术选育高产木聚糖酶菌株 | 第55页 |
| ·改组菌株与原始菌株的比较 | 第55页 |
| ·改组菌株的稳定性试验 | 第55页 |
| 2 结果与分析 | 第55-63页 |
| ·原生质体灭活研究 | 第55-57页 |
| ·紫外灭活 | 第55-56页 |
| ·热灭活 | 第56-57页 |
| ·微波灭活 | 第57页 |
| ·原生质体融合条件的选择 | 第57-60页 |
| ·灭活方式的选择 | 第57-58页 |
| ·PEG浓度的选择 | 第58页 |
| ·融合时间的选择 | 第58-59页 |
| ·融合温度的选择 | 第59页 |
| ·融合pH的选择 | 第59-60页 |
| ·Ca~(2+)浓度的选择 | 第60页 |
| ·基因组改组技术选育高产木聚糖酶菌株 | 第60-62页 |
| ·改组菌株与原始菌株发酵性能比较 | 第62-63页 |
| ·改组菌株C-516的稳定性实验 | 第63页 |
| 3 小结与讨论 | 第63-65页 |
| 第四章 米曲霉C-516产木聚糖酶发酵优化 | 第65-81页 |
| 1 材料与方法 | 第65-66页 |
| ·实验材料 | 第65页 |
| ·菌种 | 第65页 |
| ·培养基 | 第65页 |
| ·实验方法 | 第65-66页 |
| ·菌种培养方法 | 第65页 |
| ·木聚糖酶测定方法 | 第65-66页 |
| ·培养基成分优化 | 第66页 |
| ·发酵条件优化 | 第66页 |
| 2 结果与分析 | 第66-79页 |
| ·发酵培养基单因素优化 | 第66-71页 |
| ·碳源对产酶的影响 | 第66-67页 |
| ·复合碳源比例对产酶的影响 | 第67-68页 |
| ·总碳源浓度对产木聚糖酶的影响 | 第68-69页 |
| ·氮源对产酶的影响 | 第69页 |
| ·氮源浓度对产酶的影响 | 第69-70页 |
| ·初始pH对产酶的影响 | 第70-71页 |
| ·PLACKETT-BURMAN实验设计 | 第71-72页 |
| ·应面试验设计 | 第72-76页 |
| ·响应面试验设计与结果 | 第72-73页 |
| ·二次响应面回归模型的建立 | 第73-75页 |
| ·最优培养基成分的确定和验证 | 第75-76页 |
| ·发酵条件优化 | 第76-79页 |
| ·发酵温度对产酶的影响 | 第76-77页 |
| ·接种量对产酶的影响 | 第77-78页 |
| ·装液量对产酶的影响 | 第78-79页 |
| ·发酵时间对产酶的影响 | 第79页 |
| 3 小结与讨论 | 第79-81页 |
| 第五章 结论与展望 | 第81-85页 |
| 1 研究结论 | 第81-82页 |
| ·传统诱变选育构建米曲霉木聚糖酶正突变库 | 第81页 |
| ·米曲霉原生质体制备和再生条件的研究 | 第81页 |
| ·基因组改组技术选育木聚糖酶高产菌株 | 第81页 |
| ·米曲霉原生质体融合的最佳条件 | 第81页 |
| ·三轮基因组改组 | 第81页 |
| ·改组菌株发酵优化 | 第81-82页 |
| ·培养基组分和培养条件的单因素优化 | 第81-82页 |
| ·Plackett-Burman以及响应面实验 | 第82页 |
| ·实验总流程图 | 第82页 |
| 2 展望 | 第82-85页 |
| 参考文献 | 第85-93页 |
| 攻读学位期间承担的科研任务与主要成果 | 第93-95页 |
| 致谢 | 第95-97页 |
| 个人简历 | 第97-98页 |
