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产丙酮酸棒状杆菌的发现、生物学特性及应用性研究

摘要第1-10页
ABSTRACT第10-20页
第一章 绪论第20-38页
   ·微生物与食品第20-24页
     ·食品安全与微生物第20-21页
     ·微生物在食品工业中的应用第21-23页
       ·氨基酸合成第21-22页
       ·代谢生产丙酮酸第22页
       ·发酵乳制品第22-23页
       ·其它应用第23页
     ·常用于生物发酵产业的研究方法第23-24页
     ·棒状杆菌属第24-35页
     ·概述第24-25页
     ·鉴定、分类方法第25-28页
     ·致病性第28-30页
       ·对人类致病第28-29页
       ·对动植物致病第29-30页
     ·非致病性棒状杆菌的工业用途第30-33页
       ·生产氨基酸第30-31页
       ·合成糖分第31-32页
       ·熟成奶酪第32页
       ·用于生物表面活性剂第32-33页
       ·作为重要工程菌促进分子生物学发展第33页
     ·常用于棒状杆菌属功能研究和改造的分子生物学技术第33-35页
       ·基因突变与重组第33-35页
       ·基因组测序第35页
       ·其它分子生物学手段第35页
   ·本研究的目的和立题依据第35-36页
     ·研究目的第35-36页
     ·立题依据第36页
   ·研究内容和技术路线第36-38页
     ·研究内容第36页
     ·技术路线第36-38页
第二章 棒状杆菌新菌种的鉴定第38-60页
   ·材料与方法第38-45页
     ·材料第38-40页
       ·标本与菌种第38页
       ·主要试剂及培养基第38-39页
       ·主要溶液第39-40页
       ·主要仪器第40页
     ·研究方法第40-45页
       ·一般生物学特点鉴定第40-42页
         ·培养特性第40-41页
         ·染色特性第41页
         ·生化特性第41页
         ·抗药性研究第41-42页
       ·检测胞壁脂肪酸第42页
       ·16S rRNA和部分rpo B基因序列分析第42-45页
         ·细菌基因组DNA的提取第42-43页
         ·PCR分别扩增16S rRNA和部分rpo B基因第43页
         ·测序PCR的操作及产物纯化第43-44页
         ·基因序列分析第44页
         ·基因组GC含量检测及相近菌种间DNA杂交试验第44-45页
   ·结果第45-55页
     ·一般生物学特点第45-55页
       ·培养特性第45页
       ·染色特点第45-46页
       ·生化反应特点第46-47页
       ·耐药检测结果第47页
       ·胞壁脂肪酸组成第47-48页
       ·16S rRNA基因与部分rpo B基因扩增结果第48-49页
       ·16S rRNA基因测序及比对结果第49-52页
       ·部分rpo B基因测序及比对结果第52-55页
       ·WAL19168~T菌GC含量及与相近菌种间DNA杂交结果第55页
   ·讨论第55-57页
   ·小结第57-60页
第三章 新需脂性棒状杆菌应用价值的探讨第60-74页
   ·材料与方法第60-64页
     ·材料第61-62页
       ·菌种第61页
       ·主要试剂及培养基第61页
       ·液体培养基第61页
       ·主要仪器第61-62页
     ·研究方法第62-64页
       ·单糖发酵试验第62页
       ·发酵葡萄糖后终产物的检测第62-63页
       ·地沟油培养基的效果检测第63-64页
         ·各种培养基的无菌检测第63页
         ·各种培养基培养棒状杆菌的效果比较第63页
         ·各种培养基培养其它细菌的效果比较第63页
         ·新菌种培养时最佳地沟油浓度的确定第63-64页
       ·统计学分析第64页
   ·结果第64-68页
     ·单糖发酵试验第64-65页
     ·发酵葡萄糖后终产物的检测第65页
     ·各种培养基的无菌检测第65页
     ·各种培养基培养棒状杆菌的效果比较第65-67页
     ·各种培养基培养其它细菌的效果比较第67-68页
     ·新菌种培养时最佳地沟油浓度的确定第68页
   ·讨论第68-73页
   ·小结第73-74页
第四章 产丙酮酸棒状杆菌的致病性研究第74-92页
   ·材料与方法第75-82页
     ·材料第75-76页
       ·菌种第75页
       ·主要试剂及培养基第75页
       ·主要溶液第75页
       ·主要仪器第75-76页
     ·研究方法第76-82页
       ·既往标本中棒状杆菌分离培养情况的调查第76页
       ·QRT-PCR检测第76-80页
         ·标本总DNA的提取第76-77页
         ·引物、探针的设计第77-78页
         ·引物、探针特异性的RT-PCR检测第78-79页
           ·细菌基因组DNA的提取第78页
           ·以RT-PCR法检测引物、探针的特异性第78-79页
         ·标准曲线的绘制第79页
         ·QRT-PCR检测效果的确定第79页
         ·QRT-PCR检测标本第79-80页
       ·产丙酮酸棒状杆菌带毒状况的调查第80-82页
         ·对流电泳法检测白喉毒素第80-81页
         ·PCR法检测白喉毒素基因第81-82页
   ·结果第82-86页
     ·既往标本中棒状杆菌的分离培养情况第82-83页
     ·引物、探针的特异性第83-84页
     ·标准曲线及其工作效率第84-85页
     ·临床标本的QRT-PCR检测结果第85-86页
     ·对流电泳法检测白喉毒素第86页
     ·白喉毒素基因的检测结果第86页
   ·讨论第86-89页
   ·小结第89-92页
第五章 产丙酮酸棒状杆菌可调节DC2.4细胞IL-6、IL-12的转录及其膜表面MHCII类分子的表达第92-104页
   ·材料与方法第92-97页
     ·材料第92-94页
       ·菌种与细胞系第92-93页
       ·主要试剂及培养基第93页
       ·主要溶液第93页
       ·主要仪器第93-94页
     ·研究方法第94-97页
       ·细菌的培养及灭活处理第94页
       ·QRT-PCR法检测IL-6、12编码基因的转录第94-96页
         ·细菌与DC2.4细胞的共培养第94页
         ·提取细胞总RNA第94-95页
         ·逆转录PCR法获取细胞cDNA第95页
         ·QRT-PCR扩增细胞因子IL-6和IL-12第95-96页
       ·流式细胞术检测DC2.4细胞相关膜表面分子的表达第96-97页
       ·统计学处理第97页
   ·结果第97-99页
     ·细菌的培养及灭活处理第97页
     ·QRT-PCR检测结果第97-98页
     ·流式细胞术检测结果第98-99页
   ·讨论第99-102页
   ·小结第102-104页
第六章 主要结论及展望第104-108页
   ·主要结论第104页
   ·获得的创新点第104-105页
   ·展望第105-108页
参考文献第108-118页
致谢第118-120页
在读期间已发表和待发表的论文第120-122页
其它成果第122页

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