| 摘要 | 第1-8页 |
| Abstract | 第8-10页 |
| 缩略表(Abbreviation) | 第10-12页 |
| 1 文章综述 | 第12-20页 |
| ·PRRS概述 | 第12页 |
| ·PRRSV的基因结构及蛋白质 | 第12-14页 |
| ·NF-κB信号通路 | 第14-15页 |
| ·热休克蛋白的简介 | 第15-20页 |
| ·Hsp90家族 | 第16-17页 |
| ·Hsp70家族 | 第17-19页 |
| ·小Hsp家族 | 第19-20页 |
| 2 研究目的与意义 | 第20-21页 |
| 3 材料方法 | 第21-31页 |
| ·实验材料 | 第21-25页 |
| ·毒株、细胞及菌株 | 第21页 |
| ·质粒和引物 | 第21-22页 |
| ·主要相关试剂 | 第22页 |
| ·细胞培养基的配制 | 第22-23页 |
| ·相关试剂及缓冲液的配制 | 第23-25页 |
| ·蚀斑实验相关试剂的配制 | 第23-24页 |
| ·聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)缓冲液及相关试剂 | 第24页 |
| ·western blotting缓冲液及试剂 | 第24-25页 |
| ·实验方法 | 第25-31页 |
| ·PAM分离 | 第25页 |
| ·病毒扩增 | 第25页 |
| ·抑制剂的配制 | 第25-26页 |
| ·抑制剂的细胞毒性实验 | 第26页 |
| ·质粒的制备 | 第26页 |
| ·细胞的瞬时转染(Lipofectamine 2000介导的转染法) | 第26-27页 |
| ·双荧光素酶实验 | 第27页 |
| ·病毒滴度的测定 | 第27-28页 |
| ·TCID_(50) | 第27页 |
| ·蚀斑实验 | 第27-28页 |
| ·细胞样品RNA的提取 | 第28页 |
| ·cDNA的合成 | 第28页 |
| ·相对荧光定量PCR | 第28-29页 |
| ·Western blotting实验 | 第29-31页 |
| ·蛋白样品的制备 | 第29页 |
| ·SDS-PAGE电泳 | 第29-30页 |
| ·Western blotting检测 | 第30-31页 |
| 4 结果分析 | 第31-45页 |
| ·PRRSV感染对Hsp90β表达的影响 | 第31-32页 |
| ·Hsp90特异性抑制剂17-AAG对Marc-145细胞的毒性作用 | 第32页 |
| ·17-AAG处理Marc-145细胞对PRRSV增殖的影响 | 第32-34页 |
| ·17-AAG处理Marc-145细胞对Hsp90β表达的影响 | 第34-35页 |
| ·17-AAG抑制PRRSV诱导的Hsp90β表达上调 | 第35-36页 |
| ·17-AAG(5μM)对PRRSV早期增殖的影响 | 第36-37页 |
| ·不同时间点,17-AAG对PRRSV增殖的影响 | 第37-38页 |
| ·干扰Marc-145细胞的Hsp90β对PRRSV增殖的影响 | 第38-40页 |
| ·17-AAG对PRRSV非结构蛋白表达的影响 | 第40-41页 |
| ·17-AAG对NF-κB信号通路的影响 | 第41-43页 |
| ·PAM上Hsp90对PRRSV增殖的影响 | 第43-45页 |
| 5 讨论与结论 | 第45-48页 |
| ·讨论 | 第45-47页 |
| ·结论 | 第47-48页 |
| 参考文献 | 第48-55页 |
| 致谢 | 第55页 |
