摘要 | 第1-8页 |
Abstract | 第8-10页 |
缩略语表(Abbreviation) | 第10-12页 |
1 文章综述 | 第12-20页 |
·PRRSV简介 | 第12-14页 |
·天然免疫简介 | 第14-15页 |
·IFITM简介 | 第15-16页 |
·IFITM的功能 | 第16-20页 |
·IFITM家族参与细胞粘着、分化、增殖 | 第17页 |
·IFITM家族具有抗肿瘤的作用 | 第17页 |
·IFITM家族参与疾病的引发过程 | 第17-18页 |
·IFITM家族的抗病毒作用 | 第18-20页 |
2 研究目的与意义 | 第20-21页 |
3 材料与方法 | 第21-33页 |
·实验材料 | 第21-25页 |
·菌株、细胞、毒株 | 第21页 |
·引物、载体 | 第21-22页 |
·主要试剂 | 第22页 |
·各种试剂的配制 | 第22-25页 |
·试验方法 | 第25-33页 |
·DH5a感受态细胞的制备 | 第25页 |
·PRRSV WUH3病毒的培养与收集 | 第25页 |
·基因预测 | 第25-26页 |
·RT-PCR扩增目的基因 | 第26-27页 |
·PCR产物或酶切产物的电泳检测 | 第27页 |
·PCR产物或酶切产物回收与纯化 | 第27页 |
·PCR产物与载体的酶切反应 | 第27页 |
·目的片段与相应载体的连接 | 第27-28页 |
·连接产物的转化 | 第28页 |
·质粒的小量制备和大提制备 | 第28页 |
·重组质粒(阳性质粒)的鉴定及定量 | 第28页 |
·转染 | 第28页 |
·DAPI核染色 | 第28-29页 |
·猪IFITM在PK-15细胞,293细胞中的定位,以及PRRSV对猪IFITM细胞定位的影响 | 第29页 |
·瞬时表达猪IFITM观察其对PRRSV增殖的影响 | 第29-30页 |
·空斑 | 第30页 |
·RNA的提取及逆转录PCR | 第30页 |
·绝对定量PCR | 第30-31页 |
·相对定量PCR | 第31-32页 |
·统计学方法 | 第32-33页 |
4 结果和分析 | 第33-45页 |
·猪IFITM基因预测、克隆、序列分析以及进化树的绘制 | 第33-38页 |
·猪IFITM基因预测、RT-PCR扩增与克隆 | 第33-34页 |
·猪IFITM的序列分析及进化树绘制 | 第34-38页 |
·猪IFITM的真核表达及Western blotting鉴定分析 | 第38-39页 |
·猪IFITM的亚细胞定位 | 第39-41页 |
·猪IFITM与PRRSV的相互作用 | 第41-45页 |
·PRRSV感染不改变猪IFITM在Marc-145细胞中的定位 | 第41-42页 |
·猪IFITM抑制PRRSV的增殖 | 第42-43页 |
·PRRSV感染PAM细胞上调猪IFITM的表达 | 第43-45页 |
5 讨论与结论 | 第45-50页 |
·讨论 | 第45-49页 |
·猪IFITM基因家族的克隆、序列分析及其进化树绘制 | 第45-46页 |
·猪IFITM家族的亚细胞定位及真核表达 | 第46-47页 |
·猪IFITM与PRRSV的相互作用 | 第47-49页 |
·结论 | 第49-50页 |
参考文献 | 第50-57页 |
致谢 | 第57页 |