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猪IFITM家族基因的克隆及其对猪繁殖与呼吸综合征病毒增殖的影响

摘要第1-8页
Abstract第8-10页
缩略语表(Abbreviation)第10-12页
1 文章综述第12-20页
   ·PRRSV简介第12-14页
   ·天然免疫简介第14-15页
   ·IFITM简介第15-16页
   ·IFITM的功能第16-20页
     ·IFITM家族参与细胞粘着、分化、增殖第17页
     ·IFITM家族具有抗肿瘤的作用第17页
     ·IFITM家族参与疾病的引发过程第17-18页
     ·IFITM家族的抗病毒作用第18-20页
2 研究目的与意义第20-21页
3 材料与方法第21-33页
   ·实验材料第21-25页
     ·菌株、细胞、毒株第21页
     ·引物、载体第21-22页
     ·主要试剂第22页
     ·各种试剂的配制第22-25页
   ·试验方法第25-33页
     ·DH5a感受态细胞的制备第25页
     ·PRRSV WUH3病毒的培养与收集第25页
     ·基因预测第25-26页
     ·RT-PCR扩增目的基因第26-27页
     ·PCR产物或酶切产物的电泳检测第27页
     ·PCR产物或酶切产物回收与纯化第27页
     ·PCR产物与载体的酶切反应第27页
     ·目的片段与相应载体的连接第27-28页
     ·连接产物的转化第28页
     ·质粒的小量制备和大提制备第28页
     ·重组质粒(阳性质粒)的鉴定及定量第28页
     ·转染第28页
     ·DAPI核染色第28-29页
     ·猪IFITM在PK-15细胞,293细胞中的定位,以及PRRSV对猪IFITM细胞定位的影响第29页
     ·瞬时表达猪IFITM观察其对PRRSV增殖的影响第29-30页
     ·空斑第30页
     ·RNA的提取及逆转录PCR第30页
     ·绝对定量PCR第30-31页
     ·相对定量PCR第31-32页
     ·统计学方法第32-33页
4 结果和分析第33-45页
   ·猪IFITM基因预测、克隆、序列分析以及进化树的绘制第33-38页
     ·猪IFITM基因预测、RT-PCR扩增与克隆第33-34页
     ·猪IFITM的序列分析及进化树绘制第34-38页
   ·猪IFITM的真核表达及Western blotting鉴定分析第38-39页
   ·猪IFITM的亚细胞定位第39-41页
   ·猪IFITM与PRRSV的相互作用第41-45页
     ·PRRSV感染不改变猪IFITM在Marc-145细胞中的定位第41-42页
     ·猪IFITM抑制PRRSV的增殖第42-43页
     ·PRRSV感染PAM细胞上调猪IFITM的表达第43-45页
5 讨论与结论第45-50页
   ·讨论第45-49页
     ·猪IFITM基因家族的克隆、序列分析及其进化树绘制第45-46页
     ·猪IFITM家族的亚细胞定位及真核表达第46-47页
     ·猪IFITM与PRRSV的相互作用第47-49页
   ·结论第49-50页
参考文献第50-57页
致谢第57页

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