中文摘要 | 第1-8页 |
英文摘要 | 第8-11页 |
前言 | 第11-13页 |
第一章 C. tropicalis XYL1基因的克隆及序列分析 | 第13-22页 |
1. 材料与方法 | 第13-17页 |
·材料 | 第13-14页 |
·菌种 | 第13页 |
·酶制剂 | 第13页 |
·试剂盒 | 第13页 |
·培养基 | 第13页 |
·试剂 | 第13-14页 |
·引物合成及测序 | 第14页 |
·仪器设备 | 第14页 |
·方法 | 第14-17页 |
2. 结果 | 第17-20页 |
·总蛋白含量的测定 | 第17-18页 |
·C. tropicalis AY92045酶活分析 | 第18-19页 |
·C. tropicalis AY92045 XYL1的克隆 | 第19-20页 |
·生物信息学分析 | 第20页 |
3. 讨论 | 第20-22页 |
第二章 C. tropicalis XYL1基因在大肠杆菌中的的表达及蛋白纯化 | 第22-34页 |
1. 材料和方法 | 第22-28页 |
·材料 | 第22-23页 |
·设备 | 第23页 |
·方法 | 第23-28页 |
2. 结果与分析 | 第28-31页 |
·重组子的鉴定 | 第28页 |
·重组子诱导表达条件的优化 | 第28-29页 |
·融合蛋白的纯化 | 第29-30页 |
·酶切融合蛋白后再次纯化 | 第30页 |
·蛋白含量测定 | 第30-31页 |
·比酶活测定 | 第31页 |
3. 讨论 | 第31-34页 |
·表达载体的选择 | 第31-32页 |
·C. tropicalis木糖还原酶融合蛋白可溶性表达的优化 | 第32-33页 |
·C. tropicalis木糖还原酶融合蛋白的纯化 | 第33-34页 |
第三章 热带假丝酵母木糖还原酶酶动力学测定及分析 | 第34-45页 |
1. 材料和方法 | 第34-37页 |
·材料 | 第34页 |
·方法 | 第34-37页 |
2. 结果与分析 | 第37-42页 |
·NADPH标准曲线绘制 | 第37页 |
·NADH标准曲线绘制 | 第37页 |
·重组木糖还原酶基本性质研究 | 第37-39页 |
·木糖还原酶动力学参数测定 | 第39-42页 |
3. 讨论 | 第42-45页 |
·辅酶偏好性 | 第42-43页 |
·催化效率 | 第43页 |
·NaCl的影响 | 第43-44页 |
·木糖代谢工程宿主菌的选择 | 第44-45页 |
结论 | 第45-46页 |
攻读硕士学位期间发表论文 | 第46-47页 |
声明 | 第47-48页 |
致谢 | 第48-49页 |
参考文献 | 第49-51页 |
综述 | 第51-78页 |
1. 前言 | 第51页 |
2. 自然界中能够发酵木糖的微生物 | 第51-53页 |
·细菌发酵木糖 | 第52页 |
·丝状真菌发酵木糖 | 第52页 |
·酵母发酵木糖 | 第52-53页 |
3. 微生物中木糖代谢生化途径 | 第53-54页 |
4. 木糖转运系统 | 第54-55页 |
5. 酵母木糖代谢工程 | 第55-65页 |
·酵母木糖代谢工程中的酶和基因 | 第55-61页 |
·原生质体融合构建S.cerevisiae工程菌 | 第61页 |
·影响酵母工程菌发酵木糖的其它因素 | 第61-65页 |
6. 其它木糖代谢工程菌株 | 第65-66页 |
·Zymomonas mobilis | 第65页 |
·Escherjchia coli | 第65-66页 |
7. 展望 | 第66-67页 |
参考文献 | 第67-78页 |