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热带假丝酵母木糖还原酶基因(XYL1)的克隆、表达纯化及酶学性质研究

中文摘要第1-8页
英文摘要第8-11页
前言第11-13页
第一章 C. tropicalis XYL1基因的克隆及序列分析第13-22页
 1. 材料与方法第13-17页
   ·材料第13-14页
     ·菌种第13页
     ·酶制剂第13页
     ·试剂盒第13页
     ·培养基第13页
     ·试剂第13-14页
     ·引物合成及测序第14页
   ·仪器设备第14页
   ·方法第14-17页
 2. 结果第17-20页
   ·总蛋白含量的测定第17-18页
   ·C. tropicalis AY92045酶活分析第18-19页
   ·C. tropicalis AY92045 XYL1的克隆第19-20页
   ·生物信息学分析第20页
 3. 讨论第20-22页
第二章 C. tropicalis XYL1基因在大肠杆菌中的的表达及蛋白纯化第22-34页
 1. 材料和方法第22-28页
   ·材料第22-23页
   ·设备第23页
   ·方法第23-28页
 2. 结果与分析第28-31页
   ·重组子的鉴定第28页
   ·重组子诱导表达条件的优化第28-29页
   ·融合蛋白的纯化第29-30页
   ·酶切融合蛋白后再次纯化第30页
   ·蛋白含量测定第30-31页
   ·比酶活测定第31页
 3. 讨论第31-34页
   ·表达载体的选择第31-32页
   ·C. tropicalis木糖还原酶融合蛋白可溶性表达的优化第32-33页
   ·C. tropicalis木糖还原酶融合蛋白的纯化第33-34页
第三章 热带假丝酵母木糖还原酶酶动力学测定及分析第34-45页
 1. 材料和方法第34-37页
   ·材料第34页
   ·方法第34-37页
 2. 结果与分析第37-42页
   ·NADPH标准曲线绘制第37页
   ·NADH标准曲线绘制第37页
   ·重组木糖还原酶基本性质研究第37-39页
   ·木糖还原酶动力学参数测定第39-42页
 3. 讨论第42-45页
   ·辅酶偏好性第42-43页
   ·催化效率第43页
   ·NaCl的影响第43-44页
   ·木糖代谢工程宿主菌的选择第44-45页
结论第45-46页
攻读硕士学位期间发表论文第46-47页
声明第47-48页
致谢第48-49页
参考文献第49-51页
综述第51-78页
 1. 前言第51页
 2. 自然界中能够发酵木糖的微生物第51-53页
   ·细菌发酵木糖第52页
   ·丝状真菌发酵木糖第52页
   ·酵母发酵木糖第52-53页
 3. 微生物中木糖代谢生化途径第53-54页
 4. 木糖转运系统第54-55页
 5. 酵母木糖代谢工程第55-65页
   ·酵母木糖代谢工程中的酶和基因第55-61页
   ·原生质体融合构建S.cerevisiae工程菌第61页
   ·影响酵母工程菌发酵木糖的其它因素第61-65页
 6. 其它木糖代谢工程菌株第65-66页
   ·Zymomonas mobilis第65页
   ·Escherjchia coli第65-66页
 7. 展望第66-67页
 参考文献第67-78页

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