| 摘要 | 第1-7页 |
| ABSTRACT | 第7-9页 |
| 目录 | 第9-12页 |
| 正文图表目录 | 第12-14页 |
| 第一章 前言 | 第14-40页 |
| ·引言 | 第14页 |
| ·动物细胞培养技术概况 | 第14-16页 |
| ·昆虫细胞系建立技术研究进展 | 第16-28页 |
| ·昆虫细胞培养的特点 | 第16-17页 |
| ·昆虫细胞系的建立和昆虫细胞培养液的发展 | 第17-20页 |
| ·昆虫细胞系建立技术 | 第20-25页 |
| ·昆虫细胞系的特征和鉴定 | 第25-27页 |
| ·污染的避免 | 第27-28页 |
| ·昆虫脂肪体细胞系建立研究进展 | 第28-30页 |
| ·甜菜夜蛾细胞系建立研究进展 | 第30-31页 |
| ·棉铃虫细胞系建立研究进展 | 第31-33页 |
| ·昆虫细胞系的应用 | 第33-36页 |
| ·大规模生产昆虫病毒杀虫剂 | 第33页 |
| ·构建重组杆状病毒杀虫剂 | 第33-34页 |
| ·构建杆状病毒表达载体系统 | 第34-35页 |
| ·其他方面 | 第35-36页 |
| ·细胞增殖检测方法研究进展 | 第36-37页 |
| ·问题与展望——关于建立昆虫细胞系方法的讨论 | 第37-40页 |
| 第二章 材料与方法 | 第40-48页 |
| ·实验材料 | 第40-42页 |
| ·供试昆虫种类及来源 | 第40页 |
| ·供试病毒种类及来源 | 第40页 |
| ·供比较的细胞系及来源 | 第40-41页 |
| ·实验试剂 | 第41页 |
| ·耗材 | 第41-42页 |
| ·实验仪器 | 第42页 |
| ·实验方法 | 第42-48页 |
| ·原代培养过程 | 第42-43页 |
| ·传代培养方法 | 第43页 |
| ·条件培养液的制备 | 第43页 |
| ·细胞形状大小的观察和测量 | 第43页 |
| ·细胞生长曲线 | 第43-44页 |
| ·细胞核型分析 | 第44页 |
| ·DAF-PCR鉴定细胞 | 第44-45页 |
| ·细胞的冻存和复苏 | 第45页 |
| ·原代病毒种子液的制备(SeNPV，HaNPV，SpltNPV) | 第45-46页 |
| ·多角体产量的测定 | 第46页 |
| ·50%组织培养感染剂量(TCID_(50))的测定 | 第46-47页 |
| ·SeNPV活性的生物测定 | 第47页 |
| ·病毒离体传代 | 第47页 |
| ·5'-BrdU掺入法标记检测细胞增殖 | 第47-48页 |
| 第三章 结果与分析 | 第48-76页 |
| ·昆虫脂肪体细胞体外增殖方法的建立 | 第48-58页 |
| ·原代培养液的选择和确定 | 第48-49页 |
| ·原代培养材料的选择 | 第49-54页 |
| ·不同的处理对原代培养细胞体外增殖的影响 | 第54-55页 |
| ·不同处理对传代细胞体外持续增殖的影响 | 第55-58页 |
| ·昆虫脂肪体细胞体外增殖的检测及机理的初步探讨 | 第58-61页 |
| ·昆虫体内脂肪体组织细胞增殖 | 第58页 |
| ·昆虫脂肪体组织离体培养细胞增殖 | 第58-61页 |
| ·传代处理对昆虫脂肪体组织增殖细胞的影响 | 第61页 |
| ·几株昆虫脂肪体细胞系的建立、鉴定及特征 | 第61-76页 |
| ·甜菜夜蛾幼虫脂肪体细胞系的建立、鉴定及对SeNPV的敏感性 | 第61-69页 |
| ·棉铃虫幼虫脂肪体细胞系的建立、鉴定及对HaNPV的敏感性 | 第69-74页 |
| ·其它几种昆虫幼虫脂肪体细胞系建立的探索 | 第74-76页 |
| 第四章 结论与讨论 | 第76-82页 |
| ·结论 | 第76-77页 |
| ·讨论 | 第77-80页 |
| ·本研究中建立的6株甜菜夜蛾和1株棉铃虫幼虫脂肪体细胞系的意义 | 第77页 |
| ·关于原代培养过程中组织贴壁这一关键步骤的讨论 | 第77页 |
| ·从贴壁组织中游离出的细胞来源的讨论 | 第77-78页 |
| ·不同种类昆虫脂肪体组织游离出细胞的可能性 | 第78页 |
| ·原代培养不同组织材料的选择 | 第78页 |
| ·关于传代过程中细胞持续增殖的讨论 | 第78-79页 |
| ·传代细胞对病毒敏感与否的问题 | 第79页 |
| ·染色体异倍化的问题 | 第79页 |
| ·条件培养液的作用 | 第79页 |
| ·细胞培养过程中需要注意的问题——关于经验的讨论 | 第79-80页 |
| ·下一步的工作计划 | 第80-82页 |
| 参考文献 | 第82-94页 |
| 致谢 | 第94-96页 |
| 附录一 试剂配制及仪器型号 | 第96-100页 |
| 附录二 专有名词、缩写及昆虫学名 | 第100-102页 |
| 附录三 导师简介 | 第102-104页 |
| 附录四 作者在读期间发表的学术论文、申请专利情况及参加的科研项目 | 第104-105页 |
