| 中文摘要 | 第1-4页 |
| ABSTRACT | 第4-9页 |
| 前言 | 第9-10页 |
| 第一章 文献综述 | 第10-25页 |
| ·微生物利用木质纤维素发酵生产乙醇的研究 | 第10-11页 |
| ·微生物利用木糖发酵生产乙醇的研究 | 第11-18页 |
| ·天然菌株利用木糖发酵生产乙醇的研究 | 第12页 |
| ·酿酒酵母和树干毕赤酵母利用木糖发酵生产乙醇工程菌的研究 | 第12-16页 |
| ·重组酿酒酵母菌 | 第12-15页 |
| ·重组树干毕赤酵母菌 | 第15-16页 |
| ·细菌利用木糖发酵生产乙醇工程菌的研究 | 第16-18页 |
| ·重组大肠杆菌 | 第16-18页 |
| ·重组产酸克雷伯氏菌 | 第18页 |
| ·木糖发酵重组运动发酵单胞菌 | 第18-23页 |
| ·运动发酵单胞菌介绍 | 第18-19页 |
| ·木糖发酵重组运动发酵单胞菌 | 第19-23页 |
| ·德国Institute of biotechnology 的工作 | 第19-21页 |
| ·美国NREL(National Renewable Energy Laboratory)的工作 | 第21-22页 |
| ·澳大利亚University of New South Wales 的工作 | 第22-23页 |
| ·加拿大University of Toronto 的工作 | 第23页 |
| ·本课题的研究目的、内容和技术路线 | 第23-25页 |
| ·研究目的 | 第23页 |
| ·研究内容 | 第23-24页 |
| ·技术路线 | 第24-25页 |
| 第二章 实验材料与方法 | 第25-46页 |
| ·实验材料 | 第25-32页 |
| ·菌株与质粒 | 第25-26页 |
| ·主要试剂 | 第26-27页 |
| ·主要仪器设备 | 第27-28页 |
| ·培养基及常用溶液的配制 | 第28-30页 |
| ·培养基的配制 | 第28页 |
| ·常用溶液的配制 | 第28-30页 |
| ·蛋白质含量测定试剂 | 第30页 |
| ·酶活测定试剂的配制 | 第30-32页 |
| ·木糖异构酶酶活测定试剂 | 第30-31页 |
| ·木酮糖激酶酶活测定用试剂 | 第31页 |
| ·转醛醇酶酶活测定用试剂 | 第31页 |
| ·转酮醇酶酶活测定用试剂 | 第31-32页 |
| ·PCR 反应引物 | 第32页 |
| ·实验方法 | 第32-46页 |
| ·菌株的培养 | 第32-33页 |
| ·大肠杆菌的培养 | 第32页 |
| ·运动发酵单胞菌的培养 | 第32-33页 |
| ·PCR 反应 | 第33-35页 |
| ·模板的制备 | 第33页 |
| ·引物设计与合成 | 第33页 |
| ·PCR 反应体系 | 第33-35页 |
| ·酶切反应 | 第35页 |
| ·电泳分析 | 第35页 |
| ·目的条带的回收 | 第35页 |
| ·连接反应 | 第35-36页 |
| ·感受态细胞的制备 | 第36页 |
| ·E. coli 感受态细胞的制备 | 第36页 |
| ·Z. mobilis CP4 感受态细胞的制备 | 第36页 |
| ·感受态细胞的转化 | 第36-37页 |
| ·E. coli 感受态细胞的转化 | 第36-37页 |
| ·Z. mobilis CP4 感受态细胞的转化 | 第37页 |
| ·E. coli 质粒的小量提取（SDS-碱裂解法） | 第37-38页 |
| ·粗酶液的制备 | 第38页 |
| ·蛋白质浓度测定 | 第38-39页 |
| ·酶活的测定 | 第39-44页 |
| ·木糖异构酶酶活的测定 | 第39-40页 |
| ·木酮糖激酶酶活的测定 | 第40-41页 |
| ·转醛醇酶酶活的测定 | 第41-42页 |
| ·转酮醇酶酶活的测定 | 第42-44页 |
| ·Z. mobilis 生长曲线的测定 | 第44页 |
| ·发酵液分析方法 | 第44-46页 |
| ·OD 值的测定 | 第44页 |
| ·发酵液中残糖浓度的测定 | 第44页 |
| ·发酵液中乙醇浓度的测定 | 第44-46页 |
| 第三章 实验结果与讨论 | 第46-66页 |
| ·pZB21-Pgap-xylA/xylB-Peno-talB/tktA 的构建 | 第46-55页 |
| ·pUC19-tktA（change）的构建 | 第49-50页 |
| ·PCR 扩增tktA（change）基因 | 第49页 |
| ·pUC19-tktA（change）的构建 | 第49-50页 |
| ·pUC19-Peno-talB(change)的构建 | 第50-53页 |
| ·PCR 扩增Peno-talB(change)基因 | 第50-51页 |
| ·pUC19-Peno-talB(change)的构建 | 第51-53页 |
| ·pUC19-Peno-talB/tktA 的构建 | 第53-54页 |
| ·pZB21-Pgap-xylA/xylB-Peno-talB/tktA 的构建 | 第54-55页 |
| ·pZB21-Pgap-xx -Peno-tt 电穿孔转化 Z. mobilis CP4 | 第55-57页 |
| ·重组菌酶活测定 | 第57页 |
| ·重组菌1~#生长曲线的测定 | 第57-58页 |
| ·重组菌木糖生长试验 | 第58-60页 |
| ·重组菌的木糖平板生长试验 | 第58-59页 |
| ·重组菌1~#的木糖液体生长试验 | 第59-60页 |
| ·重组菌1~#发酵性能的初步评价 | 第60-64页 |
| ·分析与讨论 | 第64-66页 |
| 第四章 结论 | 第66-67页 |
| ·结论 | 第66页 |
| ·建议 | 第66-67页 |
| 符号表 | 第67-68页 |
| 参考文献 | 第68-74页 |
| 附录一 有关质粒的物理图谱 | 第74-78页 |
| 附录二 有关试验原始数据记录 | 第78-79页 |
| 附录三 tktA（change）测序结果 | 第79-80页 |
| 附录四 Peno-talB（change）测序结果 | 第80-82页 |
| 附录五 本论文所涉及的计算公式 | 第82-83页 |
| 附录六 相关色谱图 | 第83-90页 |
| 发表论文和科研情况说明 | 第90-91页 |
| 致谢 | 第91页 |
