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藻红蛋白荧光标记技术及在烟草花叶病毒检测上的应用

中文摘要第1-9页
英文摘要第9-11页
1 前言第11-25页
   ·标记免疫分析法第11-12页
   ·荧光标记免疫分析第12-15页
     ·荧光免疫分析在病毒检测中的应用第13页
     ·荧光免疫分析中的荧光标记物第13-15页
   ·藻红蛋白的基本性质第15-19页
     ·藻红蛋白的分类第15-16页
     ·藻红蛋白的分子组成及在溶液中的存在形式第16页
     ·藻红蛋白的理化性质与光谱特性第16-17页
     ·藻红蛋白的生理作用与应用研究第17-19页
       ·藻红蛋白在海藻体生理过程中的作用第17-18页
       ·藻红蛋白作为荧光探针的应用第18页
       ·藻红蛋白作为光敏剂的应用第18-19页
       ·藻红蛋白的活性药效应用第19页
   ·藻红蛋白荧光标记第19-23页
     ·藻红蛋白荧光标记的研究第19-20页
     ·藻红蛋白的荧光特性第20页
     ·藻红蛋白标记方法第20-21页
     ·蛋白质交联与交联试剂第21-22页
     ·藻红蛋白荧光标记的应用第22-23页
   ·本研究的目的和意义第23-25页
2 材料与方法第25-39页
   ·材料第25页
     ·海藻样品的采集第25页
     ·实验所用的抗体第25页
     ·供试病毒第25页
     ·药品和试剂第25页
     ·供试主要仪器第25页
   ·方法第25-39页
     ·实验原材料的制备第26-27页
       ·藻红蛋白的分离、纯化第26页
       ·藻红蛋白Native-PAGE纯度测定第26页
       ·TMV多克隆抗体的分离、纯化第26页
       ·TMV多克隆抗体SDS-PAGE纯度测定第26-27页
     ·TMV多克隆抗体效价的测定第27页
     ·藻红蛋白荧光性质与缓冲液体系第27-28页
       ·缓冲液离子强度的影响第27页
       ·缓冲液酸碱度的影响第27页
       ·添加剂的影响第27-28页
     ·藻红蛋白荧光标记抗体第28-31页
       ·标记方法第28页
       ·藻红蛋白与TMV多克隆抗体的交联第28页
       ·藻红蛋白与抗体交联流程第28-29页
       ·异型双功能试剂组合的筛选第29-31页
     ·藻红蛋白荧光标记的优化第31-34页
       ·SPDP衍生化反应的优化第31-32页
       ·2—IT巯基化反应的优化第32-34页
     ·交联复合物的凝胶层析第34页
     ·荧光抗体的琼脂双扩散测定第34-35页
     ·藻红蛋白荧光免疫检测第35-39页
       ·荧光免疫检测流程第35-36页
       ·荧光免疫检测仪器与判定标准第36页
       ·固相载体与抗体的固定第36页
       ·硝酸纤维素膜为载体的荧光免疫检测第36-37页
       ·Sephadex G-50葡聚糖凝胶为载体的荧光免疫检测第37-38页
       ·藻红蛋白荧光标记抗体在TMV检测中的应用第38-39页
3 结果与分析第39-56页
   ·藻红蛋白的分离、纯化第39页
   ·藻红蛋白Native-PAGE纯度鉴定第39-40页
   ·TMV多克隆抗体SDS-PAGE纯度鉴定第40-41页
   ·TMV多克隆抗体效价的测定第41页
   ·藻红蛋白荧光性质与缓冲液体系第41-43页
     ·缓冲液离子强度对藻红蛋白荧光性质的影响第41-42页
     ·缓冲液酸碱度对藻红蛋白荧光性质的影响第42-43页
     ·添加剂对藻红蛋白荧光性质的影响第43页
   ·藻红蛋白荧光标记抗体第43-49页
     ·异双功能试剂组合的选择第43-45页
     ·藻红蛋白荧光标记的优化第45-49页
       ·SPDP与RPE不同摩尔比对RPE相对荧光强度影响第45页
       ·SPDP浓度、反应时间与引入取代基团数第45-46页
       ·2-IT与抗体不同摩尔比对抗体效价的影响第46-47页
       ·lT浓度、反应时间与引入巯基数第47-48页
       ·藻红蛋白、抗体蛋白活化反应的时间及活化试剂的浓度第48-49页
   ·交联复合物的凝胶层析第49-50页
   ·琼脂双扩散测定第50页
   ·藻红蛋白荧光免疫检测第50-56页
     ·固相载体的选择第50-51页
     ·硝酸纤维素膜为载体的荧光免疫检测第51-52页
     ·免疫微球的荧光免疫检测第52-53页
     ·藻红蛋白荧光标记抗体在TMV检测中的应用第53-56页
       ·间接ELISA检测TMV待测样品结果第53-54页
       ·直接免疫荧光法测定TMV样品第54-56页
4 讨论第56-61页
   ·关于荧光标记原材料的制备第56-57页
   ·关于标记、蛋白交联第57-58页
   ·荧光免疫检测第58页
   ·藻红蛋白荧光探针第58-60页
   ·烟草花叶病毒的检测第60-61页
5 小结第61-63页
参考文献第63-70页
致谢第70页

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