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罗汉松根瘤内生细菌的初步鉴定研究

前言第1-21页
 1 生物固氮的研究简况第10-11页
 2 根瘤菌的分子遗传学研究第11-14页
   ·根瘤菌质粒及其功能的研究第11-12页
   ·根瘤菌结瘤基因及其调控的研究第12-13页
     ·根瘤菌的nodD调节基因第12-13页
     ·根瘤菌的共同nod基因第13页
     ·宿主专一性nod基因第13页
   ·根瘤菌的结瘤因子第13-14页
   ·根瘤菌的固氮基因第14页
 3 根瘤菌分类及多样性的研究第14-18页
   ·现代根瘤菌分类体系的研究第14-17页
   ·根瘤菌与豆科植物共生多样性研究第17-18页
 4 根瘤菌系统发育分类方法研究进展第18-20页
   ·依据基因序列分析的系统发育分类方法第18-19页
   ·依据基因组结构根系的系统发育分类方法第19页
   ·依据基因组序列分析的系统发育分类方法第19-20页
 5 本课题研究的目的和意义第20-21页
第一章 内生细菌的生理生化研究第21-46页
 1 材料与方法第21-26页
   ·菌株的采集、分离和纯化第21页
   ·分离菌株形态学特征的研究方法第21-22页
     ·普通染色第21页
     ·革兰氏染色第21-22页
     ·鞭毛染色第22页
     ·菌落的形态观察第22页
     ·芽孢的鉴定第22页
   ·分离菌株生理生化的研究方法第22-24页
     ·3-酮基乳糖试验第22页
     ·淀粉水解试验第22-23页
     ·B.T.B反应试验第23页
     ·牛肉膏蛋白胨试验第23页
     ·柠檬酸盐利用试验第23页
     ·明胶水解试验第23页
     ·氮源利用试验第23-24页
     ·碳源利用试验第24页
     ·葡萄糖的氧化发酵试验第24页
     ·乙醇氧化试验第24页
     ·精氨酸双水解酶的试验第24页
   ·分离菌株的抗逆性试验方法第24-25页
     ·酸碱度试验第24-25页
     ·耐盐性试验第25页
     ·温度试验第25页
   ·根瘤内生细菌回接试验方法第25-26页
     ·种子的处理第25-26页
     ·菌种的培养第26页
     ·接种宿主试验第26页
     ·接种刺槐试验第26页
 2 结果与分析第26-43页
   ·分离纯化获得的菌株第26-27页
   ·根瘤内生细菌菌株的形态特征第27-31页
   ·根瘤内生细菌菌株的生理生化特性第31-38页
     ·3-酮基乳糖第31页
     ·淀粉水解第31页
     ·B.T.B反应第31-32页
     ·牛肉膏蛋白胨第32-33页
     ·柠檬酸盐利用第33页
     ·明胶水解试验第33-34页
     ·氮源利用试验第34-35页
     ·碳源利用试验第35-36页
     ·葡萄糖的氧化发酵试验第36-37页
     ·乙醇氧化试验第37页
     ·精氨酸双水解酶试验第37-38页
   ·根瘤内生细菌的抗逆性第38-41页
     ·根瘤内生细菌耐酸碱性结果分析第38页
     ·耐盐性结果分析第38-40页
     ·根瘤内生细菌耐温性实验结果分析第40-41页
   ·根瘤内生细菌接种宿主及刺槐结瘤试验结果分析第41-43页
 3 结论第43-46页
第二章 内生细菌的分子生物学研究第46-66页
 1 材料与方法第46-51页
   ·菌种的来源第46页
   ·常用的仪器第46-47页
   ·常用的溶液、缓冲液第47页
   ·常用培养基第47页
   ·16S rDNA的鉴定步骤第47-51页
     ·菌种的培养第47页
     ·菌种总DNA的提取及检测第47-48页
     ·16 S rDNA引物的设计第48页
     ·PCR扩增条件第48-49页
     ·PCR产物的回收第49页
     ·PCR产物的连接第49页
     ·E.coli感受态细胞的制备第49-50页
     ·PCR产物的转化第50页
     ·质粒的提取(快速裂解法)第50页
     ·质粒酶切第50-51页
 2 结果第51-65页
   ·总DNA提取电泳检测结果如图2-1第51页
   ·PCR扩增结果电泳如图2-2第51-52页
   ·PCR扩增回收产物电泳结果如图2-3第52页
   ·PCR回收产物转化重组质粒提取电泳结果如图2-4第52-53页
   ·重组质粒酶切电泳结果如图2-5第53页
   ·16S rDNA序列测定结果第53-56页
   ·菌株的16S rDNA序列同源性比较第56-65页
     ·菌株L2的同源性比较结果第56-59页
     ·菌株L7的同源性比较结果第59-63页
     ·菌株DL7的同源性比较结果第63-65页
 3 讨论第65-66页
第三章 数值分类第66-69页
 1 数值分类数据的来源第66页
 2 数值聚类结果第66-67页
 3 数值分类结果分析第67页
 4 讨论第67-69页
第四章 结论与讨论第69-72页
 1 结论第69页
 2 讨论第69-72页
参考文献:第72-77页
附图第77-79页
致谢第79-80页
攻读学位期间发表的学术论文目录第80页

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