| 中文摘要 | 第1-7页 |
| Abstract | 第7-9页 |
| 前言 | 第9-21页 |
| 一、细胞增殖与细胞周期 | 第9-10页 |
| 二 Plk1在细胞周期调控中的研究进展 | 第10-12页 |
| 三 p53在细胞周期调控中的研究进展 | 第12-13页 |
| 四 细胞周期中的DNA损伤检验点 | 第13-21页 |
| 第一章 UV照射对 G_2/M期 Plk1和p53的影响 | 第21-28页 |
| 1． 材料与方法 | 第22-24页 |
| 1．1 真核表达质粒的构建 | 第22页 |
| 1．2 细胞培养，药物同步化，UV照射和质粒的磷酸钙转染 | 第22-23页 |
| 1．3． p21Cip1荧光素酶活性的检测 | 第23页 |
| 1．4． Plk1激酶活性的检测 | 第23页 |
| 1．5 蛋白印迹 | 第23-24页 |
| 1．6 流式细胞仪分析(FACS)细胞周期 | 第24页 |
| 2． 实验结果 | 第24-26页 |
| 2．1 同步化细胞由G_2期进入 M期，Plk1的激酶活性升高 | 第24-25页 |
| 2．2． G_2/M期，UV照射引起 Plk1激酶活性和蛋白水平下降，p53转录活性和蛋白水平上升 | 第25-26页 |
| 3． 讨论 | 第26-28页 |
| 第二章 Plk1与p53的结合作用 | 第28-36页 |
| 1． 材料方法 | 第28-31页 |
| 1．1 细胞培养，药物同步化，UV照射，ADR药物损伤和质粒的磷酸钙转染 | 第28-29页 |
| 1．2 免疫共沉淀和蛋白印迹 | 第29页 |
| 1．3 酵母表达质粒的构建 | 第29页 |
| 1．4． LiAc法共转化酵母双杂交 | 第29-30页 |
| 1．5． p21Cip1荧光素酶活性的检测 | 第30-31页 |
| 2． 实验结果 | 第31-34页 |
| 2．1 内源性的Plk1和p53蛋白在细胞体内发生结合 | 第31页 |
| 2．2． Plk1和p53在酵母细胞中直接结合 | 第31-33页 |
| 2．3． Plk1抑制受UV/ADR激活升高的p53介导p21的转录活性 | 第33-34页 |
| 3． 讨论 | 第34-36页 |
| 第三章 Plk1对p53的调节作用 | 第36-41页 |
| 1． 材料与方法 | 第36-37页 |
| 1．1 细胞培养，UV照射和质粒的磷酸钙转染 | 第36页 |
| 1．2 免疫印迹 | 第36页 |
| 1．3． Plk1激酶活性的检测 | 第36页 |
| 1．4 免疫荧光染色 | 第36-37页 |
| 2． 实验结果 | 第37-39页 |
| 2．1． Plk1抑制 UV照射诱导的p53(Ser-15)的磷酸化 | 第37页 |
| 2．2． Plk1协同Mdm2途径促进p53蛋白的降解 | 第37-38页 |
| 2．3． Plk1抑制UV照射诱导的p53入核的过程 | 第38-39页 |
| 2．4． p53不影响 Plk1的蛋白水平和激酶活性 | 第39页 |
| 3． 讨论 | 第39-41页 |
| 第四章 Plk1和hNRAGE对p53调节作用 | 第41-44页 |
| 1． 材料与方法 | 第41-42页 |
| 1．1 细胞培养，UV照射和质粒的磷酸钙转染 | 第41页 |
| 1．2 免疫印迹 | 第41页 |
| 1．3． p21Cip1素酶活性的检测 | 第41-42页 |
| 2． 实验结果 | 第42-43页 |
| 2．1． hNRAGE不影响 Plk1的蛋白水平以及激酶活性 | 第42页 |
| 2．2． Plk1和hNRAGE共同调节p53介导p21的转录活性 | 第42-43页 |
| 3． 讨论 | 第43-44页 |
| 总结 | 第44-53页 |
| 附录1 实验材料与仪器 | 第53-54页 |
| 附录2 攻读硕士学位论文期间的文章 | 第54-55页 |
| 致谢 | 第55页 |
