中文摘要 | 第1-8页 |
英文摘要 | 第8-11页 |
引言 | 第11-13页 |
一、鸡大肠杆菌1型菌毛特性研究进展 | 第13-23页 |
1 概述 | 第13页 |
2 1型菌毛的一般特点及与P型菌毛的比较 | 第13-14页 |
3 1型菌毛的粘附机制 | 第14-16页 |
4 1型菌毛基因簇结构及其基因型 | 第16-17页 |
5 1型菌毛蛋白免疫原性 | 第17-19页 |
参考文献 | 第19-23页 |
二、鸡大肠杆菌GL7株(078)1型菌毛单克隆抗体研制及对野生分离菌株的检测 | 第23-39页 |
1 材料与方法 | 第24-29页 |
1.1 菌株及来源 | 第24页 |
1.2 试验动物及细胞系 | 第24页 |
1.3 主要试剂和器材 | 第24-25页 |
1.4 免疫原的制备 | 第25页 |
1.5 免疫程序 | 第25-26页 |
1.6 检测方法的建立 | 第26页 |
1.7 细胞融合及杂交瘤细胞的筛选 | 第26-27页 |
1.8 单抗腹水的制备 | 第27页 |
1.9 McAb的某些生物学特性检查 | 第27-29页 |
1.10 McAb的初步应用 | 第29页 |
2 结果与分析 | 第29-36页 |
3 讨论与小结 | 第36-37页 |
参考文献 | 第37-39页 |
三、鸡大肠杆菌1型菌毛基因类型与抗原性分析 | 第39-49页 |
1 材料与方法 | 第40-42页 |
1.1 菌株 | 第40页 |
1.2 质粒及质粒提取 | 第40页 |
1.3 细菌染色体提取 | 第40页 |
1.4 1型菌毛pilA基因引物设计与合成 | 第40页 |
1.5 PCR扩增 | 第40-41页 |
1.6 PCR产物的克隆 | 第41页 |
1.7 感受态细胞制备 | 第41页 |
1.8 重组质粒转化 | 第41页 |
1.9 阳性克隆的筛选 | 第41页 |
1.10 PCR产物序列测定 | 第41-42页 |
1.11 1型菌毛蛋白结构基因DNA序列及氨基酸序列比较 | 第42页 |
1.12 菌毛蛋白的二级结构预测与比较 | 第42页 |
1.13 鸡大肠杆菌1型菌毛蛋白抗原位点预测与比较 | 第42页 |
2 结果与分析 | 第42-47页 |
3 讨论与小结 | 第47-48页 |
参考文献 | 第48-49页 |
四、鸡大肠杆菌1型菌毛疫苗交叉保护免疫试验 | 第49-56页 |
1 材料与方法 | 第49-51页 |
1.1 菌种 | 第49-50页 |
1.2 试验用鸡 | 第50页 |
1.3 菌毛提纯及菌毛亚单位苗制备 | 第50-51页 |
1.4 试验分组及免疫情况 | 第51页 |
2 结果与分析 | 第51-53页 |
3 讨论与小结 | 第53-54页 |
参考文献 | 第54-56页 |
五、鸡大肠杆菌1型菌毛蛋白结构基因(pilA)表达载体构建及表达产物免疫原性 | 第56-67页 |
1 材料与方法 | 第57-61页 |
1.1 实验材料 | 第57-58页 |
1.2 方法 | 第58-60页 |
1.3 表达产物的纯化 | 第60页 |
1.4 重组表达产物油乳剂疫苗制备 | 第60页 |
1.5 免疫试验 | 第60-61页 |
2 结果 | 第61-64页 |
2.1 PCR产物电泳分析结果 | 第61页 |
2.2 pilA基因表达载体的构建 | 第61-62页 |
2.3 重组菌株表达产物SDS-PAGE分析 | 第62页 |
2.4 Western blot结果 | 第62-64页 |
3 讨论与小结 | 第64页 |
参考文献 | 第64-67页 |
附录:主要试剂的配制 | 第67-75页 |
研究结论 | 第75-76页 |