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鸡大肠杆菌1型菌毛的抗原性分析及pi/A基因表达载体构建

中文摘要第1-8页
英文摘要第8-11页
引言第11-13页
一、鸡大肠杆菌1型菌毛特性研究进展第13-23页
 1 概述第13页
 2 1型菌毛的一般特点及与P型菌毛的比较第13-14页
 3 1型菌毛的粘附机制第14-16页
 4 1型菌毛基因簇结构及其基因型第16-17页
 5 1型菌毛蛋白免疫原性第17-19页
 参考文献第19-23页
二、鸡大肠杆菌GL7株(078)1型菌毛单克隆抗体研制及对野生分离菌株的检测第23-39页
 1 材料与方法第24-29页
  1.1 菌株及来源第24页
  1.2 试验动物及细胞系第24页
  1.3 主要试剂和器材第24-25页
  1.4 免疫原的制备第25页
  1.5 免疫程序第25-26页
  1.6 检测方法的建立第26页
  1.7 细胞融合及杂交瘤细胞的筛选第26-27页
  1.8 单抗腹水的制备第27页
  1.9 McAb的某些生物学特性检查第27-29页
  1.10 McAb的初步应用第29页
 2 结果与分析第29-36页
 3 讨论与小结第36-37页
 参考文献第37-39页
三、鸡大肠杆菌1型菌毛基因类型与抗原性分析第39-49页
 1 材料与方法第40-42页
  1.1 菌株第40页
  1.2 质粒及质粒提取第40页
  1.3 细菌染色体提取第40页
  1.4 1型菌毛pilA基因引物设计与合成第40页
  1.5 PCR扩增第40-41页
  1.6 PCR产物的克隆第41页
  1.7 感受态细胞制备第41页
  1.8 重组质粒转化第41页
  1.9 阳性克隆的筛选第41页
  1.10 PCR产物序列测定第41-42页
  1.11 1型菌毛蛋白结构基因DNA序列及氨基酸序列比较第42页
  1.12 菌毛蛋白的二级结构预测与比较第42页
  1.13 鸡大肠杆菌1型菌毛蛋白抗原位点预测与比较第42页
 2 结果与分析第42-47页
 3 讨论与小结第47-48页
 参考文献第48-49页
四、鸡大肠杆菌1型菌毛疫苗交叉保护免疫试验第49-56页
 1 材料与方法第49-51页
  1.1 菌种第49-50页
  1.2 试验用鸡第50页
  1.3 菌毛提纯及菌毛亚单位苗制备第50-51页
  1.4 试验分组及免疫情况第51页
 2 结果与分析第51-53页
 3 讨论与小结第53-54页
 参考文献第54-56页
五、鸡大肠杆菌1型菌毛蛋白结构基因(pilA)表达载体构建及表达产物免疫原性第56-67页
 1 材料与方法第57-61页
  1.1 实验材料第57-58页
  1.2 方法第58-60页
  1.3 表达产物的纯化第60页
  1.4 重组表达产物油乳剂疫苗制备第60页
  1.5 免疫试验第60-61页
 2 结果第61-64页
  2.1 PCR产物电泳分析结果第61页
  2.2 pilA基因表达载体的构建第61-62页
  2.3 重组菌株表达产物SDS-PAGE分析第62页
  2.4 Western blot结果第62-64页
 3 讨论与小结第64页
 参考文献第64-67页
附录:主要试剂的配制第67-75页
研究结论第75-76页

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