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棉花黄萎病菌T-DNA突变体库的构建及表型分析

摘要第1-7页
Abstract第7-15页
第一章 文献综述第15-25页
   ·棉花黄萎病菌的研究进展第15-19页
     ·棉花黄萎病菌的鉴定第15-16页
     ·棉花黄萎病菌生理型及致病力分化研究第16-17页
     ·棉花黄萎病菌致病机理第17-18页
     ·棉花抗黄萎病机制第18-19页
   ·根癌农杆菌介导真菌遗传转化研究进展第19-23页
     ·根癌农杆菌介导真菌转化的作用机理第19-20页
     ·根癌农杆菌介导丝状真菌遗传转化的特点第20页
     ·ATMT 影响因素第20-23页
       ·真菌受体第20页
       ·根癌农杆菌菌株第20-21页
       ·乙酰丁香酮(AS)对转化的影响第21页
       ·农杆菌与真菌受体的浓度比例对转化效率的影响第21-22页
       ·共培养温度和时间对 ATMT 转化效率的影响第22页
       ·农杆菌介导真菌遗传转化突变体库的构建及相关基因的克隆第22-23页
     ·农杆菌介导真菌遗传转化存在问题及展望第23页
   ·立题依据第23-25页
第二章 棉花黄萎病菌插入突变体库的构建及其质量评价第25-35页
   ·材料与方法第25-26页
     ·材料第25-26页
       ·菌株与载体第25页
       ·化学试剂及试剂盒第25页
       ·培养基及其配制第25-26页
     ·2 方法第26-30页
       ·棉花黄萎病菌菌株 Vd080 对潮霉素 B 耐受性测定第26页
       ·农杆菌介导棉花黄萎病菌的转化和体系的优化第26-27页
       ·突变体库的质量评价第27-30页
   ·结果与分析第30-33页
     ·棉花黄萎病菌潮霉素 B 耐受性测定结果第30-31页
     ·棉花黄萎病菌突变体库的构建第31页
     ·突变体分子鉴定第31-32页
     ·突变体 T-DNA 插入拷贝数分析第32-33页
       ·突变体基因组酶切及转膜结果第32页
       ·Southern 杂交结果第32-33页
     ·突变体遗传稳定性结果第33页
   ·结论与讨论第33-35页
第三章 突变体库的表型分析第35-41页
   ·材料与方法第35-36页
     ·材料第35页
       ·菌株第35页
       ·培养基和试剂配制第35页
     ·方法第35-36页
       ·突变体菌落形态的观察第35页
       ·生长速率测定第35页
       ·产孢量测定第35-36页
       ·粗毒素含量测定第36页
       ·致病力测定第36页
   ·结果与分析第36-39页
     ·突变体的培养性状第36页
     ·突变体的生长速率第36-37页
     ·突变体的粗毒素分泌量第37页
     ·突变体的分生孢子产量第37页
     ·突变体的致病力测定结果第37-38页
     ·生物学特性与致病力之间的相关性分析第38-39页
   ·结论与讨论第39-41页
第四章 VdT286 的生理特性及产孢相关基因的克隆第41-58页
   ·材料与方法第41-47页
     ·材料第41-42页
       ·菌株第41页
       ·培养基第41页
       ·化学及分子生物学试剂第41-42页
     ·方法第42-47页
       ·VdT286 中 T-DNA 插入分子验证和拷贝数分析第42页
       ·VdT286 的表型分析第42页
       ·VdT286 生理特性分析第42-43页
       ·VdT286 致病力测定第43页
       ·Tail-PCR 扩增 VdT286 中 T-DNA 的侧翼序列第43-45页
       ·Tail-PCR 扩增产物的克隆第45-47页
       ·测序分析第47页
   ·结果与分析第47-56页
     ·VdT286 插入分子验证及拷贝数分析第47页
     ·VdT286 和 Vd080 培养特性第47-48页
     ·VdT286 和 Vd080 菌丝周围孢子观察第48页
     ·VdT286 和 Vd080 对温度及 pH 值的敏感性第48-51页
       ·不同 pH 值下 VdT286 的生长情况第48-49页
       ·不同温度下 VdT286 生长情况第49-51页
     ·VdT286 胞外酶产生情况第51-53页
       ·蛋白酶产生情况第51页
       ·淀粉酶产生情况第51-52页
       ·纤维素酶分泌情况第52-53页
     ·致病力测定结果第53页
     ·VdT286 侧翼序列的扩增第53-56页
       ·Tail-PCR 三轮 PCR 产物电泳分析第53-54页
       ·Tail-PCR 第三轮 PCR 产物胶回收琼脂糖凝胶电泳分析第54页
       ·PCR 产物克隆第54-55页
       ·阳性克隆的菌液 PCR 鉴定第55页
       ·测序结果分析第55-56页
   ·结论与讨论第56-58页
第五章 全文结论第58-60页
参考文献第60-67页
致谢第67-68页
作者简历第68页

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