摘要 | 第1-7页 |
Abstract | 第7-15页 |
第一章 引言 | 第15-23页 |
·新城疫病毒简介 | 第15-16页 |
·先天性免疫系统简介 | 第16-17页 |
·RIG-I 样受体介导的信号转导 | 第17-21页 |
·RLR 家族概述 | 第17页 |
·RLR 对病毒的识别 | 第17-19页 |
·RLR 介导的信号传导 | 第19-20页 |
·RLR 与病毒蛋白 | 第20-21页 |
·干扰素简介 | 第21-22页 |
·干扰素家族成员 | 第21页 |
·病毒诱导 I 型 IFN 基因表达的调控 | 第21-22页 |
·I 型 IFN 诱导的信号通路转导 | 第22页 |
·NDV 先天性免疫相关研究现状 | 第22-23页 |
第二章 鹅 RLR 相关基因的克隆及序列分析 | 第23-36页 |
·材料 | 第23-24页 |
·动物材料 | 第23页 |
·病毒和菌株 | 第23页 |
·载体和分子生物学试剂 | 第23页 |
·主要仪器 | 第23页 |
·主要缓冲液及试剂配制 | 第23-24页 |
·方法 | 第24-28页 |
·CEF,DEF,GEF 的制备 | 第24页 |
·NDV 病毒感染 CEF,DEF,GEF | 第24页 |
·细胞 RNA 提取(Trizol 法)及反转录 | 第24-25页 |
·鹅 RIG-I 基因及其 CARD 区的扩增及真核表达质粒构建 | 第25-27页 |
·鹅 MDA5 基因的扩增及真核表达质粒构建 | 第27-28页 |
·鹅 RIG-I/MDA5 基因序列分析 | 第28页 |
·结果 | 第28-35页 |
·CEF,DEF,GEF 中 RIG-I 的初步鉴定 | 第28-29页 |
·鹅 RIG-I 基因及其 CARD 基因扩增结果 | 第29-30页 |
·鹅 RIG-I 基因及其 CARD 基因真核表达质粒的鉴定 | 第30-31页 |
·鸡,鸭,鹅中 MDA5 的初步鉴定 | 第31-32页 |
·鹅 MDA5 基因 overlap 扩增结果 | 第32页 |
·鹅 MDA5 基因真核表达质粒的鉴定 | 第32-33页 |
·gRIG-I full,gMDA5 full 基因序列分析 | 第33-35页 |
·讨论 | 第35-36页 |
第三章 外源性鹅 RIG-I 转染细胞对 NDV 复制的影响 | 第36-46页 |
·材料 | 第36页 |
·毒株,细胞和质粒 | 第36页 |
·载体和分子生物学试剂 | 第36页 |
·主要仪器 | 第36页 |
·方法 | 第36-40页 |
·质粒的提取转化 | 第36页 |
·质粒的转染 | 第36-37页 |
·阳性刺激物转染 | 第37页 |
·病毒感染 | 第37页 |
·病毒感染力的滴定(TCID50 的测定) | 第37页 |
·细胞 RNA 提取(Trizol 法)及 Real-time PCR | 第37-38页 |
·双荧光素酶报告系统构建及检测 | 第38-40页 |
·结果 | 第40-45页 |
·Real-time PCR 引物优化 | 第40-41页 |
·5’ppp-dsRNA 刺激鹅 RIG-I 可上调 IFN-β的表达 | 第41页 |
·过表达鹅 RIG-I 对 NDV 复制的影响 | 第41-43页 |
·鸡 IFN-β基因启动子序列的扩增及荧光素酶报告质粒的鉴定 | 第43页 |
·外源性鹅 RIG-I 转染 DF-1 对 NDV 复制的影响 | 第43-45页 |
·讨论 | 第45-46页 |
第四章 内源性鹅 RIG-I 在抗 NDV 感染中的作用 | 第46-55页 |
·材料 | 第46页 |
·动物材料 | 第46页 |
·病毒和菌株 | 第46页 |
·载体和分子生物学试剂 | 第46页 |
·主要仪器 | 第46页 |
·方法 | 第46-49页 |
·GEF 的制备 | 第46-47页 |
·NDV 病毒感染 GEF | 第47页 |
·病毒感染力的滴定(TCID50 的测定) | 第47页 |
·细胞 RNA 提取(Trizol 法)及 Real-time PCR | 第47-48页 |
·动物试验 | 第48-49页 |
·结果 | 第49-54页 |
·Real-time PCR 引物优化 | 第49页 |
·GEF 感染 NDV 后 gRIG-I mRNA 检测 | 第49-50页 |
·GEF 感染 NDV 后病毒滴度检测 | 第50-51页 |
·鹅 NDV 母源抗体检测 | 第51页 |
·RIG-I 在正常鹅体内的分布 | 第51页 |
·鹅感染 NDV 后肺和气囊组织中的 gRIG-I mRNA 上调 | 第51-53页 |
·肺和气囊组织中病毒 ELD50 检测 | 第53-54页 |
·讨论 | 第54-55页 |
第五章 结论 | 第55-56页 |
参考文献 | 第56-62页 |
致谢 | 第62-63页 |
作者简历 | 第63页 |