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人工分子伴侣体系辅助溶菌酶复性的研究

目录第1-6页
摘要第6-7页
Abstract第7-8页
第一章 文献综述第8-25页
 1. 1 蛋白质复性的必要性第8-10页
  1. 1. 1 包含体的形成第8-9页
  1. 1. 2 包含体的处理第9-10页
 1. 2 蛋白质折叠复性第10-19页
  1. 2. 1 蛋白质折叠复性机理及理论第10-13页
  1. 2. 2 蛋白质体外折叠复性方法第13-17页
   1. 2. 2. 1 透析和稀释复性法第13-14页
   1. 2. 2. 2 折叠添加剂辅助复性第14页
   1. 2. 2. 3. 反相微团复性法第14-15页
   1. 2. 2. 4 双水相法复性第15页
   1. 2. 2. 5 色谱复性技术第15-17页
   1. 2. 2. 6 结合分子生物学复性法第17页
  1. 2. 3 蛋白质复性过程的检测方法第17-19页
 1. 3 人工分子伴侣第19-23页
  1. 3. 1 分子伴侣简介第19页
  1. 3. 2 人工分子伴侣的提出第19-20页
  1. 3. 3 环糊精简介第20-22页
  1. 3. 4 人工分子伴侣的研究及固定化技术的应用第22-23页
 1. 4 本论文的研究意义及内容第23-25页
第二章 溶菌酶变性条件的优化第25-41页
 2. 1 溶菌酶简介第25-26页
 2. 2 实验仪器及材料第26-27页
  2. 2. 1 试剂第26-27页
  2. 2. 2 设备第27页
 2. 3 分析实验方法第27-31页
  2. 3. 1 溶菌酶活性测定第27-28页
  2. 3. 2 溶菌酶自由巯基含量测定-DTNB法第28-29页
  2. 3. 3 蛋白质含量的测定--考马斯亮蓝法第29-31页
  2. 3. 4 溶菌酶的变性第31页
  2 . 3 . 5溶菌酶稀释复性第31页
 2. 4 结果与讨论第31-39页
  2. 4. 1 盐酸胍对溶菌酶的变性作用第31-32页
  2. 4. 2 DTT浓度对变性溶菌酶还原作用的影响第32-33页
  2. 4. 3 DTT对溶菌酶稀释复性过程的影响第33-35页
  2. 4. 4 高酶浓度所需DTT浓度的确定第35-37页
  2. 4. 5 变性时间对酶活及自由巯基数的影响第37-38页
  2. 4. 6 变性时间对酶稀释复性的影响第38-39页
 2. 5 本章小结第39-41页
第三章 人工分子伴侣辅助溶菌酶复性第41-58页
 3. 1 实验材料及仪器第41-42页
  3. 1. 1 试剂第41页
  3. 1. 2 设备第41-42页
 3. 2 分析实验方法第42-44页
  3. 2. 1 溶菌酶的变性第42页
  3. 2. 2 溶菌酶折叠中间体稳定性测定第42页
  3. 2. 3 溶菌酶复性第42-43页
  3. 2. 4 溶菌酶活性测定第43页
  3. 2. 5 紫外光谱扫描分析折叠蛋白质第43页
  3. 2. 6 SDS-PAGE电泳第43-44页
 3. 3 实验结果与讨论第44-57页
  3. 3. 1 人工分子伴侣辅助变性溶菌酶复性第44-45页
  3. 3. 2 去污剂种类的影响第45-46页
  3. 3. 3 去污剂和环糊精浓度对复性的影响第46-48页
  3. 3. 4 β-CD加入时间的影响第48-50页
  3. 3. 5 二硫键重排剂对复性效果的影响第50-52页
  3. 3. 6 pH值的影响第52-53页
  3. 3. 7 溶菌酶浓度的影响第53-54页
  3. 3. 8 再折叠溶菌酶的结构特性分析第54-57页
 3. 4 小结第57-58页
第四章 固化环糊精辅助溶菌酶复性第58-66页
 4. 1 实验材料及仪器第58页
  4. 1. 1 试剂第58页
  4. 1. 2 设备第58页
 4. 2 实验分析方法第58-60页
  4. 2. 1 溶菌酶的变性第58-59页
  4. 2. 2 溶菌酶复性第59页
  4. 2. 3 固化环糊精的制备第59-60页
 4. 3 实验结果与讨论第60-65页
  4. 3. 1 固化环糊精的表征第60-61页
  4. 3. 2 固化环糊精辅助复性第61-62页
  4. 3. 3 颗粒大小对复性的影响第62-63页
  4. 3. 4 β-CD/β-CDP比例对复性的影响第63-65页
 4. 4 小结第65-66页
第五章 结论与建议第66-69页
 5. 1 结论第66-67页
 5. 2 建议第67-69页
参考文献第69-75页
致谢第75-76页
攻读硕士学位期间发表论文情况第76页

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