| 1 前言 | 第1-10页 |
| 2 材料和方法 | 第10-26页 |
| ·材料 | 第10-14页 |
| ·实验方法 | 第14-26页 |
| ·超甜玉米外植体的准备和愈伤组织诱导 | 第14页 |
| ·质粒DNA的提取 | 第14-17页 |
| ·质粒DNA小量提取及纯化 | 第15-16页 |
| ·质粒DNA大量提取及纯化 | 第16-17页 |
| ·基因枪轰击转化 | 第17-18页 |
| ·DNA 微弹的制备 | 第17页 |
| ·轰击材料准备 | 第17页 |
| ·轰击 | 第17-18页 |
| ·转化体的筛选 | 第18页 |
| ·植株分化再生与移栽 | 第18页 |
| ·超甜玉米子房注射法转化 | 第18-19页 |
| ·质粒DNA 浓度准备 | 第18页 |
| ·离体超甜玉米子房注射方法 | 第18页 |
| ·田间超甜玉米子房注射方法 | 第18-19页 |
| ·转基因植株抗虫性鉴定 | 第19页 |
| ·转基因植株的DNA 提取 | 第19-21页 |
| ·转基因玉米基因组DNA 快速提取 | 第19-20页 |
| ·转基因玉米植株总DNA 的大量提取 | 第20-21页 |
| ·转基因植株PCR 扩增 | 第21-22页 |
| ·转基因植株Southern 杂交分析 | 第22-24页 |
| ·目的片段回收 | 第22-23页 |
| ·转基因植株总DNA酶切、电泳及转膜 | 第23页 |
| ·探针标记 | 第23页 |
| ·预杂交及杂交 | 第23-24页 |
| ·洗膜及信号检测 | 第24页 |
| ·转基因植株基因表达分析(RT-PCR) | 第24-26页 |
| ·转基因植株总RNA提取 | 第24页 |
| ·反转录cDNA 第一链的合成 | 第24页 |
| ·目的基因 PCR 扩增 | 第24-26页 |
| 3 结果与分析 | 第26-64页 |
| ·基因枪法超甜玉米抗虫基因转化 | 第26-46页 |
| ·超甜玉米基因转化胚性愈伤组织受体系统的建立 | 第26-31页 |
| ·不同基因型胚龄与胚大小 | 第26-27页 |
| ·不同基因型胚龄与愈伤组织诱导 | 第27-28页 |
| ·2,4-D浓度对愈伤组织诱导的作用 | 第28-29页 |
| ·AgNO_3和脯氨酸对诱导愈伤组织的作用 | 第29-30页 |
| ·除草剂Basta 筛选浓度试验 | 第30-31页 |
| ·超甜玉米稳定、高效再生成株系统的建立 | 第31-35页 |
| ·愈伤组织继代时间与植株再生的关系 | 第31-32页 |
| ·预再生与愈伤组织继代状态的关系 | 第32页 |
| ·蔗糖和激素配比对愈伤组织分化再生的影响 | 第32-34页 |
| ·愈伤组织直接分化再生与预分化后再生的比较 | 第34页 |
| ·再生植株生根、壮苗及移栽技术 | 第34-35页 |
| ·基因枪转化超甜玉米愈伤组织情况 | 第35-36页 |
| ·基因枪转化超甜玉米愈伤组织情况 | 第35-36页 |
| ·基因枪转化超甜玉米愈伤组织及再生植株体系 | 第36页 |
| ·质粒酶切及目的基因片段回收 | 第36-37页 |
| ·转基因T_0 植株PCR 检测 | 第37-38页 |
| ·转基因T_0 植株的Southern blot 分析 | 第38-40页 |
| ·转基因T_1代植株Southern blot 分析 | 第40-41页 |
| ·T_1代植株抗虫性分析 | 第41-43页 |
| ·转基因T_2代植株基因表达分析(RT-PCR) | 第43-44页 |
| ·小结 | 第44-46页 |
| ·子房注射法将抗虫基因导入超甜玉米的研究 | 第46-64页 |
| ·离体子房注射法转化 | 第46页 |
| ·田间子房注射法转化 | 第46-47页 |
| ·转基因T_0 植株PCR 检测 | 第47页 |
| ·转基因T_0植株的Southern blot验证 | 第47-48页 |
| ·转基因T_1 代植株田间玉米螟抗性鉴定 | 第48-49页 |
| ·转基因T_1代植株室内玉米螟抗性鉴定 | 第49-50页 |
| ·子房注射法转基因植株T_1代PCR 检测 | 第50页 |
| ·子房注射法转基因植株T_1代Southern blot 验证 | 第50-51页 |
| ·小结 | 第51-64页 |
| 4 讨论 | 第64-68页 |
| ·促进愈伤组织诱导,改善愈伤组织质量 | 第64页 |
| ·提高转基因植株再生频率,减少无性变异 | 第64-65页 |
| ·子房注射法转化的可行性 | 第65-66页 |
| ·多基因共转化提高基因转化效率和频率 | 第66页 |
| ·本研究特色及创新 | 第66-67页 |
| ·进一步研究设想 | 第67-68页 |
| 5 结论 | 第68-70页 |
| 致谢 | 第70-71页 |
| 参考文献 | 第71-88页 |
| 英文摘要 | 第88-92页 |
| 附录A 文献综述 | 第92-127页 |
| 附录B 缩写词及英汉对照 | 第127-129页 |
| 附录C 学位论文承诺书 | 第129页 |
