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高产降脂活性物质的红曲霉选育及应用

第一部分 前言第1-27页
 1 红曲霉生物学特性第11-18页
   ·红曲霉的形态及分类第11-12页
     ·红曲霉的形态第11-12页
     ·红曲霉的分类第12页
     ·红曲霉的培养特性第12页
   ·红曲霉的主要初级代谢产物第12-13页
     ·酶第12-13页
     ·脂肪酸第13页
     ·有机酸第13页
   ·红曲霉主要次级代谢产物及其药理作用第13-18页
     ·红曲色素第13-14页
     ·胆固醇生物合成抑制剂-Monacolin类物质第14-16页
     ·麦角固醇第16页
     ·真菌毒素-桔霉素(Citrinin)第16-17页
     ·其他次级代谢产物及药理功能第17-18页
 2 国内外研究现状及趋势展望第18-21页
   ·红曲霉国内外研究现状第18-19页
   ·红曲霉研究趋势及展望第19-20页
   ·红曲应用展望第20-21页
 3 红曲霉诱变育种第21-24页
   ·诱变育种的方法和原理第21页
   ·几种有效的诱变育种方法第21-24页
     ·紫外线第21-22页
     ·硝酸(CA)第22页
     ·激光第22-23页
     ·原生质体诱变育种技术第23-24页
 4 同工酶技术第24-25页
   ·同工酶的基本概念第24-25页
   ·同工酶生物学意义第25页
   ·同工酶电泳用于真菌分类及鉴定第25页
 5 限定混合培养(发酵)技术第25-27页
第二部分 实验方法第27-42页
 1 实验材料第27-29页
   ·菌种来源第27页
   ·试剂和主要原料第27-28页
   ·主要仪器第28页
   ·主要培养基第28-29页
     ·种子斜面培养基第28页
     ·平板分离培养基#.18第28页
     ·液体种子培养基(%)第28-29页
     ·液体发酵培养基(%)第29页
     ·孢子活化培养基(%)第29页
     ·菌丝生长培养基第29页
     ·再生培养基采用双层平板法第29页
     ·固体曲料培养基第29页
 2 实验方法第29-42页
   ·菌种的分离筛选第29页
   ·原始出发菌株的筛选第29-32页
     ·红曲发酵液制备过程第29-30页
     ·待测样的制备第30页
     ·原始出发菌株初筛方法(薄层层析法)第30-32页
     ·原始出发菌株的复筛方法(HPLC法)第32页
   ·红曲霉M_9的诱变育种第32-34页
     ·单孢子悬液的制备第32-33页
     ·单孢子悬液的活化第33页
     ·紫外线处理剂量的选择第33页
     ·HNO2处理剂量的选择第33页
     ·诱变方法第33-34页
     ·Monacolin K高产突变株的筛选第34页
   ·红曲霉M_(9x)原生质体的制备与再生第34-36页
     ·红曲霉M_(9x)原生质体的制备与再生方法第34-35页
     ·各因素对原生质体形成和再生的影响第35-36页
   ·激光诱变第36-37页
     ·He-Ne激光诱变原生质体第36页
     ·诱变时间对原生质体相对再生率的影响第36页
     ·激光诱变Monacolin K高产突变株的筛选第36页
     ·原始出发菌株M9与突变株M9x及M9y三者次级代谢产物产量的比较第36页
     ·原始出发菌株M9与突变株M9x、M9y三者在麦芽汁平板上形态特征第36页
     ·原始出发菌株M9与突变株M9x、M9y三者酯酶同工酶谱分析第36-37页
     ·突变株M9y遗传稳定性分析第37页
   ·功能性红曲调味品的开发第37-42页
     ·单菌种制曲及混合制醪发酵第37-39页
     ·红曲霉、米曲霉混合菌种制曲及制醪发酵第39-40页
     ·理化及酶活测定方法第40-42页
第三部分 实验结果第42-61页
 1 菌株收集结果第42页
 2 原始出发菌株的筛选结果第42-46页
   ·薄层层析法初筛目的菌株第42-44页
     ·Monacolin K薄层层析分析第42-43页
     ·桔霉素薄层层析分析第43-44页
   ·出发菌株的复筛第44-46页
     ·Monacolin K对照品的紫外吸收光谱第44页
     ·标准曲线绘制第44-45页
     ·重复测定结果第45页
     ·回收率测定第45页
     ·红曲霉M1、M4、M9 Monacolin K产量测定结果第45-46页
     ·Monacolin K标准对照品及红曲霉M9的HPLC图谱第46页
 3 红曲霉M9的诱变育种第46-55页
   ·红曲霉M_9紫外诱变处理第46-47页
   ·红曲霉M_9HNO_2诱变处理第47页
   ·诱变处理结果第47-48页
   ·红曲霉M_(9x)的原生质体形成及再生第48-52页
     ·菌龄对原生质体形成及再生的影响第48页
     ·酶系统对原生质体形成数的影响第48-49页
     ·不同的酶浓度对原生质体形成及再生的影响第49页
     ·酶解温度对原生质体形成及再生的影响第49-50页
     ·不同的渗稳剂对原生质体形成及再生的影响第50页
     ·不同浓度的渗稳剂对原生质体形成及再生的影响第50-51页
     ·酶解时间对原生质体形成及再生的影响第51页
     ·不同的菌丝培养液对原生质体形成及再生的影响第51-52页
     ·突变株M9x原生质体形成及再生最佳条件的选择第52页
     ·突变株M9x原生质体释放的形态观察第52页
   ·突变株M_(9x)原生质体He-Ne激光诱变第52-55页
     ·激光照射时间对突变株M9x原生质体相对再生率的影响第52-53页
     ·激光对突变株M9x原生质体的诱变效果第53页
     ·突变株M9y、M9x及原始出发菌株M9三者的次级代谢产物发酵结果比较第53-54页
     ·突变株M9y、M9x及原始出发菌株M9三者在麦芽汁平板生长形态特征的比较第54页
     ·突变株M9y、M9x及原始出发菌株M9三者酯酶同工酶谱比较第54-55页
     ·突变株M9y斜面传代Monacolin K产量稳定性试验第55页
 4 功能性红曲调味品的开发第55-61页
   ·突变株M9y在不同比例的米豆混合物上生长情况的比较第55页
   ·单菌种、混合菌种培养工艺中酸性、中性蛋白酶活力的比较第55-57页
     ·福林试剂标准曲线第55-56页
     ·单菌种、混合菌种制曲工艺中酸性、中性蛋白酶活力的比较第56-57页
   ·单菌种、混合菌种制曲工艺中糖化酶活力的比较第57页
   ·发酵过程中前期醪液中氨基酸态氮含量、还原糖含量的测定第57-58页
   ·单菌种制曲混合发酵工艺、混合菌种制曲发酵工艺氨基酸态氮生成率的比较第58-59页
   ·成品的感官性状及理化指标第59-60页
   ·混合菌种制曲发酵工艺调味品中Monacolin K含量测定第60-61页
小结第61-62页
参考文献第62-66页
附图第66-67页
致谢第67页

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