| 中文摘要 | 第1-4页 |
| 英文摘要 | 第4-9页 |
| 1 前言 | 第9-28页 |
| ·植物抗旱机理的研究进展 | 第9-23页 |
| ·信号传递 | 第9-13页 |
| ·渗透调节 | 第13-15页 |
| ·代谢调整 | 第15-16页 |
| ·脱水保护 | 第16-23页 |
| ·脱水保护物质LEA蛋白简介 | 第16-20页 |
| ·LEA蛋白的抗旱作用机理 | 第20-21页 |
| ·LEA基因表达的调控研究进展 | 第21-23页 |
| ·克隆抗旱基因原理及方法 | 第23-25页 |
| ·对已知序列进行分子克隆 | 第24页 |
| ·对未知序列进行分子克隆 | 第24-25页 |
| ·从蛋白质到基因序列 | 第24页 |
| ·转座子标签法 | 第24-25页 |
| ·基因组相减技术、DD-RT PCR技术和RDA技术 | 第25页 |
| ·与已知基因紧密连锁基因的分离 | 第25页 |
| ·实验方案及流程 | 第25-28页 |
| 2 材料和方法 | 第28-38页 |
| ·试验材料 | 第28-30页 |
| ·植物材料 | 第28页 |
| ·质粒与菌株 | 第28-29页 |
| ·主要生化试剂 | 第29页 |
| ·主要使用仪器 | 第29页 |
| ·主要溶液配制 | 第29-30页 |
| ·试验方法 | 第30-38页 |
| ·抗旱基因HVA1的片段在羊草DNA中的新发现 | 第30-34页 |
| ·兼并引物的设计及合成 | 第30-31页 |
| ·羊草DNA提取及纯化 | 第31-32页 |
| ·应用兼并PCR法扩增目的基因 | 第32页 |
| ·PCR产物电泳及胶回收 | 第32-33页 |
| ·PCR产物的克隆 | 第33-34页 |
| ·含有目的片段的质粒DNA提取及检测 | 第34页 |
| ·羊草HVA1基因在cDNA中的扩增 | 第34-36页 |
| ·用Trizol提取羊草RNA | 第35页 |
| ·反转录成cDNA | 第35-36页 |
| ·用特异内侧引物PCR扩增目的片段 | 第36页 |
| ·目的片段的电泳、回收、克隆及鉴定 | 第36页 |
| ·水稻第三组LEA基因的克隆及其表达载体的构建 | 第36-38页 |
| ·cDNA及引物的合成 | 第36-37页 |
| ·PCR扩增水稻第三组LEA | 第37页 |
| ·目的片段的TA克隆、测序及酵母表达载体的构建 | 第37-38页 |
| 3 结果讨论 | 第38-48页 |
| ·羊草HVA1基因片段在DNA中的扩增结果与讨论 | 第38-42页 |
| ·兼并PCR电泳产物结果 | 第38页 |
| ·羊草HVA1基因片断的序列分析 | 第38-40页 |
| ·羊草HVA1核酸序列分析 | 第38-39页 |
| ·羊草HVA1氨基酸序列分析 | 第39-40页 |
| ·兼并引物与梯度PCR法协同使用的讨论 | 第40-42页 |
| ·羊草HVA1基因在cDNA中的扩增结果讨论 | 第42-43页 |
| ·水稻第三组LEA基因克隆与表达载体构建的结果分析 | 第43-44页 |
| ·羊草HVA1片段与水稻等其他第三组LEA序列的比较 | 第44-45页 |
| ·常规实验方法讨论 | 第45-48页 |
| ·基因组DNA提取中存在的问题 | 第45-46页 |
| ·RNA提取的要点 | 第46页 |
| ·PCR成功的关键 | 第46-48页 |
| 4 研究展望 | 第48-49页 |
| 参考文献 | 第49-59页 |
| 附录1 | 第59-62页 |
| 附录2 | 第62-63页 |
| 附录3 | 第63-64页 |
| 附图 | 第64-67页 |
| 致谢 | 第67页 |
