| 图形目录 | 第1-11页 |
| 表格目录 | 第11-13页 |
| 中文摘要 | 第13-16页 |
| 英文摘要 | 第16-19页 |
| 前言 | 第19-22页 |
| 第一章 短小芽孢杆菌(Bacillus pumilus)的放大发酵实验及发酵液中蛋白酶性质的研究 | 第22-48页 |
| 摘要 | 第23-24页 |
| 1 引言 | 第24-25页 |
| 2 材料与方法 | 第25-30页 |
| ·实验材料 | 第25-27页 |
| ·实验方法 | 第27-30页 |
| 3 结果 | 第30-41页 |
| ·短小芽孢杆菌UN-31-C-42的放大发酵实验 | 第30-31页 |
| ·发酵液的硫酸铵分级沉淀 | 第31-33页 |
| ·发酵液中碱性蛋白酶的稳定性 | 第33-34页 |
| ·发酵液中碱性蛋白酶SDS-PAGE和活性染色分析 | 第34-35页 |
| ·发酵液中蛋白酶性质的研究 | 第35-38页 |
| ·发酵液的脱毛实验 | 第38-41页 |
| 4 讨论 | 第41-45页 |
| ·短小芽孢杆菌UN-31-C-42的放大发酵 | 第41-42页 |
| ·短小芽孢杆菌UN-31-C-42的胞外蛋白酶 | 第42页 |
| ·短小芽孢杆菌UN-31-C-42的胞外蛋白酶的应用前景 | 第42-43页 |
| ·酶法脱毛机理的研究 | 第43-45页 |
| 5 参考文献 | 第45-48页 |
| 第二章 短小芽孢杆菌(Bacillus pumilus)碱性蛋白酶的纯化与性质研究 | 第48-81页 |
| 摘要 | 第49-50页 |
| 1 引言 | 第50-52页 |
| 2 材料与方法 | 第52-60页 |
| ·实验材料 | 第52-54页 |
| ·实验方法 | 第54-60页 |
| 3 结果 | 第60-72页 |
| ·蛋白酶的纯化 | 第60-64页 |
| ·碱性蛋白酶的性质研究 | 第64-70页 |
| ·蛋白酶分子量的测定 | 第64页 |
| ·蛋白酶等电点的测定 | 第64-65页 |
| ·DHAP的最适反应pH值 | 第65-66页 |
| ·DHAP的最适反应温度 | 第66-67页 |
| ·DHAP热稳定性的测定 | 第67-68页 |
| ·蛋白酶抑制剂对DHAP活性的影响 | 第68-69页 |
| ·金属离子对DHAP活性的影响 | 第69-70页 |
| ·蛋白酶N-末端氨基酸序列的测定 | 第70-71页 |
| ·纯酶的脱毛实验 | 第71-72页 |
| 4 讨论 | 第72-76页 |
| ·蛋白酶的纯化方法 | 第72-73页 |
| ·蛋白酶纯化的回收率 | 第73页 |
| ·DHAP的N-末端氨基酸序列的同源性 | 第73-74页 |
| ·DHAP能够单独完成脱毛过程 | 第74页 |
| ·DHAP在制革工业中的应用潜力和存在的问题 | 第74-76页 |
| 5 参考文献 | 第76-81页 |
| 第三章 短小芽孢杆菌(Bacillus pumilus)碱性蛋白酶基因的克隆和序列分析 | 第81-106页 |
| 摘要 | 第82-83页 |
| 1 引言 | 第83-85页 |
| 2 材料与方法 | 第85-91页 |
| ·实验材料 | 第85-87页 |
| ·实验方法 | 第87-91页 |
| 3 结果 | 第91-99页 |
| ·AP基因的PCR引物设计 | 第91页 |
| ·AP基因的PCR扩增 | 第91-92页 |
| ·PCR扩增产物的克隆与鉴定 | 第92-93页 |
| ·AP基因的序列分析 | 第93-95页 |
| ·AP基因基因推测的蛋白酶氨基酸构成分析 | 第95页 |
| ·AP基因的同源性分析 | 第95-99页 |
| 4 讨论 | 第99-102页 |
| ·AP基因的完整性 | 第99页 |
| ·AP基因的上游与下游区域 | 第99-100页 |
| ·AP基因的信号肽 | 第100页 |
| ·AP基因的密码子偏爱性 | 第100-102页 |
| 5 参考文献 | 第102-106页 |
| 第四章 短小芽孢杆菌(Bacillus pumilus)碱性蛋白酶基因在大肠杆菌和枯草杆菌中的表达 | 第106-127页 |
| 摘要 | 第107-108页 |
| 1 引言 | 第108-110页 |
| 2 材料与方法 | 第110-114页 |
| ·实验材料 | 第110-112页 |
| ·实验方法 | 第112-114页 |
| 3 结果 | 第114-119页 |
| ·AP基因在大肠杆菌中的表达 | 第114-115页 |
| ·pET-DHAP表达质粒的构建 | 第114-115页 |
| ·pET-DHAP质粒在大肠杆菌中的表达 | 第115页 |
| ·AP基因在枯草杆菌中的表达 | 第115-119页 |
| ·表达质粒pSU-BpAp的构建 | 第115-116页 |
| ·碱性蛋白酶基因在枯草杆菌WB600中的表达 | 第116-117页 |
| ·转化子pSU-BpAp／WB600发酵液的SDS-PAGE分析 | 第117页 |
| ·表达质粒pSU-BpAp在枯草杆菌WB600中的稳定性 | 第117-118页 |
| ·转化子pSU-BpAp／WB600发酵液的制备及酶活测定 | 第118页 |
| ·转化子pSU-BpAp／WB600发酵液的脱毛实验 | 第118-119页 |
| 4 讨论 | 第119-123页 |
| ·蛋白酶基因表达的策略 | 第119-120页 |
| ·AP基因异源表达产物的酶活性 | 第120-121页 |
| ·短小芽孢杆菌UN-31-C-42的应用前景 | 第121页 |
| ·展望 | 第121-123页 |
| 5 参考文献 | 第123-127页 |
| 文献综述 碱性蛋白酶研究进展 | 第127-150页 |
| 摘要 | 第128-129页 |
| 1 蛋白酶概述 | 第129-131页 |
| ·蛋白酶的分类及作用机理 | 第129-130页 |
| ·蛋白酶的用途 | 第130-131页 |
| 2 细菌的碱性蛋白酶 | 第131-133页 |
| ·微生物碱性蛋白酶的产生菌 | 第131页 |
| ·碱性蛋白酶的分类与性质 | 第131-132页 |
| ·枯草杆菌产生的蛋白酶 | 第132-133页 |
| ·碱性蛋白酶在我国的应用现状 | 第133页 |
| 3 碱性蛋白酶蛋白质工程进展 | 第133-135页 |
| ·改变底物特异性与酶活性 | 第133-134页 |
| ·提高酶的稳定性 | 第134页 |
| ·提高酶在有机相中的反应效率 | 第134-135页 |
| 4 碱性蛋白酶基因的克隆 | 第135-138页 |
| ·筛选蛋白酶基因的策略 | 第135-137页 |
| ·已克隆的枯草杆菌蛋白酶基因 | 第137-138页 |
| ·典型蛋白酶基因的比较 | 第138页 |
| 5 碱性蛋白酶基因的调控和表达 | 第138-141页 |
| ·蛋白酶基因的调控 | 第138-139页 |
| ·蛋白酶基因的表达 | 第139-141页 |
| 6 碱性蛋白酶研究的前景 | 第141-143页 |
| 7 参考文献 | 第143-150页 |
| 致谢 | 第150-151页 |
| 在读期间论文发表及获奖情况 | 第151-152页 |
