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蕲蛇蛇毒中自降解蛋白质的纯化与表征

第1章 综述第1-20页
 1.1 蕲蛇研究与应用进展第9-11页
  1.1.1 蛇与蛇毒简介第9页
  1.1.2 蕲蛇蛇毒的研究概况第9-11页
   1.1.2.1 理化性质第9-10页
   1.1.2.2 研究概况第10-11页
   1.1.2.3 开发与应用第11页
 1.2 蛇毒对凝血系统的影响第11-14页
  1.2.1 具有凝血功能的组分第12-13页
  1.2.2 具有抗凝血功能的组分第13-14页
 1.3 自降解蛋白质研究概况第14-18页
  1.3.1 蛋白质自降解特性第14-15页
  1.3.2 已知的蛋白质自降解原理第15-18页
 1.4 本课题的提出及目的第18-20页
第2章 材料与方法第20-40页
 2.1 实验材料第20页
 2.2 课题流程第20页
 2.3 实验方法第20-40页
  2.3.1 自降解蛋白质及其降解产生组分的分离与纯化方法第20-26页
   2.3.1.1 嗜硫色谱法第21-23页
   2.3.1.2 离子交换色谱法第23-24页
   2.3.1.3 凝胶过滤色谱法第24-26页
  2.3.2 蕲蛇蛇毒成分分析法第26-33页
   2.3.2.1 SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)第26-29页
   2.3.2.2 聚丙烯酰胺凝胶电泳(PAGE)第29-31页
   2.3.2.3 毛细管液相色谱法第31-32页
   2.3.2.4 蛋白质含量测定(Folin-酚法)第32-33页
  2.3.3 蕲蛇蛇毒中自降解蛋白质的表征第33-38页
   2.3.3.1 纯度鉴定第33-34页
   2.3.3.2 分子量鉴定第34页
   2.3.3.3 自降解性质鉴定第34-35页
   2.3.3.4 抗凝活性鉴定第35-36页
   2.3.3.5 蛋白酶活性表征第36-38页
   2.3.3.6 中性糖含量测定第38页
  2.3.4 一级结构测定第38-40页
第3章 结果与讨论第40-62页
 3.1 蕲蛇蛇毒中自降解蛋白质的发现第40-41页
 3.2 降解产生组分的分离纯化第41-42页
 3.3 自降解蛋白质的分离纯化第42-50页
  3.3.1 嗜硫色谱的初步分离第42-45页
   3.3.1.1 不同缓冲体系的影响第42页
   3.3.1.2 缓冲液pH的影响第42-43页
   3.3.1.3 缓冲液盐浓度的影响第43-45页
  3.3.2 离子交换色谱的进一步纯化第45-50页
   3.3.2.1 离子交换柱的选择第45-46页
   3.3.2.2 缓冲液体系的选择第46-47页
   3.3.2.3 洗脱条件的选择第47-50页
 3.4 自降解蛋白质的表征第50-59页
  3.4.1 纯度鉴定及分子量标定第50-53页
   3.4.1.1 纯度鉴定第50页
   3.4.1.2 分子量标定第50-53页
  3.4.2 自降解特性的研究第53-55页
   3.4.2.1 保温时间对降解速度的影响第53页
   3.4.2.2 pH对降解速度的影响第53-54页
   3.4.2.3 温度对降解速度的影响第54-55页
  3.4.3 抗凝血活性的测定第55-57页
   3.4.3.1 pH对抗凝血活性的影响第56页
   3.4.3.2 温度对抗凝血活性的影响第56页
   3.4.3.3 保温时间对抗凝血活性的影响第56-57页
  3.4.4 蛋白酶活性的测定第57-59页
   3.4.4.1 pH对蛋白酶活性的影响第58页
   3.4.4.2 温度对蛋白酶活性的影响第58页
   3.4.4.3 保温时间对蛋白酶活性的影响第58-59页
   3.4.4.4 抑制剂第59页
  3.4.5 HQ-5中中性糖含量测定第59页
 3.5 HQ-5与TSK-2的性质对比第59-60页
 3.6 TSK-2的序列比较与分析第60-62页
第4章 总结与展望第62-65页
 4.1 总结第62-63页
 4.2 展望第63-65页
参考文献第65-73页
附录A 自降解组分的毛细管电泳图第73-77页
附录B TSK-2的N-端序列第77-81页
附录C TSK-2的多序列比较第81-83页

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