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诊断慢性粒细胞白血病的电化学生物传感器的研究

摘要第1-4页
Abstract第4-8页
1 前言第8-18页
   ·核酸适体的概念及特点第8-9页
   ·核酸适体在研究中的状况第9-10页
   ·核酸适体电化学生物传感器的研究进展第10-14页
     ·传感器概述第10页
     ·生物传感器的构成第10页
     ·核酸适体生物传感器第10-11页
     ·核酸适体电化学生物传感器的分类和优越性第11-14页
   ·纳米技术及其在电化学生物传感器领域中的应用第14-15页
     ·纳米材料及其特点、分类及其在肿瘤诊断中的应用第14页
     ·胶体金技术第14-15页
     ·磁性纳米粒子第15页
   ·研究构想、意义及技术路线图第15-18页
     ·前期研究第16页
     ·本研究的构想及意义第16-17页
     ·技术路线图第17-18页
2 实验第18-38页
   ·细胞及细胞株来源第18页
   ·试剂与材料第18-20页
   ·所用设备及仪器第20-21页
   ·适体及引物的合成第21-23页
     ·适体的化学合成第21-23页
     ·引物的设计与合成第23页
   ·核酸适体的扩增第23-26页
     ·合成适体克隆菌质粒抽提第23-24页
     ·菌落PCR扩增第24-25页
     ·PCR扩增产物纯化第25-26页
     ·PCR纯化产物电泳检测第26页
   ·适体的编号、随机化分组和修饰第26-30页
     ·适体的编号、随机化分组第26页
     ·适体的氨基修饰第26-28页
     ·氨基标记产物电泳检测第28页
     ·适体的巯基修饰第28-30页
     ·巯基标记产物电泳检测第30页
   ·适体与纳米材料的固定第30-31页
     ·带羧基的磁性纳米粒子与带氨基的核酸适体结合比例的确定第30页
     ·在磁性纳米颗粒上固定核酸适配体Ⅰ第30页
     ·巯基标记核酸适体Ⅱ金胶探针制备结合比例的确定第30-31页
   ·慢性粒细胞白血病K562细胞的培养第31-32页
     ·细胞的传代培养第31页
     ·细胞的冻存第31-32页
     ·细胞的活化第32页
   ·不同适体与慢性粒细胞白血病K562细胞结合位点的确定第32-36页
     ·带羧基磁性纳米颗粒与核酸适体的结合物与慢性粒细胞白血病K562细胞结合及原子分光光度计对Fe含量测定第32-34页
     ·巯基标记核酸适体的金胶探针与慢性粒细胞白血病K562细胞结合及Au元素含量的测定第34-36页
     ·不同适体对慢性粒细胞白血病K562细胞的识别与结合位点的确定第36页
   ·慢性粒细胞白血病K562细胞的特异性识别与分离及电化学检测最佳组合的筛查第36-37页
     ·慢性粒细胞白血病K562细胞的特异性识别与分离第37页
     ·电化学的检测及最佳组合的筛选第37页
   ·适体检测方法灵敏度及检测限的测定第37页
   ·核酸适体检测方法重复性试验第37-38页
3 结果与分析第38-48页
   ·核酸适体扩增PCR结果第38页
   ·氨基标记适体PCR结果第38-39页
   ·巯基标记适体PCR结果第39-40页
   ·带羧基的磁性纳米粒子与带氨基的核酸适体结合比例的确定第40页
   ·巯基标记核酸适体Ⅱ金胶探针制备结合比例的确定第40-41页
   ·原子吸收分光光度计测定Fe含量的标准曲线(如图7)第41-42页
   ·原子吸收分光光度计测定Au含量的标准曲线(如图8)第42页
   ·带羧基磁性纳米颗粒标记的核酸适体与CMLK562结合物中Fe含量第42页
   ·带巯基的核酸适体与CMLK562结合物中Au含量第42-43页
   ·不同核酸适体与CMLK562结合位点的确定结果第43-47页
   ·核酸适体检测方法重复性试验结果第47-48页
4 讨论第48-51页
5 结论第51-52页
参考文献第52-55页
縮略词表第55-56页
攻读硕士学位期间发表的学术论文第56-57页
致谢第57页

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