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猪繁殖与呼吸综合征病毒分子遗传变异与疫苗研究

英文缩写注释第1-13页
中文摘要第13-16页
英文摘要第16-19页
文献综述第19-56页
 综述一 猪繁殖与呼吸综合征研究进展第19-41页
  1. 病原学第19-25页
   ·PRRSV 的分类地位及生物学特性第19-20页
   ·病毒基因组结构第20-22页
   ·病毒基因组的转录及表达第22页
   ·病毒基因组编码的主要蛋白第22-25页
  2. 流行病学第25-26页
  3. 临床症状第26-27页
  4. 病理变化第27-29页
   ·临床病理学第27页
   ·肉眼病变第27页
   ·显微病变第27-28页
   ·超微结构病变第28-29页
  5. 持续性感染第29页
  6. 病毒遗传变异第29-33页
   ·生物性与抗原性变异第30-31页
   ·致病性与病变差异第31-32页
   ·基因型与遗传变异第32-33页
  7. 实验室诊断技术第33-37页
   ·抗原学检测技术第33-34页
     ·病毒分离技术第33页
     ·免疫过氧化物酶技术(IPA)第33-34页
     ·免疫胶体金技术(IGSS)第34页
     ·免疫荧光抗体染色技术第34页
     ·血凝(HA)和血凝抑制(HI)试验第34页
   ·血清学诊断技术第34-36页
     ·免疫过氧化物酶单层细胞试验(IPMA)第34-35页
     ·间接荧光抗体试验(IFA)第35页
     ·血清中和试验(SN)第35页
     ·酶联免疫吸附试验(ELISA)第35-36页
   ·分子生物学诊断技术第36-37页
     ·核酸探针技术第36-37页
     ·RT-PCR 技术第37页
  8. 免疫应答第37-38页
   ·体液免疫第37-38页
   ·细胞免疫第38页
  9. 防治对策第38-40页
  10. 结语第40-41页
 综述二 猪繁殖与呼吸综合征病毒传染性 cDNA 分子克隆研究进展第41-51页
  1. 正链 RNA 病毒传染性cDNA 分子克隆的基本原理和构建方法第41-43页
  2. PRRSV 基因组和亚基因mRNA 的特征第43-44页
  3. PRRSV 传染性cDNA 分子克隆的构建第44-46页
  4. PRRSV 传染性cDNA 分子克隆的应用第46-50页
   ·定点突变第46-47页
   ·基因缺失第47-48页
   ·表达外源序列第48页
   ·构建多病毒嵌合体第48-49页
   ·动物接种试验第49-50页
  5. 前景展望第50-51页
 综述三 猪断奶后多系统衰竭综合征诊断技术进展第51-56页
  1. 流行病学第51页
  2. 临床症状第51-52页
  3. 病理变化第52页
  4. 病毒分离第52页
  5. 聚合酶链式反应(PCR)第52-53页
  6. 限制性片段长度多态性分析(RFLP)第53-54页
  7. 免疫组织化学技术(IHC)第54页
  8. 原位核酸杂交(ISH)第54页
  9. 免疫荧光技术第54-55页
  10. 酶联免疫吸附试验(ELISA)第55-56页
试验研究第56-125页
 第一部分 PRRS 血清学调查与病毒分离鉴定第56-66页
  1. 引言第57页
  2. 材料与方法第57-59页
   ·主要试剂和材料第57-58页
   ·方法第58-59页
     ·样品采集第58页
     ·ELISA第58页
     ·病毒分离第58页
     ·PRRSV 分离株毒价测定第58页
     ·免疫荧光抗体试验第58-59页
     ·动物回归试验第59页
  3. 结果第59-64页
   ·ELISA 检测结果第59页
   ·病毒分离结果第59-60页
   ·PRRSV 分离株毒价测定第60-61页
   ·免疫荧光抗体试验第61-62页
   ·动物回归试验结果第62-64页
     ·临床症状与病理剖检变化第62-63页
     ·肺脏病理组织学变化第63页
     ·病毒血症持续时间研究第63-64页
  4.讨论第64-66页
 第二部分 PRRSV 山东分离株分子遗传变异分析第66-79页
  1. 引言第67页
  2. 材料与方法第67-70页
   ·主要试剂和材料第67-68页
     ·病毒来源第67页
     ·细胞、质粒和菌体第67页
     ·试剂与酶类第67-68页
     ·仪器第68页
   ·试验方法第68-70页
     ·样品准备与处理第68页
     ·RT-PCR第68-70页
  3. 结果第70-77页
   ·PRRSV 分离株的基因扩增结果第70-71页
   ·核苷酸和氨基酸序列分析第71-77页
     ·ORF5 基因核苷酸及推导的氨基酸序列分析第71-73页
     ·ORF6 基因核苷酸序列分析第73-75页
     ·ORF7 基因核苷酸序列分析第75-76页
     ·部分 Nsp2 基因推导氨基酸序列分析第76-77页
  4.讨论第77-79页
 第三部分 PRRS 油乳剂灭活疫苗研究第79-102页
  试验一 PRRSV SD1 株细胞培养生物学特性研究第80-85页
   1. 材料与方法第80-81页
   ·主要试剂与材料第80页
   ·方法第80-81页
   2. 结果第81-83页
   3. 讨论第83-85页
  试验二 PRRS 灭活疫苗(SD1 株)的研制与安全性试验第85-90页
   1. 材料与方法第85-87页
   ·毒种第85页
   ·制苗用毒液的繁殖第85-86页
   ·灭活第86页
   ·制苗第86页
   ·成品检验第86-87页
   2. 疫苗试制及检验结果第87-90页
   ·TCID_(50)测定第87页
   ·灭活检验第87-88页
   ·疫苗性状测定第88页
   ·无菌检验第88页
   ·甲醛、硫柳汞含量测定第88页
   ·安全检验第88-90页
  试验三 PRRS 灭活疫苗(SD1 株)效力试验研究第90-93页
   1. 材料与方法第90页
   ·材料第90页
   ·方法第90页
   2. 结果第90-92页
   ·仔猪免疫效力试验与攻毒保护试验第90页
   ·母猪免疫效力试验与攻毒保护试验第90-92页
   3. 讨论第92-93页
  试验四 PRRS 灭活疫苗(SD1 株)免疫期与保存期试验第93-96页
   1. 材料与方法第93页
   ·Marc-145 细胞第93页
   ·MEM第93页
   ·小牛血清第93页
   ·疫苗第93页
   ·试验动物第93页
   ·试验方法第93页
   2. 结果第93-96页
   ·免疫期试验第93-94页
   ·保存期试验第94-96页
  试验五 PRRS 灭活疫苗(SD1 株)田间试验第96-99页
   1. 材料与方法第96页
   2. 结果第96-99页
  试验六 PRRS 灭活疫苗区域试验报告第99-102页
   1. 材料第99-100页
   2. 结果第100-102页
 第四部分 从 PRRS 疑似病料中检测 PCV2 的研究第102-110页
  1. 引言第103-104页
  2. 材料与方法第104-105页
   ·主要试剂材料第104页
   ·方法第104-105页
     ·病料收集第104页
     ·PCR 检测圆环病毒2 型第104-105页
     ·病毒电镜技术第105页
     ·病毒遗传进化树分析第105页
  3. 结果第105-108页
   ·PCR 检测结果第105-106页
   ·病毒电镜观察第106-107页
   ·病毒同源性比较和遗传进化树分析第107-108页
  4. 讨论第108-110页
 第五部分 应用 PRRSV 传染性克隆构建 PRRSV-PCV2 重组病毒的研究第110-125页
  1. 引言第111页
  2. 材料与方法第111-117页
   ·主要试剂与材料第111-112页
   ·试验方法第112-117页
  3. 结果第117-124页
   ·PCR 扩增 PCV2 ORF2 研究第117-118页
   ·PRRSV-PCV2 重组cDNA 克隆的 PCR 鉴定第118页
   ·限制性酶切鉴定 PRRSV-PCV2 重组cDNA 克隆第118-119页
   ·PRRSV-PCV2 序列分析第119页
   ·Marc-145 细胞转染试验第119-120页
   ·免疫荧光染色试验第120-121页
   ·病毒噬斑形成单位(PFU)试验第121-122页
   ·动物接种试验第122-124页
  4. 讨论第124-125页
试验结论与创新点第125-126页
参考文献第126-142页
附录: 读博士学位期间发表论文情况第142-143页
致谢第143页

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