| 中文摘要 | 第1-13页 |
| Abstract | 第13-16页 |
| 1 前言 | 第16-45页 |
| ·卵母细胞老化的机理 | 第16-17页 |
| ·卵母细胞老化过程中所发生的分子、生化和细胞学的变化 | 第17-38页 |
| ·ROS | 第17-19页 |
| ·钙离子平衡 | 第19-22页 |
| ·线粒体 | 第22-24页 |
| ·GSH | 第24-28页 |
| ·ATP | 第28-29页 |
| ·Bcl-2 | 第29-30页 |
| ·组蛋白乙酰化 | 第30-31页 |
| ·MPF 和MAPK | 第31-33页 |
| ·细胞骨架纤维 | 第33-35页 |
| ·皮质颗粒 | 第35-36页 |
| ·老化卵母细胞对孤雌激活的敏感性升高 | 第36页 |
| ·胞质碎裂 | 第36-37页 |
| ·卵母细胞老化对受精和胚胎发育的影响 | 第37-38页 |
| ·卵丘细胞对卵母细胞老化的影响 | 第38-39页 |
| ·卵母细胞老化的调控 | 第39-40页 |
| ·丙酮酸的作用 | 第40-45页 |
| ·丙酮酸作为能量物质 | 第40-41页 |
| ·丙酮酸作为抗氧化剂 | 第41-44页 |
| ·丙酮酸可能作为一种潜在的信使调节细胞内的钙离子信号 | 第44-45页 |
| 2 材料与方法 | 第45-56页 |
| ·主要试剂及配制 | 第45-46页 |
| ·实验动物及超排处理 | 第46-47页 |
| ·体内成熟卵母细胞的获取 | 第47页 |
| ·卵母细胞体外老化处理 | 第47页 |
| ·卵丘颗粒细胞单层的培养 | 第47页 |
| ·条件化培养基的制备 | 第47页 |
| ·卵母细胞的孤雌激活 | 第47-48页 |
| ·卵母细胞的体外受精 | 第48页 |
| ·胚胎培养 | 第48页 |
| ·透明带硬化测试 | 第48-49页 |
| ·MPF 活性检测 | 第49页 |
| ·实验材料的制备 | 第49页 |
| ·蛋白磷酸化反应 | 第49页 |
| ·SDS 聚丙烯酰胺凝胶电泳 | 第49页 |
| ·放射自显影 | 第49页 |
| ·MPF 活性的定量分析 | 第49页 |
| ·毛细管电泳检测培养液中丙酮酸浓度 | 第49-50页 |
| ·观察核构型和胞质碎裂 | 第50页 |
| ·卵母细胞谷胱甘肽含量的测定 | 第50页 |
| ·卵母细胞内ROS 水平的检测 | 第50-51页 |
| ·免疫荧光显微镜检查法 | 第51-52页 |
| ·皮质颗粒染色 | 第51页 |
| ·卵母细胞α－微管蛋白染色 | 第51-52页 |
| ·卵母细胞线粒体染色 | 第52页 |
| ·Bcl-2 蛋白染色 | 第52页 |
| ·组蛋白乙酰化染色 | 第52页 |
| ·激光扫描共聚焦显微术 | 第52-53页 |
| ·实验设计 | 第53-55页 |
| ·数据统计分析 | 第55-56页 |
| 3 结果与分析 | 第56-69页 |
| ·卵丘细胞通过消耗丙酮酸促进卵母细胞老化 | 第56-59页 |
| ·丙酮酸能够降低老化卵母细胞的激活率并升高其MPF 活性 | 第56-57页 |
| ·条件化培养基中低的丙酮酸含量是其促卵母细胞老化作用的原因 | 第57-59页 |
| ·老化过程中添加丙酮酸能够缓解老化过程对卵母细胞受精及发育能力的影响 | 第59-61页 |
| ·老化过程中添加不同浓度的丙酮酸对COCs和DOs体外老化后体外受精及其胚胎发育能力的影响 | 第59-60页 |
| ·丙酮酸、MG132 和咖啡因抑制卵母细胞老化后对卵母细胞受精及发育能力的影响 | 第60-61页 |
| ·丙酮酸能够抑制老化卵母细胞中皮质颗粒的提前胞吐 | 第61页 |
| ·丙酮酸能够缓解老化过程中透明带的硬化 | 第61-63页 |
| ·丙酮酸增加老化卵母细胞中抗凋亡蛋白BCL-2 的水平 | 第63页 |
| ·老化过程中添加丙酮酸对卵母细胞GSH 水平的影响 | 第63页 |
| ·老化过程中添加丙酮酸对卵母细胞中ROS 水平的影响 | 第63-65页 |
| ·丙酮酸降低老化卵母细胞中的组蛋白乙酰化水平 | 第65页 |
| ·丙酮酸对老化卵母细胞核构型和胞质碎裂的影响 | 第65-66页 |
| ·老化过程中添加丙酮酸对线粒体分布的影响 | 第66-67页 |
| ·老化过程中添加丙酮酸对胞质微管组装的影响 | 第67-69页 |
| 4 讨论 | 第69-75页 |
| ·卵丘细胞通过消耗丙酮酸抑制卵母细胞孤雌激活率升高和MPF 活性降低 | 第69-70页 |
| ·丙酮酸通过维持卵母细胞的氧化还原状态从而抑制氧化应激对卵母细胞的损伤 | 第70-71页 |
| ·丙酮酸抑制老化卵母细胞中组蛋白的乙酰化 | 第71页 |
| ·丙酮酸能够抑制老化卵母细胞超微结构的变化 | 第71-73页 |
| ·丙酮酸能够抑制老化卵母细胞的线粒体聚集 | 第71页 |
| ·丙酮酸能够抑制卵母细胞老化过程中CG 的丢失 | 第71-72页 |
| ·丙酮酸能够抑制卵母细胞老化过程中微管组装的变化 | 第72-73页 |
| ·丙酮酸缓解老化对卵母细胞受精及发育能力所造成的损伤 | 第73-75页 |
| 5 结论 | 第75-77页 |
| 参考文献 | 第77-92页 |
| 附录：图版及图版说明 | 第92-95页 |
| 致谢 | 第95-96页 |
| 作者简介及发表论文情况 | 第96页 |
