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黄瓜RubisCO活化酶基因(RCA)正义表达载体的构建及其遗传转化的研究

中文摘要第1-11页
Abstract第11-13页
1 引言第13-21页
   ·RUBISCO 与植物的光合作用研究进展第13-17页
     ·RubisCO 的基本性质第13-14页
     ·结构与组装第14-16页
     ·活性调节及其活化机制第16页
     ·基因工程第16-17页
   ·RCA 与植物光合作用研究进展第17-20页
     ·RCA 的分子特性第17-18页
     ·RCA 对RubisCO 的活化第18-19页
     ·环境因子对RCA 的影响第19页
     ·RCA 基因工程第19-20页
   ·本研究的目的和意义第20-21页
2 材料与方法第21-37页
   ·试验材料第21-22页
     ·植物材料第21页
     ·菌株与质粒第21页
     ·酶及生化试剂第21页
     ·PCR 引物第21-22页
   ·试验方法第22-37页
     ·黄瓜rbcL、rbcS 片段和RCA 基因全长序列的获得第22-30页
     ·黄瓜RCA 基因正义表达载体的构建第30页
     ·根癌农杆菌LBA4404 感受态细胞的制备与转化第30-31页
     ·子房注射法转化黄瓜第31-34页
     ·低温弱光下rbcL、rbcS 和RCA 基因表达及其对光合速率的影响第34-37页
3. 结果与分析第37-48页
   ·黄瓜RBCL、RBCS 及RCA 基因的克隆第37-42页
     ·rbcL 与rbcS 片段的克隆第37-38页
     ·RCA 基因的克隆第38-39页
     ·RCA 核苷酸及氨基酸序列第39-41页
     ·黄瓜RCA 基因的核苷酸与氨基酸序列同源性分析第41-42页
   ·黄瓜RCA 基因正义表达载体的构建第42-43页
     ·正义表达载体的构建第42页
     ·正义植物表达载体的鉴定第42-43页
   ·RCA 基因转化烟草第43页
   ·RCA 基因转化黄瓜及转基因植株的初步检测第43-44页
   ·低温弱光下黄瓜幼苗RBCL、RBCS 及RCA 基因的表达第44-48页
     ·目的基因与内参基因扩增效率一致性的检测第44页
     ·融解曲线分析第44-45页
     ·rbcL 和rbcS 基因表达第45-46页
     ·RCA 基因表达第46-47页
     ·低温弱光下黄瓜幼苗光合速率第47-48页
4. 讨论第48-52页
   ·RNA 提取过程中的问题及对策第48页
   ·RCA 基因全长的获得第48-49页
   ·正义表达载体的构建第49页
   ·关于烟草组培过程中的问题第49-50页
   ·子房注射法获得转基因黄瓜第50页
   ·实时荧光定量测定光合关键酶的表达第50-52页
5 结论第52-53页
6 下一步研究工作的设想第53-54页
参考文献第54-63页
致谢第63-64页
攻读硕士学位期间发表的论文第64页

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