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DWF4影响茉莉素信号及其内含子调控基因表达的研究

摘要第1-10页
Abstract第10-11页
第一章 综述第11-30页
 1 芸苔素的生物功能、生物合成以及与其他激素的相互作用第11-19页
   ·芸苔素的生物功能第11-13页
     ·芸苔素促进细胞生长分裂第11页
     ·芸苔素控制细胞分化第11-12页
     ·芸苔素调控植物育性及衰老进程第12页
     ·芸苔素促进光合作用第12页
     ·芸苔素提高植物的抗逆性第12-13页
   ·芸苔素的生物合成途径及其突变体第13-17页
     ·芸苔素的生物合成第13-15页
     ·芸苔素生物合成过程中的突变体第15-17页
   ·芸苔素与其他植物激素的相互作用第17-19页
     ·芸苔素与生长素的相互作用第17页
     ·芸苔素与赤霉素的相互作用第17-18页
     ·芸苔素与脱落酸的相互作用第18页
     ·芸苔素与细胞分裂素的相互作用第18页
     ·芸苔素与乙烯的相互作用第18-19页
 2 茉莉素的生物功能及其信号传导途径第19-24页
   ·茉莉素的生物功能第19-20页
     ·参与植物的抗性反应第19页
     ·参与植物个体间信号传递第19页
     ·影响植物的萌发第19-20页
     ·影响花粉的发育第20页
     ·促进果实和块茎的成熟第20页
   ·茉莉素的信号传导途径第20-22页
   ·茉莉素与其他激素之间的相互作用第22-24页
     ·茉莉素与水杨酸的相互作用第22-23页
     ·茉莉素与乙烯的相互作用第23页
     ·茉莉素与生长素的相互作用第23-24页
     ·茉莉素与脱落酸的相互作用第24页
 3 内含子与基因表达调控第24-28页
   ·植物基因内含子的结构特征第24-25页
   ·植物基因内含子对基因表达调控的影响第25-27页
     ·植物基因内含子影响基因表达模式第25-26页
     ·植物基因内含子增强基因表达水平第26-27页
   ·植物基因内含子驱动基因表达第27-28页
 4 本课题的研究目的与意义第28-30页
   ·芸苔素与茉莉素之间的相互作用第28-29页
   ·内含子对DWF4基因表达的影响第29-30页
第二章 拟南芥DWF4基因影响茉莉素信号传导的研究第30-44页
 1 材料与试剂第30-31页
   ·植物材料第30页
   ·试剂第30页
   ·培养基第30-31页
 2 方法第31-32页
   ·拟南芥的种植与培养第31页
   ·根长的测量和数据统计第31-32页
   ·育性的统计分析第32页
 3 结果与分析第32-42页
   ·芸苔素生物合成受阻影响拟南芥对茉莉素的反应第32-37页
     ·BRZ的浓度摸索及对Co1-0与coi1-2根的生长的影响第32-33页
     ·Co1-0芸苔素生物合成受阻后对茉莉素表现为超敏感第33-34页
     ·coi1-2芸苔素生物合成受阻部分恢复对茉莉素的敏感性第34-37页
   ·DWF4对茉莉素调控拟南芥育性的影响第37-42页
     ·dwf4coi1-2与coi1-2的生长状态比较第37-40页
     ·coi1-2与dwf4coi1-2的育性比较第40-42页
 4 讨论第42-44页
   ·茉莉素敏感性实验中根长的测量第42页
   ·环境对拟南芥突变体育性的影响第42页
   ·茉莉素与芸苔素对拟南芥生长的影响第42-43页
   ·dwf4coi1-2生长缓慢造成对育性统计的影响第43-44页
第三章 拟南芥DWF4基因的内含子影响基因表达的初步探讨第44-62页
 1 材料与试剂第44-45页
   ·植物材料第44页
   ·酶与试剂盒第44页
   ·菌株与质粒第44页
   ·培养基第44-45页
 2 实验方法第45-53页
   ·核酸的提取与检测第45-46页
     ·DNA的提取第45页
     ·RNA的提取第45页
     ·测定所抽提RNA浓度的OD_(260)及OD_(260)/OD_(280)值第45-46页
     ·检测所抽提的RNA质量第46页
   ·目的片段的获得第46-48页
     ·反转录第46页
     ·DWF4全长基因和cDNA的扩增第46-47页
     ·扩增片段的纯化第47-48页
   ·pMcD4和pMD4植物转化载体的构建第48-49页
     ·扩增片段及载体的酶切第48页
     ·质粒酶切产物的纯化第48-49页
     ·酶切产物的连接第49页
   ·大肠杆菌的转化与鉴定第49-51页
     ·大肠杆菌感受态的制备第49页
     ·大肠杆菌热激法转化第49-50页
     ·转化子的菌落PCR鉴定第50页
     ·质粒的扩增第50页
     ·质粒DNA的提取第50-51页
     ·转化子的测序鉴定第51页
   ·农杆菌的转化与鉴定第51-52页
     ·农杆菌感受态的制备第51页
     ·农杆菌电击法转化第51-52页
     ·菌落PCR鉴定转化子第52页
   ·拟南芥的浸染转化及鉴定第52-53页
     ·拟南芥的培养第52页
     ·农杆菌的培养第52页
     ·转化菌液的制备第52页
     ·植物的浸染转化第52页
     ·转化植株的抗性筛选第52-53页
     ·转化植株的PCR鉴定第53页
   ·纯合转化植株的筛选第53页
     ·T-DNA单拷贝株系的鉴定第53页
     ·纯合株系的筛选第53页
   ·基因表达分析第53页
 3 结果与分析第53-60页
   ·pMcD4和pMD4转化载体的构建第53-55页
     ·拟南芥总RNA的提取第53-54页
     ·目的片段的扩增第54页
     ·目的片段与载体pMYC2的酶切与连接第54-55页
   ·大肠杆菌和农杆菌的转化第55-57页
     ·pMcD4和pMD4转化大肠杆菌第55-56页
     ·pMcD4和pMD4质粒转化农杆菌第56-57页
   ·拟南芥的转化及遗传筛选第57-58页
     ·农杆菌介导法转化拟南芥及转化植株的鉴定第57页
     ·纯合单拷贝转基因植株的筛选与鉴定第57-58页
   ·内含子对DWF4基因表达的影响第58-60页
     ·转基因植株的形态第58-59页
     ·转基因拟南芥的基因表达第59-60页
 4 讨论第60-62页
   ·载体的构建与转化子的PCR检测第60页
   ·单拷贝插入突变体的筛选与鉴定第60页
   ·内含子对DWF4基因表达的影响第60-62页
结论第62-63页
参考文献第63-72页
附录A:缩略词表第72-73页
附录B:主要试剂配置第73-76页
致谢第76-77页
作者简历第77页

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