| 摘要 | 第1-8页 |
| Abstract | 第8-15页 |
| 第一章 绪论 | 第15-26页 |
| ·文献综述 | 第15-24页 |
| ·植物抵御非生物逆境的分子机制 | 第15-16页 |
| ·参与植物非生物逆境信号转递的信号分子 | 第16-20页 |
| ·植物耐受非生物胁迫的三条信号转导途径 | 第20-21页 |
| ·植物抗逆相关MAPK 磷酸化级联途径 | 第21-23页 |
| ·植物抗逆基因工程研究进展 | 第23页 |
| ·植物基因的可变剪接现象 | 第23-24页 |
| ·本研究的内容和意义 | 第24-25页 |
| ·实验设计 | 第25-26页 |
| 第二章 棉花抗逆相关新基因GhDr1 及其启动子的克隆、可变剪接分析 | 第26-45页 |
| ·材料与方法 | 第26-32页 |
| ·实验材料 | 第26-27页 |
| ·方法 | 第27-32页 |
| ·GhDr1 的基因组序列获得 | 第32-35页 |
| ·筛选陆地棉Y18 基因组BAC 文库 | 第32-33页 |
| ·TAIL-PCR 获得未知基因片段的5’端侧翼序列 | 第33-34页 |
| ·TAIL-PCR 获得未知基因片段的3’端侧翼序列 | 第34-35页 |
| ·GhDr1 的cDNA 序列获得及可变剪接现象分析 | 第35-41页 |
| ·RT-PCR 和TAIL-PCR 获得GhDr1 的cDNA 序列 | 第35-37页 |
| ·GhDr1 的基因结构分析 | 第37-39页 |
| ·GhDr1 的可变剪接分析 | 第39-41页 |
| ·GhDr1 的启动子序列获得及分析 | 第41-43页 |
| ·讨论与小结 | 第43-45页 |
| ·讨论 | 第43页 |
| ·小结 | 第43-45页 |
| 第三章 GhDr1 的生物信息学分析 | 第45-56页 |
| ·方法 | 第45-46页 |
| ·GhDr1 的蛋白序列特征、二级结构分析 | 第46-48页 |
| ·GhDr1 的亲疏水性、亚细胞定位及潜在磷酸化位点预测 | 第48-49页 |
| ·GhDr1 的同源比对和系统进化树分析 | 第49-51页 |
| ·GhDr1 的功能预测 | 第51-53页 |
| ·讨论与小结 | 第53-56页 |
| 第四章 棉花中GhDr1 的表达谱及亚细胞定位 | 第56-67页 |
| ·材料与方法 | 第56-60页 |
| ·实验材料 | 第56页 |
| ·方法 | 第56-60页 |
| ·Real-Time PCR 分析GhDr1 在棉花各生长发育时期器官中的相对表达量 | 第60-63页 |
| ·热硼酸法及试剂盒法提取棉花各组织总RNA 比较 | 第60-61页 |
| ·GhDr1 在棉花中的表达谱分析 | 第61-63页 |
| ·GhDr1 的亚细胞定位分析 | 第63-65页 |
| ·GhDr1-GFP 融合表达载体的构建 | 第63-65页 |
| ·基因枪轰击洋葱表皮瞬时表达分析 | 第65页 |
| ·讨论与小结 | 第65-67页 |
| 第五章 转GhDr1 纯系拟南芥植株的获得 | 第67-80页 |
| ·材料与方法 | 第67-72页 |
| ·实验材料 | 第67页 |
| ·方法 | 第67-72页 |
| ·pBIGhDr1GUS 植物双元表达载体的构建 | 第72-74页 |
| ·中间表达载体的构建 | 第72页 |
| ·pBIGhDr1GUS 植物过表达载体的构建 | 第72-74页 |
| ·转化模式植物拟南芥 | 第74-75页 |
| ·电击法转化农杆菌LBA4404 | 第74-75页 |
| ·改良转化拟南芥的蘸花法 | 第75页 |
| ·转基因纯系植株的获得 | 第75-77页 |
| ·T1 代植株的PCR 鉴定、卡那抗性筛选和GUS 染色鉴定 | 第75-77页 |
| ·T2 代植株的分离比筛选 | 第77页 |
| ·Real-Time PCR 分析获得转GhDr1 的高表达及低表达植株 | 第77-79页 |
| ·讨论与小结 | 第79-80页 |
| 第六章 GhDr1 在转基因拟南芥中的抗逆相关生理功能分析 | 第80-90页 |
| ·材料与方法 | 第80-81页 |
| ·实验材料 | 第80页 |
| ·方法 | 第80-81页 |
| ·拟南芥At4G02210 基因T-DNA 插入纯合突变体的获得 | 第81-83页 |
| ·T2 代分离比筛选 | 第82页 |
| ·三引物法鉴定纯合突变体 | 第82-83页 |
| ·GhDr1 的抗逆相关生理实验 | 第83-88页 |
| ·未处理时转基因株系生长情况好于野生型 | 第83-85页 |
| ·转GhDr1 过表达拟南芥株系对外源ABA 敏感性分析 | 第85页 |
| ·转GhDr1 过表达拟南芥株系对盐胁迫敏感性分析 | 第85-86页 |
| ·转GhDr1 过表达拟南芥株系在ABA 平板上的萌发实验 | 第86-87页 |
| ·转GhDr1 过表达拟南芥株系在NaCl 平板上的萌发实验 | 第87-88页 |
| ·讨论与小结 | 第88-90页 |
| ·讨论 | 第88页 |
| ·小结 | 第88-90页 |
| 第七章 全文结论 | 第90-92页 |
| ·通过本论文研究得到的主要结论 | 第90-92页 |
| 参考文献 | 第92-99页 |
| 致谢 | 第99-100页 |
| 作者简历 | 第100页 |
